酪酪肽卵黃抗體的制備及其對小鼠的營養(yǎng)生理效應(yīng)研究
發(fā)布時間:2021-01-14 20:16
本試驗通過考察抗原劑量和間隔期兩個因素對酪酪肽卵黃抗體制備效果的影響,旨在建立一套制備酪酪肽卵黃抗體的完整方法,在此基礎(chǔ)上,對酪酪肽卵黃抗體粉的營養(yǎng)生理效應(yīng)進行了初步考察。本研究主要由3個試驗組成:試驗一酪酪肽完全抗原的制備本試驗旨在考察戊二醛法制備酪酪肽完全抗原的可行性。試驗通過將酪酪肽和牛血清白蛋白偶聯(lián)形成酪酪肽完全抗原,再經(jīng)電泳檢測抗原偶聯(lián)情況。結(jié)果表明:利用戊二醛法成功制備酪酪肽完全抗原。利用戊二醛法制成的酪酪肽完全抗原可以用于下一步酪酪肽卵黃抗體的制備。試驗二PYY卵黃抗體的制備及抗體活性檢測本試驗旨在建立一套制備酪酪肽卵黃抗體的完整方法。試驗在初免相同處理基礎(chǔ)上,加免采取兩因素交差試驗設(shè)計,選擇免疫抗原劑量(A)和免疫間隔(B)兩個因素,每個因素分別設(shè)置3個水平(A:100μ,g/只、200μg/只、400μg/只;B:7d、11d、15d),構(gòu)成9個組合,加上1個空白對照組,總計10個處理,每個處理5個重復,每個重復1羽。選擇體重相近、健康的300日齡矮腳黃蛋雞50羽,隨機分入10個處理中。試驗免疫程序如下:(1)預飼一周后進行初次免疫;所有免疫組抗原劑量均為200μg/...
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
1 引言
2 PYY主要生物學特性和生理學功能
2.1 PYY及其受體
2.1.1 PYY的結(jié)構(gòu)
2.1.2 PYY的分泌與分布
2.1.3 PYY的受體
2.2 PYY生理學功能
2.2.1 PYY對攝食的調(diào)節(jié)
2.2.2 PYY對消化系統(tǒng)功能的影響
2.2.3 PYY對物質(zhì)代謝的影響
2.2.4 PYY的其他功能
3 免疫調(diào)控技術(shù)在畜禽采食量中的應(yīng)用
3.1 免疫調(diào)控技術(shù)概述
3.2 主動免疫技術(shù)
3.2.1 人工重組抗原
3.2.2 基因工程疫苗
3.3 被動免疫技術(shù)
3.3.1 血清抗體
3.3.2 卵黃抗體
4 卵黃抗體制備影響因素及應(yīng)用前景
4.1 卵黃抗體制備
4.2 卵黃抗體制備影響因素
4.2.1 禽本身因素對卵黃抗體制備的影響
4.2.2 免疫方案對卵黃抗體制備的影響
4.2.2.1 佐劑
4.2.2.2 注射途徑
4.2.2.3 免疫劑量
4.2.2.4 免疫次數(shù)和間隔期
4.3 卵黃抗體應(yīng)用前景
5 研究目的意義
6 試驗流程
第二章 試驗研究
試驗一 PYY-BSA完全抗原的制備
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 主要試劑
1.1.2 主要儀器
1.2 試驗方法
1.2.1 PYY-BSA完全抗原的制備
1.2.2 PYY與BSA交聯(lián)復合物的鑒定
1.2.2.1 電泳儲存液配制
1.2.2.2 樣品處理與加樣
1.2.2.3 電泳
1.2.2.4 染色與脫色
1.2.3 油乳疫苗制備
1.2.4 包被抗原的制備
2 結(jié)果與分析
3 討論
4 結(jié)論
試驗二 PYY卵黃抗體的制備及抗體活性檢測
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 試驗動物
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要儀器
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗動物分組及飼養(yǎng)管理
1.2.2 免疫程序
1.2.3 樣品采集
1.2.4 PYY卵黃抗體活性檢測
1.2.5 PYY混合卵黃抗體粉的制備及效價檢測
