抗生素的發(fā)現(xiàn)可以說是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)最偉大的成就,它增加了人類的平均壽命。但是濫用和不規(guī)范使用抗生素已導(dǎo)致了微生物的耐藥性。替加環(huán)素是新一代四環(huán)素類衍生物,具有超廣譜的優(yōu)點(diǎn),并能克服傳統(tǒng)四環(huán)素類藥物的耐藥機(jī)制,但近年來細(xì)菌對替加環(huán)素產(chǎn)生耐藥性的報(bào)道越來越多,包括ICU常見的鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌等。大腸埃希菌作為6大致死性微生物之一,已經(jīng)對多種類的抗生素產(chǎn)生耐藥,這引起科學(xué)家們的重視。替加環(huán)素雖未應(yīng)用于獸醫(yī)臨床,但對來源于畜禽的大腸埃希菌替加環(huán)素耐藥情況及其耐藥機(jī)制進(jìn)行研究,對了解替加環(huán)素與其他抗菌藥之間的交叉耐藥性,防范重大的人畜共患疾病和指導(dǎo)抗菌藥物的臨床應(yīng)用具有重要意義。本課題以在重慶部分區(qū)縣豬場采集的174株豬源大腸埃希菌為供試菌,研究了其對四環(huán)素類藥物替加環(huán)素、多西環(huán)素和土霉素;氨基糖胺類藥物慶大霉素;酰胺醇類藥物氟苯尼考;喹諾酮類藥物恩諾沙星;多肽類藥物多粘菌素;碳青霉烯類藥物亞胺培南、頭孢類藥物頭孢喹肟等9種藥物的耐藥水平、多重耐藥狀況及耐藥譜型。并對篩選出的耐替加環(huán)素菌株80-1,對替加環(huán)素敏感性低于質(zhì)控菌的菌株22-4以及質(zhì)控菌分別進(jìn)行攝入試驗(yàn),以初探其耐藥機(jī)... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大腸埃希菌藥物耐藥率示意圖

西南大學(xué)獸醫(yī)碩士學(xué)位論文28圖3-2大腸埃希菌耐藥重?cái)?shù)百分率Fig.3-2Multi-resistanceofE.coli3.4分析與討論3.4.1細(xì)菌耐藥性問題日益嚴(yán)重抗菌藥的發(fā)現(xiàn)是造福人類的一項(xiàng)重要舉措，但是隨著抗菌藥不斷創(chuàng)新發(fā)展，逐漸偏離了預(yù)想的軌道�？咕幵谝种茪缂�(xì)菌的同時(shí)，細(xì)菌也在不斷進(jìn)化，敏感的菌株死亡，具有抗藥性的菌株獲得生存優(yōu)勢，從而出現(xiàn)耐藥性后代，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)。而耐藥性的產(chǎn)生給人類健康和養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展帶來了巨大的挑戰(zhàn)，隨著抗菌藥物的廣泛使用，耐藥率的迅速升高，耐藥性的監(jiān)測顯得尤為重要。本次試驗(yàn)，9種藥物對質(zhì)控菌ATCC25922的MIC值均在在歐盟標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，說明此試驗(yàn)所采用的試驗(yàn)方法可靠、準(zhǔn)確，試驗(yàn)結(jié)果可信。從分離的174株不同豬場的大腸埃希菌結(jié)果分析，大腸埃希菌對四環(huán)素類藥物以及喹諾酮類藥物恩諾沙星的耐藥率較高，在畜牧業(yè)常用的氨基糖苷類抗生素慶大霉素與氯霉素類抗生素氟苯尼考耐藥率同樣偏高，均超過60%，與張珍珍[79]所報(bào)道的結(jié)果一致。王學(xué)君[80]報(bào)道了貴州8個(gè)地區(qū)對豬源大腸埃希菌對四環(huán)素類藥物的耐藥性情況，發(fā)現(xiàn)四環(huán)素耐藥率高達(dá)97.6%，而土霉素的耐藥率也高達(dá)97.3%。隋明[81]等調(diào)查四川省藏香豬大腸埃希菌的耐藥性，其中對四環(huán)素類藥物多西環(huán)素的耐藥率也達(dá)到74.2%，說明四環(huán)素類藥物在多個(gè)省市的畜牧業(yè)出現(xiàn)了高度耐藥情況，急需引起重視。替加環(huán)素作為甘氨酰四環(huán)素類的首個(gè)藥物，但在未使用過的環(huán)境下發(fā)現(xiàn)了一株耐藥菌株，耐藥率為0.6%。各類抗菌藥對大腸埃希菌均產(chǎn)生了不同程度的耐藥，于是探究其機(jī)制，

第4章替加環(huán)素在大腸埃希菌體內(nèi)累積濃度檢測方法的建立與驗(yàn)證35表4-3截取部分替加環(huán)素與吸光度的對應(yīng)值，其吸光度峰值達(dá)到246nm處的1.065后開始下降，所以結(jié)合圖表可知，246nm處為替加環(huán)素的最大吸收波長。圖4-1：紫外色譜儀測定替加環(huán)素最大吸收波長Fi.4-1:Determinationofthemaximumabsorptionwavelengthoftigecyclinebyinfraredchromatography表4-3替加環(huán)素波長與吸光度對應(yīng)值Table4-3Correspondingvaluesoftigecyclinewavelengthandabsorbance波長(nm)240241242243244245246247248249吸光度(Abs)1.0341.0441.0531.0591.0631.0631.0651.0611.0571.0494.3.1.2流速流速確定為0.6mL/min。流速1.0mL/min時(shí)，流速過大，高效液相色譜儀會自動(dòng)觸發(fā)保護(hù)機(jī)制，導(dǎo)致停泵，試驗(yàn)無法繼續(xù)，同時(shí)也超過柱子本身所能承受的壓力。4.3.1.3流動(dòng)相比例的確定流動(dòng)相確定為磷酸氫二胺：三乙胺：甲醇，其比例為70:1:29。紫外檢測波長為246nm，流速0.6mL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量10μL。4.3.2HPLC測定替加環(huán)素含量方法的驗(yàn)證4.3.2.1線性關(guān)系的考察標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖4-2，經(jīng)過線性回歸得到方程為y=0.3524x+0.004，R2=0.9991，結(jié)果表明：替加環(huán)素含量在0.08μg/mL~1μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]邯鄲市大氣PM2.5環(huán)境中耐藥菌和耐藥基因的污染特征和傳播擴(kuò)散機(jī)理研究[D]. 侯澤林.河北工程大學(xué) 2019
[2]貴州省豬源大腸桿菌四環(huán)素耐藥水平和耐藥基因相關(guān)性研究[D]. 王學(xué)君.貴州大學(xué) 2018
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本文編號：2973459