單核細(xì)胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenges, Lm）簡稱單增李斯特菌,是人畜共患病李斯特菌病（listeriosis）的病原菌,是食源性致病菌,易感染免疫力低下者,導(dǎo)致胃腸炎、腦膜炎、敗血病和流產(chǎn)等。Lm是兼性胞內(nèi)菌,可作為研究細(xì)胞內(nèi)感染和細(xì)胞免疫的模式細(xì)菌,還可作為研制抗胞內(nèi)感染和腫瘤的疫苗的載體菌株。本研究對來源于食品的兩株Lm分離株LM605和LM201進(jìn)行了毒力的體內(nèi)外測定、基因組測序和針對毒力基因的比較基因組學(xué)分析,擬為以LM605或LM201為出發(fā)菌株進(jìn)行Lm的致病機(jī)理的探索和減毒活疫苗載體的研制打基礎(chǔ)。1.LM605和LM201的體外毒力測定溶血實驗表明,兩分離株均可形成較小的β溶血環(huán)。細(xì)胞粘附侵襲實驗表明,兩分離株對RAW264.7細(xì)胞的粘附侵襲能力顯著強(qiáng)于對照菌株L. innocua LI56（P<0.01）,LM201的粘附侵襲能力略高于LM605（P>0.05）。生物被膜（biofilm）形成能力測定結(jié)果表明,37℃培養(yǎng)24h,兩分離株均具有中等生物被膜形成能力（20Dc<OD<40Dc）。2.LM605和LM2... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 單增李斯特菌簡介
        1.1.1 生物學(xué)特性
        1.1.2 血清分型
        1.1.3 致病機(jī)制
        1.1.4 毒力因子
    1.2 微生物基因組學(xué)研究概述
    1.3 微生物比較基因組學(xué)研究概述
    1.4 單增李斯特菌基因組學(xué)研究進(jìn)展
2 研究目的和意義
3 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌種
        3.1.2 實驗動物和細(xì)胞株
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要器材
        3.1.5 主要溶液配制
        3.1.6 生物信息學(xué)分析軟件
    3.2 方法
        3.2.1 LM605和LM201的體外毒力測定
        3.2.2 LM605和LM201的體內(nèi)毒力測定
        3.2.3 LM605和LM201的基因組測序、拼接和注釋
        3.2.4 利用基因組序列進(jìn)行血清分型
        3.2.5 主要毒力基因的序列分析
        3.2.6 進(jìn)化分析
        3.2.7 利用基因組序列進(jìn)行致病相關(guān)基因的推測
4 結(jié)果與分析
    4.1 LM605和LM201的體外毒力測定結(jié)果
        4.1.1 菌落形態(tài)和革蘭氏染色特性
        4.1.2 溶血性測定結(jié)果
        4.1.3 生化鑒定結(jié)果
        4.1.4 生物被膜形成能力的比較結(jié)果
        4.1.5 LM605和LM201對細(xì)胞的粘附侵襲能力測定結(jié)果
    4.2 LM605和LM201的體內(nèi)毒力測定結(jié)果
50)的測定結(jié)果">        4.2.1 小鼠半數(shù)致死量(LD₅₀)的測定結(jié)果
        4.2.2 臨床癥狀
        4.2.3 病理解剖學(xué)變化
        4.2.4 病理組織學(xué)變化
    4.3 LM605和LM201的基因組測序結(jié)果與分析
        4.3.1 基因組DNA的提取檢測結(jié)果
        4.3.2 基因組測序、拼接和注釋結(jié)果
    4.4 LM605和LM201的比較基因組學(xué)分析
        4.4.1 利用基因組序列進(jìn)行血清分型的結(jié)果
        4.4.2 16S rRNA系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建與分析
        4.4.3 主要毒力基因的序列分析
        4.4.4 主要毒力基因編碼的氨基酸序列的分子進(jìn)化樹構(gòu)建與分析
        4.4.5 利用基因組序列進(jìn)行致病相關(guān)基因推測的結(jié)果
5 討論
    5.1 單增李斯特菌體內(nèi)毒力測定分析
    5.2 生物被膜（bacteria biofilm）形成能力的分析
    5.3 基因組測序
    5.4 血清分型
    5.5 進(jìn)化分析
    5.6 毒力基因的推測
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號：2975679