牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus, BVDV）的宿主譜非常廣,除了感染牛以外,還可引起豬、羊、鹿、駱駝和多種野生動物發(fā)病。該病的臨床癥狀具有多種形式,包括牛病毒性腹瀉-黏膜病、繁殖障礙、血小板減少與出血綜合征、持續(xù)性感染、免疫耐受等。母畜在懷孕后30-120天內(nèi)感染非致細胞病變型（noncytopathic,NCP） BVDV,由于此時胎兒的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全,不能免疫識別外源的NCP型BVDV,因此可造成胎兒死亡、產(chǎn)死胎和畸形胎等,存活的胎兒雖表現(xiàn)正常,但持續(xù)性感染BVDV并終身帶毒,成為重要傳染源。事實上,持續(xù)性感染是BVDV在環(huán)境中維持長期存在的重要原因之一。近年來,由于豬和感染BVDV的牛群直接或間接接觸、給豬飼喂牛奶或牛下水、或接種污染BVDV的豬瘟疫苗等要素,使得豬群中BVDV感染率急劇升高。值得注意的是,豬瘟疫苗制備過程中使用的牛血清和細胞系也一定程度上增加了豬感染BVDV的風(fēng)險。由于BVDV和豬瘟病毒（classical swine fever virus, CSFV）在血清學(xué)上有一定的交叉反應(yīng),因而在豬瘟檢疫過程中,常常將BV... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
目錄
符號說明
文獻綜述
    一. 豬感染BVDV的研究進展
        1. 豬源BVDV的流行史
        2. 豬感染BVDV的臨床癥狀
        3. 豬源BVDV的傳染源
        4. 豬感染BVDV和CSFV的鑒別診斷
    二. BVDV感染性克隆的研究進展
        1. 感染性克隆研究的意義和策略
        2. BVDV感染性克隆的應(yīng)用
    三. 非結(jié)構(gòu)蛋白與細胞抗病毒天然免疫
        1. 細胞抗病毒天然免疫
        2. BVDV非結(jié)構(gòu)蛋白的功能研究進展
    四. 開展本論文研究的背景及意義
    參考文獻
第一章 豬源牛病毒性腹瀉病毒的分離與鑒定
    摘要
    Abstract
    1. 材料
        1.1 樣品來源及背景
        1.2 毒株、細胞和菌株
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2. 方法
        2.1 引物設(shè)計
        2.2 病毒的分離培養(yǎng)
        2.3 間接免疫熒光
        2.4 病毒RNA的提取和RT-PCR
        2.5 基因克隆及測序分析
    3. 結(jié)果
        3.1 RT-PCR檢測
        3.2 間接免疫熒光檢測結(jié)果
        3.3 基因分型
        3.4 E2基因的同源性分析
    4. 討論
    參考文獻
第二章 豬源BVDV-2分離株SH-28全基因組序列的測定與分析
    摘要
    Abstract
    1. 材料
        1.1 細胞、毒株和菌株
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2. 方法
        2.1 病毒增殖
        2.2 引物設(shè)計
        2.3 病毒基因組中間序列的測定
        2.4 病毒基因組末端序列的測定
        2.5 基因序列的拼接與分析
    3. 結(jié)果
        3.1 RT-PCR擴增、測序及拼接
        3.2 SH-28全基因組序列遺傳信息分析
    4. 討論
    參考文獻
第三章 豬源BVDV-2分離株感染性克隆的構(gòu)建及病毒拯救
    摘要
    Abstract
    1. 材料
        1.1 病毒、細胞、菌體和載體
        1.2 試劑與抗體
        1.3 主要儀器
    2. 方法
        2.1 SH-28株全長cDNA感染性克隆的構(gòu)建
        2.2 亞基因感染性克隆的構(gòu)建
        2.3 體外轉(zhuǎn)錄
        2.4 細胞轉(zhuǎn)染
        2.5 感染性病毒粒子的鑒定
    3. 結(jié)果