1.2.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 蛋雞免疫后卵黃中PYY抗體的產(chǎn)生規(guī)律
2.2 PYY混合卵黃粉抗體的效價
3 討論
3.1 蛋雞免疫后卵黃中PYY抗體的產(chǎn)生規(guī)律
3.2 PYY混合卵黃粉抗體的效價
4 結(jié)論
試驗三日糧中添加PYY卵黃抗體對小鼠的營養(yǎng)生理效應(yīng)研究
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 PYY卵黃抗體粉
1.1.2 試驗動物
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗設(shè)計
1.2.2 試驗日糧
1.2.3 飼養(yǎng)管理
1.2.4 血樣采集
1.2.5 考察指標
1.2.5.1 生長性能
1.2.5.2 代謝相關(guān)產(chǎn)物水平測定
1.2.5.3 血液內(nèi)分泌激素水平測定
1.2.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 不同處理對小鼠生長性能的影響
2.1.1 不同處理對小鼠平均日采食量的影響
2.1.2 不同處理對小鼠平均日增重的影響
2.2 不同處理對小鼠代謝相關(guān)產(chǎn)物的影響
2.2.1 不同處理對小鼠血清尿素氮濃度的影響
2.2.2 不同處理對小鼠血糖濃度的影響
2.2.3 不同處理對小鼠血脂濃度的影響
2.3 對小鼠血液內(nèi)分泌激素水平的影響
2.3.1 注射LPS對小鼠血清IL-6水平的影響
2.3.2 不同處理對小鼠血清PYY和NPY水平的影響
2.3.3 不同處理對小鼠血清瘦素和胰島素水平的影響
3 討論
3.1 不同處理對小鼠生長性能的影響
3.2 不同處理對小鼠代謝相關(guān)產(chǎn)物的影響
3.3 不同處理對小鼠血液內(nèi)分泌激素水平的影響
3.3.1 注射LPS對小鼠血液IL-6的影響
3.3.2 不同處理對小鼠血清PYY和NPY水平的影響
3.3.3 不同處理對小鼠血清瘦素和胰島素水平的影響
4 結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介
附錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]牛乳鐵蛋白卵黃抗體的制備及純化方法的建立[J]. 江青東,王慧杰. 家畜生態(tài)學報. 2011(06)
[2]雞抗CHO細胞蛋白的IgY消長規(guī)律及其制備的試驗研究[J]. 杜洪橋,朱蓉,徐葛林,嚴家新. 微生物學免疫學進展. 2011(03)
[3]仔豬斷奶后常出現(xiàn)的問題、原因分析及解決辦法[J]. 張利. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2011(07)
[4]α-酮戊二酸對脂多糖應(yīng)激仔豬血漿胰島素、氨基酸含量及腓腸肌mTOR信號傳導途徑的影響[J]. 王蕾,侯永清,丁斌鷹,劉堅,李永塘,吳信,劉玉蘭,朱惠玲. 動物營養(yǎng)學報. 2010(06)
[5]酪酪肽生理功能及其在哺乳母豬養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景[J]. 歐榮娣,陳永輝,沈維軍,宋洪國,楊丹丹,周定剛,范志勇. 動物營養(yǎng)學報. 2010(05)
[6]N-乙酰半胱氨酸對脂多糖應(yīng)激仔豬生長性能及血漿生化指標的影響[J]. 胡堯,張麗麗,侯永清,丁斌鷹,朱惠玲,劉玉蘭,楊震國,張偉. 動物營養(yǎng)學報. 2010(04)
[7]脯氨酸對脂多糖多次刺激的仔豬生長性能及血液生化指標的影響[J]. 張麗麗,胡堯,侯永清,丁斌鷹,王蕾,劉玉蘭,朱惠玲. 飼料工業(yè). 2010(13)
