禽白血病病毒（ALV）屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科甲型反轉(zhuǎn)錄病毒屬禽反轉(zhuǎn)錄病毒，引起禽造血組織中某些細(xì)胞成分的腫瘤性增生。而主要引起髓細(xì)胞性白血病的ALV-J是目前廣為流行的一個(gè)亞群，自1988年P(guān)ayne首次從肉雞中分離出此病毒后，該病現(xiàn)已呈世界性分布。我國(guó)于1999和2004年分別從肉雞和蛋雞中分離出該病毒，此后陸續(xù)有地方品種雞感染此病的報(bào)道。ALV-J自我國(guó)出現(xiàn)以來，其感染宿主范圍不斷擴(kuò)大，但其還沒有突破種間屏障而感染與雞親緣性關(guān)系更遠(yuǎn)的品種，如雉，鵪鶉等。本研究建立了3種選擇壓模型，體外實(shí)驗(yàn)通過選擇抑制物疊氮胸苷（AZT），在DF-1細(xì)胞上干擾ALV-J NX0101株的復(fù)制，對(duì)病毒連續(xù)傳代后觀察病毒在AZT作用下囊膜基因的突變情況。體外宿主細(xì)胞之間的依次過渡，觀察病毒在不同宿主細(xì)胞作用下囊膜基因突變情況。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過人工模擬自然感染ALV-J NX0101株，將ALV-J依次人工感染易感宿主禽（SPF雞，火雞），然后過渡到抗性宿主禽（鵪鶉，山雞，鴨），觀察宿主禽病理變化，分析感染后宿主禽排毒規(guī)律及分離株囊膜基因遺傳進(jìn)化規(guī)律，解析不同宿主禽的過渡后ALV-J NX0101株的跨種傳播機(jī)制。... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ALV病毒粒子結(jié)構(gòu)（出自禽病學(xué)，11版）

圖 2ALV-J 逐一接種動(dòng)物宿主圖示Fig. 2 Schematic diagram of the order of virus inoculation and isolation.2.10 體內(nèi)感染不同宿主品種禽后病毒血癥監(jiān)測(cè)ALV p27 抗原檢測(cè)（參照試劑盒說明）：1）1mL PBS 溶液稀釋泄殖腔棉拭子樣品，-80℃反復(fù)凍融 3 次。2）取出抗 p27 抗體包被板，記錄樣品的位置。3）在適當(dāng)?shù)膬煽字屑尤?100μL 陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。4）在剩余的孔中加入 100μL 被檢樣品。蓋好反應(yīng)板，在 18-26℃的條件下in（±5min）。5）用大約 350μL 的雙蒸水或去離子水洗滌板孔，重復(fù) 3-5 次，最后一次洗體拍干。7）毎孔加入 100μL 兔抗 p27，辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體。蓋好反應(yīng)板，在 1條件下孵育 60min（±5min）。

圖 3 目的基因與內(nèi)參基因反轉(zhuǎn)錄鑒定ig. 3 RT-PCR identification for NX0101 gene and GAPDH g的基因切鑒定基因 PCR 擴(kuò)增后，切取目的條帶連接入 P，基因測(cè)序目的基因與內(nèi)參基因的同源性目的片段(圖 4)。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：2986666