        3.1 SH-28株全長cDNA感染性克隆的構(gòu)建與鑒定
        3.2 亞基因組感染性克隆的構(gòu)建與鑒定
        3.3 vASH病毒的拯救與鑒定
pro缺失病毒的拯救與鑒定">        3.4 vASH⊿N^pro缺失病毒的拯救與鑒定
        3.5 病毒滴度增長趨勢的比較
    4. 討論
    參考文獻
第四章 豬源BVDV-2非結(jié)構(gòu)蛋白的功能探析
    摘要
    Abstract
    1. 材料
        1.1 病毒、細胞、菌體和載體
        1.2 試劑與抗體
        1.3 主要儀器
    2. 方法
        2.1 引物設(shè)計
        2.2 重組真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定
        2.3 細胞轉(zhuǎn)染
        2.4 Western blot檢測非結(jié)構(gòu)蛋白的表達
        2.5 熒光定量PCR檢測
    3. 結(jié)果
        3.1 重組真核表達質(zhì)粒的鑒定
        3.2 非結(jié)構(gòu)蛋白表達的檢測
        3.3 豬源BVDV-2及其非結(jié)構(gòu)蛋白對IFN-I表達的影響
        3.4 過量表達非結(jié)構(gòu)蛋白對豬源BVDV-2誘導(dǎo)抗病毒蛋白表達的影響
        3.5 缺失表達Npro蛋白對豬源BVDV-2誘導(dǎo)抗病毒蛋白表達的影響
    4. 討論
    參考文獻
全文小結(jié)
本論文的創(chuàng)新點
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]警惕豬群中牛病毒性腹瀉病毒感染[J]. 李嬌,祖立闖,王金良,苗立中,王艷,沈志強.  養(yǎng)豬. 2013(05)
[2]豬群常見疫病混合感染情況調(diào)查[J]. 梁晟,鄭敏,鄭列豐,楊榮,溫麗霞,付薇.  中國畜牧獸醫(yī). 2013(06)
[3]福建龍巖規(guī)�；i場BVDV感染的血清學(xué)調(diào)查[J]. 戴愛玲,魏春華,黃思瓊,李曉華,楊小燕.  龍巖學(xué)院學(xué)報. 2013(02)
[4]抗病毒蛋白PKR的結(jié)構(gòu)和功能[J]. 夏君,謝炯,張萍.  中國免疫學(xué)雜志. 2013(02)
[5]牛病毒性腹瀉病毒感染牛外周血單核細胞對IFN-α、β、γmRNA轉(zhuǎn)錄的影響[J]. 韓猛立,黃新,鐘發(fā)剛.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2012(08)
[6]牛病毒性腹瀉病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS3的研究進展[J]. 侯佩莉,孫濤,何洪彬.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(05)
[7]豬源牛病毒性腹瀉病毒套式PCR檢測方法的建立[J]. 鄧宇,藺濤,張榮,叢雁方,張建武,袁世山,文心田,鄭浩.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2012(05)
[8]豬源牛病毒性腹瀉病毒SD0803株E2蛋白的表達及抗體制備[J]. 鄧宇,藺濤,孫春清,張宏彪,張榮,龍進學(xué),黃律,文心田,曹三杰,童光志,袁世山,鄭浩.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2012(04)
[9]牛病毒性腹瀉病毒反向遺傳學(xué)研究進展[J]. 何延華,韓猛立,黃新,鐘發(fā)剛,薄新文.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(03)
[10]豬瘟和藍耳病疫苗中BVDV和PCV污染情況調(diào)查[J]. 葉兆美.  四川畜牧獸醫(yī). 2012(03)

碩士論文
[1]ISG15的原核表達和多克隆抗體的制備及其與豬瘟病毒相互作用的初步研究[D]. 蔡新斌.廣西大學(xué) 2011
[2]BVDV-2分離株XJ-04全基因組測序和抗BVDV單克隆抗體制備及初步應(yīng)用[D]. 林燕清.揚州大學(xué) 2010
[3]BVDV基因1型和2型RT-PCR鑒別診斷方法的建立和抗BVDV單克隆抗體的制備[D]. 蔣穎.揚州大學(xué) 2007



本文編號：2968780