脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁成分,是TLR4和TLR2的共同配體,同時(shí)也是病原分子相關(guān)模式物（PAMP）的典型代表。作為一種內(nèi)毒素,它能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生與感染革蘭氏陰性菌相同的免疫應(yīng)激過程。本研究中采用耳緣靜脈注射一定量的LPS,模擬母兔自然狀態(tài)下感染革蘭氏陰性菌時(shí)的免疫應(yīng)激過程。旨在研究革蘭氏陰性菌感染對母兔下丘腦、卵巢和輸卵管中TLR4、TLR2以及其下游免疫細(xì)胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表達(dá)的影響。通過熒光定量PCR檢測TLR4、TLR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的轉(zhuǎn)錄水平,利用ELISA檢測IL-1β、 IL-6以及TNF-α的蛋白表達(dá)量。熒光定量PCR結(jié)果顯示：下丘腦、卵巢和輸卵管中均有TLR4、TLR2、IL-1β、 IL-6和TNF-α的轉(zhuǎn)錄,注射生理鹽水后TLR4各個(gè)時(shí)間點(diǎn)轉(zhuǎn)錄水平與0h相比差異不顯著（P>0.05）, TLR2在下丘腦中6h和輸卵管中3h顯著高于0h（P<0.05）,各個(gè)組織中1.5-12h,免疫細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄水平與Oh相比沒有顯著變化（P>0.05）；LPS誘導(dǎo)后,與0h相比TLR4轉(zhuǎn)錄水平僅在卵巢中顯著... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 TLR2與TLR4的概述
        1.1.1 TLR2與TLR4的發(fā)現(xiàn)及分子結(jié)構(gòu)
        1.1.2 TLR2與TLR4的相應(yīng)配體及識別特點(diǎn)
        1.1.3 TLR2與TLR4的信號傳導(dǎo)通路
        1.1.4 TLR2與TLR4的研究近況
        1.1.5 TLR2與TLR4與動物繁殖疾病
        1.1.6 TLRs的生物學(xué)意義及應(yīng)用展望
    1.2 免疫細(xì)胞因子概述
        1.2.1 免疫細(xì)胞因子研究進(jìn)展
        1.2.2 免疫細(xì)胞因子與雌性動物繁殖疾病
    1.3 本研究的目的和意義
2 材料方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動物
    2.2 試驗(yàn)材料
        2.2.1 試劑藥品
        2.2.2 主要溶液的配制
    2.3 主要儀器設(shè)備
    2.4 試驗(yàn)步驟
        2.4.1 總RNA的提取
        2.4.2 反轉(zhuǎn)錄過程
        2.4.3 實(shí)時(shí)定量PCR過程（以GAPDH為內(nèi)參）
        2.4.4 組織全蛋白的提取
        2.4.5 蛋白質(zhì)濃度測定
        2.4.6 IL-1β、IL-6和TNF-α的ELISA檢測
    2.5 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 總RNA的提取
    3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
    3.3 熒光定量PCR產(chǎn)物的特異性
    3.4 LPS對TLR4在輸卵管、卵巢和下丘腦中轉(zhuǎn)錄水平的影響
    3.5 LPS對TLR2在輸卵管、卵巢和下丘腦中轉(zhuǎn)錄水平的影響
    3.6 LPS對輸卵管、卵巢、下丘腦中IL-1β表達(dá)水平的影響
    3.7 LPS對輸卵管、卵巢、下丘腦中IL-6的表達(dá)水平的影響
    3.8 LPS對輸卵管、卵巢、下丘腦中TNF-α的表達(dá)水平的影響
4 討論
    4.1 LPS感染對下丘腦、卵巢以及輸卵管中TLR4、TLR2轉(zhuǎn)錄水平的影響
    4.2 LPS感染對下丘腦、卵巢以及輸卵管中IL-1β表達(dá)的影響
    4.3 LPS感染對下丘腦、卵巢以及輸卵管中IL-6表達(dá)的影響
    4.4 LPS感染對下丘腦、卵巢以及輸卵管中TNF-α表達(dá)的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠TNF-α和IL-1β表達(dá)影響[J]. 呂敬雷,王鵬,隋雪琴,高翔,趙仁亮.  齊魯醫(yī)學(xué)雜志. 2012(04)
[2]Expression and Immune Effect of Toll-Like Receptor 4 in Human Trophoblast Cells[J]. 鄧飛濤,韓芳,吳超英.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(03)
[3]Toll樣受體與臨床疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 嵇武,李寧.  中國誤診學(xué)雜志. 2007(16)
[4]幾種細(xì)胞因子在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病監(jiān)測中的應(yīng)用[J]. 李茜,金瑋.  中國初級衛(wèi)生保健. 2005(06)
[5]慢性盆腔炎輸卵管病理與IL-2 IL-6的關(guān)系[J]. 趙廣興,馬寶璋,袁家麟.  遼寧中醫(yī)雜志. 2003(09)



本文編號：2982520