新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）強毒株引起的一種具有高度傳染性的烈性傳染病,被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為需報告疾病之一。NDV屬于副黏病毒科（Paramyxoviridae）,副黏病毒亞科（Paramyxovirinae）,禽腮腺炎病毒屬（Avuluvirus）的成員,是單股、負鏈、不分節(jié)段、有囊膜的RNA病毒。本研究對實驗室前期構(gòu)建的La Sota C5反向遺傳平臺進行了改造和優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)改造后的感染性克隆GLaSotaC5與LaSota序列完全一致;且其拯救效率有明顯提高。在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了 JS10 M/F/HN三個基因替換的重組病毒GLaSotaC5M/F/HN,并比較了其免疫原性。1.新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的改造與優(yōu)化參照La Sota C5株的全基因序列,將基因組分成4段,經(jīng)RT-PCR從La Sota C5株感染的尿囊液中擴增目的片段,分別連入克隆載體中;然后順次克隆到pMD-20T載體中,構(gòu)建含有La Sota C5基因組大部分片段的中間質(zhì)粒T-ABCD。該質(zhì)粒... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１?ＴＶＴ－ＧＬａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５構(gòu)建模式圖??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ＴＶＴ－Ｌａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??

戴建華新域疫病毒Ｌａ?ＳｏｔａＣ５株反向遺傳操作平臺的優(yōu)化及其應(yīng)用們發(fā)現(xiàn)拯救毒株的ＭＤＴ值大于１２０ｈ？比親本毒株ＬａＳｏｔａＣ５毒株ＬａＳｏｔａ?Ｃ５和拯救毒株攻毒實驗組的１０只雞均不死亡，和０．１８。表明拯救毒株與其親本毒株的致病性相似。為了比較在ＤＦ１細胞上對親本毒株和拯救病毒進行了的生長曲線的實時間節(jié)點的ＴＣＩＤ５Ｇ相似，這表明拯救毒株的復(fù)制動力和效率與

ｃ?ＤＦ－１?ｃｅｌｌ?ｃｒｏｓｓ－ｎｅｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｔｅｓｔ??２．４交叉保護結(jié)果??免疫后３５ｄ（攻毒前），免疫組均產(chǎn)生了顯著水平的ＨＩ抗體，見圖４－１。兩組血清以Ｌａ??Ｓｏｔａ為抗原測得的抗體效價稍高于Ｇ?Ｌａ?Ｓｏｔａ?Ｍ／Ｆ／ＨＮ為抗原所測效價；Ｌａ?Ｓｏｔａ組和Ｇ?Ｌａ??Ｓｏｔａ?Ｍ／Ｆ／ＨＮ組都在免疫后２１天ＨＩ水平達到最高峰之后兩者抗體水平都緩慢下降。??８廠?????ＧＬａＭＦＨ？＾??ｌ．ａＳｃｔ?ａ??７?？?＾??Ｚ??０??約????０?３?７?１０?１４?２１?２８?３５??Ｄａｙｓ?ｐｏｓｔ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??圖４－１免疫后ＨＩ抗體的動態(tài)曲線??Ｆｉｇ．４－１?Ｍｅａｎ?ＨＩ?（?Ｌｏｇ２）?ｒｅｓｐｏｎｓｅ?ａｆｔｅｒ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??免疫３５天后，選用ＮＤＶ基因ＶＩＩ型代表ＺＪｌ株，ＩＸ型強毒Ｆ４８和Ｃｌａｓｓ?Ｉ強毒９ａ５ｂ??對各組雞進行攻毒，攻毒后Ｌａ?Ｓｏｔａ及ＧＬａ?Ｓｏｔａ?Ｃ５Ｍ／Ｆ／ＨＮ免疫組１０天內(nèi)均未發(fā)病，而??ＰＢＳ攻毒對照組雞則在攻毒后７ｄ內(nèi)全部死亡（見表４－５

【參考文獻】：
期刊論文
[1]家禽腸道黏膜屏障結(jié)構(gòu)及功能研究進展[J]. 馮焱,張芬鵲,李建慧.  中國家禽. 2016(04)
[2]腸道黏膜免疫的研究[J]. 陳建輝,李慧峰,雷照亮,李清宏.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2016(01)
[3]黏膜免疫系統(tǒng)研究進展[J]. 張欣悅,高永翔,謝怡敏.  中藥與臨床. 2015(05)
[4]野生水禽源ClassⅠ新城疫病毒對SPF雞的致病性研究[J]. 楊少華,許傳田,黃艷艷,張琳,黃慶華,胡北俠,朱曼玲,張秀美.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2015(09)
[5]黏膜免疫系統(tǒng)及黏膜免疫研究進展[J]. 王悅蕓,劉琪,安欣宇,周如月,馮曉聲,賈愛卿,王貴平.  畜牧與獸醫(yī). 2015(07)
[6]禽類黏膜免疫系統(tǒng)的研究[J]. 劉紅.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2014(23)
[7]家禽疫苗誘導(dǎo)的粘膜免疫應(yīng)答[J]. 劉開春,孟春春,仇旭升,孫英杰,譚磊,宋翠萍,彭大新,丁鏟.  中國動物傳染病學(xué)報. 2014(06)
[8]動物腸道黏膜免疫系統(tǒng)研究進展[J]. 祁珊珊,鄭紅星.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2014(13)
[9]新城疫病毒La Sota C5株感染性克隆的構(gòu)建及病毒拯救[J]. 汪軍卿,張向樂,孟春春,仇旭升,孫英杰,譚磊,宋翠萍,丁鏟.  中國動物傳染病學(xué)報. 2013(06)
[10]家禽黏膜免疫系統(tǒng)與疫苗免疫[J]. 張蕊,高雪麗,鄭世民.  中國家禽. 2012(16)

碩士論文
[1]新城疫La Sota C5株反向遺傳平臺建立及雞IFN-β單克隆抗體制備[D]. 張向樂.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013



本文編號：2979578