[8]α-酮戊二酸對脂多糖應(yīng)激斷奶仔豬生長抑制的緩解作用[J]. 劉堅,侯永清,丁斌鷹,劉玉蘭,朱惠玲,王蕾,李永塘. 動物營養(yǎng)學報. 2009(04)
[9]血紅素氧合酶-1在感染性休克大鼠腎功能損傷中的作用[J]. 余劍波,姚尚龍,宮麗榮,陳慧榮,王曼,周芬,高寶來. 中華麻醉學雜志. 2009 (05)
[10]不同應(yīng)激誘導對HELA細胞產(chǎn)生IL-6及l(fā)eptin水平的影響[J]. 鉏振偉,楊濤,王錄煥,郝秀華,顏光濤. 放射免疫學雜志. 2009(01)
博士論文
[1]應(yīng)激影響肉仔雞脂肪沉積的分子生物學機制[D]. 蔡元麗.山東農(nóng)業(yè)大學 2009
[2]脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體對豬脂肪沉積的調(diào)控及相關(guān)機理研究[D]. 姜錦鵬.南京農(nóng)業(yè)大學 2006
[3]膽囊收縮素主動免疫對豬的營養(yǎng)生理效應(yīng)及其機制的研究[D]. 袁中彪.四川農(nóng)業(yè)大學 2004
[4]生長抑素主動免疫對生長湖羊生長及生長激素基因表達影響的研究[D]. 高民.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2002
碩士論文
[1]糖皮質(zhì)激素調(diào)控家禽采食的機制[D]. 孔雪.山東農(nóng)業(yè)大學 2010
[2]酪酪肽完全抗原的制備及酪酪肽被動免疫對大鼠營養(yǎng)生理效應(yīng)的影響[D]. 梁哲.四川農(nóng)業(yè)大學 2010
[3]功能性卵黃粉的制備及其對仔豬生長性能的影響[D]. 謝燕燕.福建農(nóng)林大學 2010
[4]抗仔豬大腸桿菌病高免卵黃抗體粉的研制[D]. 劉海生.西北農(nóng)林科技大學 2009
[5]槐定堿對內(nèi)毒素腎損傷小鼠的治療作用及對LPS識別受體與NF-κB通路的影響[D]. 謝建寧.寧夏醫(yī)科大學 2009
[6]免疫應(yīng)激對肉仔雞血液指標及肉品質(zhì)的影響[D]. 董曉玲.中國農(nóng)業(yè)科學院 2007
[7]膽囊收縮素卵黃抗體粉在肉雞飼糧中適宜添加量的研究[D]. 臧海軍.四川農(nóng)業(yè)大學 2007
[8]防制仔豬大腸桿菌性腹瀉四價菌毛蛋白卵黃粉的研制[D]. 韓翰.揚州大學 2007
[9]褪黑激素主動免疫對生長豬生產(chǎn)性能和胴體品質(zhì)的影響[D]. 唐春祥.四川農(nóng)業(yè)大學 2005
[10]利用抗食欲抑制因子卵黃抗體提高母豬泌乳期采食量的研究[D]. 姚康.華中農(nóng)業(yè)大學 2005
本文編號:2977474
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
1 引言
2 PYY主要生物學特性和生理學功能
2.1 PYY及其受體
2.1.1 PYY的結(jié)構(gòu)
2.1.2 PYY的分泌與分布
2.1.3 PYY的受體
2.2 PYY生理學功能
2.2.1 PYY對攝食的調(diào)節(jié)
2.2.2 PYY對消化系統(tǒng)功能的影響
2.2.3 PYY對物質(zhì)代謝的影響
2.2.4 PYY的其他功能
3 免疫調(diào)控技術(shù)在畜禽采食量中的應(yīng)用
3.1 免疫調(diào)控技術(shù)概述
3.2 主動免疫技術(shù)
3.2.1 人工重組抗原
3.2.2 基因工程疫苗
3.3 被動免疫技術(shù)
3.3.1 血清抗體
3.3.2 卵黃抗體
4 卵黃抗體制備影響因素及應(yīng)用前景
4.1 卵黃抗體制備
4.2 卵黃抗體制備影響因素
4.2.1 禽本身因素對卵黃抗體制備的影響
4.2.2 免疫方案對卵黃抗體制備的影響
4.2.2.1 佐劑
4.2.2.2 注射途徑
4.2.2.3 免疫劑量
