血吸蟲病是由血吸蟲感染引起的一種對社會、經(jīng)濟(jì)發(fā)展危害嚴(yán)重的人畜共患寄生蟲病。雌蟲產(chǎn)生的蟲卵是血吸蟲病導(dǎo)致病理損傷的主要因素,同時也是該疾病傳播的根本原因。因此,研究血吸蟲生殖發(fā)育相關(guān)的基因功能,從控制血吸蟲生殖發(fā)育來控制血吸蟲病的發(fā)生具有重要意義。本研究克隆和表達(dá)了日本血吸蟲胚胎致死異常視覺基因1（SjELAV-like 1）,并分析了該基因在日本血吸蟲體內(nèi)的表達(dá)情況及定位,探究該基因?qū)θ毡狙x形態(tài)和生殖發(fā)育的影響。利用PCR技術(shù)獲得SjELAV-like 1基因序列（Gene Bank登錄號:MG515727）,獲得的SjELAV-like 1基因序列長1797bp,其中編碼序列為1533 bp,編碼510個氨基酸。通過構(gòu)建該序列的重組表達(dá)質(zhì)粒pET28-SjELAV-like 1,并在大腸桿菌BL21中利用IPTG誘導(dǎo)表達(dá),收集誘導(dǎo)0h,1h,2h,3h,4h,6h,8h的菌體,SDS-PAGE法進(jìn)行蛋白電泳發(fā)現(xiàn),重組蛋白主要存在于包涵體中,且在誘導(dǎo)4h時表達(dá)量最高。利用His鎳柱親和層析法純化大量表達(dá)所得重組蛋白,用純化重組蛋白免疫小鼠制備多克隆抗體,Western blott... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ELAV蛋白保守結(jié)構(gòu)域

圖 2ASjELAV-like 1 基因的已知核酸序列Fig. 2 A The known nucleotide sequence of SjELAV-like 1.圖 2 BSjELAV-like 1 基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹

圖 2ASjELAV-like 1 基因的已知核酸序列Fig. 2 A The known nucleotide sequence of SjELAV-like 1.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2977061