禽腺病毒血清4型（Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4）是家禽心包積液-肝炎綜合癥（Hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS）的主要病原體。自2014年以來,我國廣東、河南、湖南、湖北、云南等地區(qū)的家禽暴發(fā)該疾病,給養(yǎng)殖業(yè)帶來不同程度的損失。該病主要感染3-5周齡雞、5-10周齡品種鴨和鵝,感染的初期沒有明顯癥狀,一周后開始出現(xiàn)精神沉郁,腿軟無力,拉白色或淡綠色稀糞等癥狀,解剖有明顯的淺黃色透明的心包積液和肝臟腫大以及出血的現(xiàn)象。本試驗建立了套式PCR檢測FAdV-4方法,對疑似病例進(jìn)行檢測,從確診病例中分離病毒,利用分離濃縮的病毒尿囊液制備油乳劑滅活疫苗,進(jìn)一步制備卵黃抗體。試驗主要內(nèi)容及結(jié)果如下:1 FAdV-4套式PCR檢測方法的建立與應(yīng)用為了對疑似感染FAdV-4的病例進(jìn)行敏感、快速檢測,本試驗參考GenBank上發(fā)表的FAdV-4六鄰體（Hexon）基因片段序列設(shè)計了2對特異性檢測引物,先對反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,之后建立了套式PCR檢測FAdV-4的實(shí)驗室檢測方法。應(yīng)用該方法對FAdV-4標(biāo)準(zhǔn)毒株進(jìn)行檢測,兩步P... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

FAdV-4套式PCR擴(kuò)增條件優(yōu)化

西南大學(xué)獸醫(yī)碩士學(xué)位論文24圖2FAdV-4套式PCR敏感性試驗Fig.2SensitivitytestofFAdV-4nestedPCRa:引物F1/R1PCR擴(kuò)增結(jié)果;b:引物F2/R2PCR擴(kuò)增結(jié)果;c:套式PCR擴(kuò)增結(jié)果M:DL2000DNAMarker；1-10：10-1~10-10稀釋；11-20：10-1~10-10稀釋；21-30：10-1~10-10稀釋a:PCRamplificationofprimerF1/R1;b:PCRamplificationofprimerF2/R2;c:ResultsofnestPCRM:DL2000DNAMarker;1-10:Dilutionof10-1~10-10;11-20:Dilutionof10-1~10-10;21-30:Dilutionof10-1~10-103.3.3FAdV-4套式PCR特異性試驗用FAdV-4套式PCR條件擴(kuò)增FAdV-4、GPV、MDPV、AIV、DHAV，僅有FAdV-4顯示有目的條帶，其他病毒的核酸在該條件下均不可擴(kuò)增出目的條帶結(jié)果見圖3。

FAdV-4套式PCR特異性試驗

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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[4]血清4型禽腺病毒的分離、致病性及其抗體間接免疫熒光方法的初步建立[D]. 梁廣成.揚(yáng)州大學(xué) 2017
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