捻轉(zhuǎn)血矛線蟲（Haemonchus contortus）是寄生于牛、羊等反芻動物真胃內(nèi)消化道寄生蟲,以血液為食,給畜牧業(yè)造成極大的經(jīng)濟損失�！皽笔窍x體抵抗外界環(huán)境壓力的有效措施,也是捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病呈“春季高潮”的主要原因。因此對滯育現(xiàn)象的研究對于該病的防控具有重要的指導(dǎo)意義。本研究根據(jù)Gibbz（1971）的方法獲得H. contortus ZJ株滯育蟲體；采用RACE、Genome walking技術(shù)獲得了滯育相關(guān)基因Hc-fau完成cDNA和全基因序列；在模式生物秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis elegans）中通過顯微注射、RNA干擾技術(shù)研究該基因在蟲體內(nèi)的對發(fā)育的調(diào)節(jié)作用；通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染在HEK293細胞系中研究該基因各功能域之間的關(guān)系及功能；運用SwissModel對Hc-FAU進行同源建模。研究成果將為進一步闡述H. contortus滯育機制奠定基礎(chǔ)。1.捻轉(zhuǎn)血矛線蟲ZJ株滯育蟲體的獲得及其形態(tài)特征本實驗參照Adams（1986）的方法,通過瘤胃灌注,將捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染性三期幼蟲攻入綿羊體內(nèi),對綿羊進行處理后,獲得捻轉(zhuǎn)血矛線蟲滯育蟲體。滯育蟲體發(fā)育程度一致... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 文獻綜述
    第一章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲及其危害
        1 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲概述
        2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病
        3 小結(jié)
    第二章 秀麗隱桿線蟲
        1 秀麗隱桿線蟲概述
        2 秀麗隱桿線蟲作為模式生物的優(yōu)勢
        3 秀麗隱桿線中的研究現(xiàn)狀
        4 秀麗隱桿線蟲作為模式生物在寄生性線蟲研究的應(yīng)用
            4.1 利用RNAi進行基因功能性分析
            4.2 利用秀麗隱桿線蟲進行寄生蟲基因功能的研究
            4.3 利用秀麗隱桿線蟲作為表達系統(tǒng)
        5 小結(jié)
    第三章 滯育現(xiàn)象
        1 寄生性線蟲滯育現(xiàn)象
        2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲滯育現(xiàn)象
        3 秀麗隱桿線蟲滯育機制研究
            3.1 感受性神經(jīng)元
            3.2 G蛋白配對受體（GPCRs）和G蛋白信號
            3.3 cGMP信號
            3.4 TGF-β信號
            3.5 IIS
        4 小結(jié)
第二部分 研究內(nèi)容
    第四章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲ZJ株滯育蟲體的獲得及其形態(tài)特征
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 H. contortus蟲株及感染性三期幼蟲（iL3）實驗室培養(yǎng)
            1.2 實驗動物
            1.3 攻蟲
            1.4 H. contortus滯育蟲體的采集
            1.5 H.contortus蟲體脫鞘
            1.6 溫度檢測
            1.7 全蟲DAPI染色
            1.8 蟲體觀察
        2 結(jié)果
            2.1 感染性三期幼蟲鑒定
            2.2 滯育蟲體的特征鑒定
            2.3 溫度變化
        3 討論
    第五章 Hc-fau基因的獲得及其時空特異性研究
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 實驗方法
        2 結(jié)果
            2.1 RACE結(jié)果
            2.2 Genome walking結(jié)果
            2.3 已加工假基因的獲得
            2.4 Hc-fau啟動子區(qū)轉(zhuǎn)錄活性分析
            2.5 Hc-fau基因時空特異性分析
        3 討論
    第六章 Hc-FAU在秀麗隱桿線蟲發(fā)育過程中的調(diào)節(jié)作用
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 過表達載體的構(gòu)建
            2.2 基因過表達蟲體表型檢測
            2.3 Ce-rps30基因沉默蟲體表型檢測
        3 討論
    第七章 Hc-FAU天然融合蛋白現(xiàn)象的初步研究
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 真核細胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的構(gòu)建
            2.2 Hc-faua、Hc-faub、Hc-faua-ubil、Hc-faub-ubil、Hc-fau-s30在HEK293細胞中的表達情況
            2.3 Hc-FAU同源建模
        3 討論
結(jié)論
創(chuàng)新點
展望
附錄Ⅰ 溶液配制
附錄Ⅱ 實驗過程中涉及的主要引物序列
參考文獻
攻讀博士學(xué)位期間的主要成果
致謝


【參考文獻】：
博士論文
[1]捻轉(zhuǎn)血矛線蟲滯育相關(guān)基因daf-22和hsp70全基因的獲得及其功能的研究[D]. 張紅麗.浙江大學(xué) 2012
[2]利用秀麗隱桿線蟲表達捻轉(zhuǎn)血矛線蟲H11蛋白的轉(zhuǎn)基因研究[D]. 周前進.浙江大學(xué) 2010



本文編號：2979915