4.2.2.4 免疫次數(shù)和間隔期
4.3 卵黃抗體應(yīng)用前景
5 研究目的意義
6 試驗流程
第二章 試驗研究
試驗一 PYY-BSA完全抗原的制備
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 主要試劑
1.1.2 主要儀器
1.2 試驗方法
1.2.1 PYY-BSA完全抗原的制備
1.2.2 PYY與BSA交聯(lián)復合物的鑒定
1.2.2.1 電泳儲存液配制
1.2.2.2 樣品處理與加樣
1.2.2.3 電泳
1.2.2.4 染色與脫色
1.2.3 油乳疫苗制備
1.2.4 包被抗原的制備
2 結(jié)果與分析
3 討論
4 結(jié)論
試驗二 PYY卵黃抗體的制備及抗體活性檢測
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 試驗動物
1.1.2 主要試劑
1.1.3 主要儀器
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗動物分組及飼養(yǎng)管理
1.2.2 免疫程序
1.2.3 樣品采集
1.2.4 PYY卵黃抗體活性檢測
1.2.5 PYY混合卵黃抗體粉的制備及效價檢測
1.2.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 蛋雞免疫后卵黃中PYY抗體的產(chǎn)生規(guī)律
2.2 PYY混合卵黃粉抗體的效價
3 討論
3.1 蛋雞免疫后卵黃中PYY抗體的產(chǎn)生規(guī)律
3.2 PYY混合卵黃粉抗體的效價
4 結(jié)論
試驗三日糧中添加PYY卵黃抗體對小鼠的營養(yǎng)生理效應(yīng)研究
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 PYY卵黃抗體粉
1.1.2 試驗動物
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗設(shè)計
1.2.2 試驗日糧
1.2.3 飼養(yǎng)管理
1.2.4 血樣采集
1.2.5 考察指標
1.2.5.1 生長性能
1.2.5.2 代謝相關(guān)產(chǎn)物水平測定
1.2.5.3 血液內(nèi)分泌激素水平測定
1.2.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 不同處理對小鼠生長性能的影響
2.1.1 不同處理對小鼠平均日采食量的影響
2.1.2 不同處理對小鼠平均日增重的影響
2.2 不同處理對小鼠代謝相關(guān)產(chǎn)物的影響
2.2.1 不同處理對小鼠血清尿素氮濃度的影響
2.2.2 不同處理對小鼠血糖濃度的影響
2.2.3 不同處理對小鼠血脂濃度的影響
2.3 對小鼠血液內(nèi)分泌激素水平的影響
2.3.1 注射LPS對小鼠血清IL-6水平的影響
2.3.2 不同處理對小鼠血清PYY和NPY水平的影響
2.3.3 不同處理對小鼠血清瘦素和胰島素水平的影響
3 討論
3.1 不同處理對小鼠生長性能的影響
3.2 不同處理對小鼠代謝相關(guān)產(chǎn)物的影響
3.3 不同處理對小鼠血液內(nèi)分泌激素水平的影響
3.3.1 注射LPS對小鼠血液IL-6的影響
3.3.2 不同處理對小鼠血清PYY和NPY水平的影響
3.3.3 不同處理對小鼠血清瘦素和胰島素水平的影響
4 結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介
附錄
【參考文獻】:
期刊論文
[1]牛乳鐵蛋白卵黃抗體的制備及純化方法的建立[J]. 江青東,王慧杰. 家畜生態(tài)學報. 2011(06)
[2]雞抗CHO細胞蛋白的IgY消長規(guī)律及其制備的試驗研究[J]. 杜洪橋,朱蓉,徐葛林,嚴家新. 微生物學免疫學進展. 2011(03)
[3]仔豬斷奶后常出現(xiàn)的問題、原因分析及解決辦法[J]. 張利. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2011(07)
[4]α-酮戊二酸對脂多糖應(yīng)激仔豬血漿胰島素、氨基酸含量及腓腸肌mTOR信號傳導途徑的影響[J]. 王蕾,侯永清,丁斌鷹,劉堅,李永塘,吳信,劉玉蘭,朱惠玲. 動物營養(yǎng)學報. 2010(06)
[5]酪酪肽生理功能及其在哺乳母豬養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景[J]. 歐榮娣,陳永輝,沈維軍,宋洪國,楊丹丹,周定剛,范志勇. 動物營養(yǎng)學報. 2010(05)
[6]N-乙酰半胱氨酸對脂多糖應(yīng)激仔豬生長性能及血漿生化指標的影響[J]. 胡堯,張麗麗,侯永清,丁斌鷹,朱惠玲,劉玉蘭,楊震國,張偉. 動物營養(yǎng)學報. 2010(04)
[7]脯氨酸對脂多糖多次刺激的仔豬生長性能及血液生化指標的影響[J]. 張麗麗,胡堯,侯永清,丁斌鷹,王蕾,劉玉蘭,朱惠玲. 飼料工業(yè). 2010(13)
[8]α-酮戊二酸對脂多糖應(yīng)激斷奶仔豬生長抑制的緩解作用[J]. 劉堅,侯永清,丁斌鷹,劉玉蘭,朱惠玲,王蕾,李永塘. 動物營養(yǎng)學報. 2009(04)
[9]血紅素氧合酶-1在感染性休克大鼠腎功能損傷中的作用[J]. 余劍波,姚尚龍,宮麗榮,陳慧榮,王曼,周芬,高寶來. 中華麻醉學雜志. 2009 (05)
[10]不同應(yīng)激誘導對HELA細胞產(chǎn)生IL-6及l(fā)eptin水平的影響[J]. 鉏振偉,楊濤,王錄煥,郝秀華,顏光濤. 放射免疫學雜志. 2009(01)
博士論文
[1]應(yīng)激影響肉仔雞脂肪沉積的分子生物學機制[D]. 蔡元麗.山東農(nóng)業(yè)大學 2009
[2]脂肪組織細胞膜蛋白卵黃抗體對豬脂肪沉積的調(diào)控及相關(guān)機理研究[D]. 姜錦鵬.南京農(nóng)業(yè)大學 2006
[3]膽囊收縮素主動免疫對豬的營養(yǎng)生理效應(yīng)及其機制的研究[D]. 袁中彪.四川農(nóng)業(yè)大學 2004
[4]生長抑素主動免疫對生長湖羊生長及生長激素基因表達影響的研究[D]. 高民.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2002
碩士論文
[1]糖皮質(zhì)激素調(diào)控家禽采食的機制[D]. 孔雪.山東農(nóng)業(yè)大學 2010
[2]酪酪肽完全抗原的制備及酪酪肽被動免疫對大鼠營養(yǎng)生理效應(yīng)的影響[D]. 梁哲.四川農(nóng)業(yè)大學 2010
[3]功能性卵黃粉的制備及其對仔豬生長性能的影響[D]. 謝燕燕.福建農(nóng)林大學 2010
[4]抗仔豬大腸桿菌病高免卵黃抗體粉的研制[D]. 劉海生.西北農(nóng)林科技大學 2009
[5]槐定堿對內(nèi)毒素腎損傷小鼠的治療作用及對LPS識別受體與NF-κB通路的影響[D]. 謝建寧.寧夏醫(yī)科大學 2009
[6]免疫應(yīng)激對肉仔雞血液指標及肉品質(zhì)的影響[D]. 董曉玲.中國農(nóng)業(yè)科學院 2007
[7]膽囊收縮素卵黃抗體粉在肉雞飼糧中適宜添加量的研究[D]. 臧海軍.四川農(nóng)業(yè)大學 2007
[8]防制仔豬大腸桿菌性腹瀉四價菌毛蛋白卵黃粉的研制[D]. 韓翰.揚州大學 2007
[9]褪黑激素主動免疫對生長豬生產(chǎn)性能和胴體品質(zhì)的影響[D]. 唐春祥.四川農(nóng)業(yè)大學 2005
[10]利用抗食欲抑制因子卵黃抗體提高母豬泌乳期采食量的研究[D]. 姚康.華中農(nóng)業(yè)大學 2005
本文編號:2977474
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