哺乳動(dòng)物的卵泡發(fā)育是一個(gè)復(fù)雜的動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程,在一個(gè)發(fā)情周期中,卵泡發(fā)育成熟排卵,之后形成黃體的過(guò)程是在多種激素、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子作用下完成的,卵泡發(fā)育過(guò)程中,多數(shù)卵泡會(huì)由于優(yōu)勢(shì)選擇而閉鎖,只有少量的卵泡發(fā)育成熟直到排卵,而卵泡的閉鎖過(guò)程實(shí)際上就是卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞的凋亡過(guò)程。研究表明,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ER stress）相關(guān)分子伴侶參與調(diào)節(jié)卵泡的發(fā)育過(guò)程并起到重要的作用,然而其具體的作用機(jī)制仍不明確。CREBZF/Zhangfei（SMILE-L/SMILE-S）是在研究宿主細(xì)胞因子HCF-1時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種堿性亮氨酸拉鏈（basic region leucine zipper,bZIP）轉(zhuǎn)錄因子,早先的研究發(fā)現(xiàn)CREBZF在哺乳動(dòng)物體多數(shù)組織中均有表達(dá),并參與調(diào)節(jié)生理、病理過(guò)程。研究表明CREBZF/Zhangfei能夠與多種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白相互作用,對(duì)調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激起到重要作用。本研究利用免疫組化、干擾慢病毒技術(shù)、RT-PCR、Western Blot、流式細(xì)胞術(shù)等方法對(duì)CREBZF/Zhangfei在不同發(fā)育時(shí)期的小鼠卵巢中的表達(dá)定位和表達(dá)規(guī)律進(jìn)行檢測(cè),并深入研究了CREBZF/Zha... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 卵泡發(fā)育及閉鎖和顆粒細(xì)胞
        1.1 卵泡發(fā)育及閉鎖
        1.2 顆粒細(xì)胞
            1.2.1 顆粒細(xì)胞在卵泡發(fā)育中的作用
            1.2.2 顆粒細(xì)胞的凋亡引起卵泡閉鎖
    第二章 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和Zhangfei的研究進(jìn)展
        2.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
        2.2 細(xì)胞凋亡
        2.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展
            2.3.1 PERK通路在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過(guò)程中的作用
            2.3.2 IRE1通路在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)凋亡過(guò)程中的作用
            2.3.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和BCL-2 家族蛋白
            2.3.4 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和MAPK信號(hào)通路
        2.4 Zhangfei的生物學(xué)特性及其在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用
            2.4.1 Zhangfei的發(fā)現(xiàn)
            2.4.2 CREBZF/Zhangfei在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用
第二部分 試驗(yàn)研究
    第三章 CREBZF/Zhangfei在小鼠卵巢組織中的表達(dá)規(guī)律及定位
        3.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.1.1 主要試劑
            3.1.2 主要儀器
            3.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2 試驗(yàn)方法
            3.2.1 雌鼠卵巢石蠟切片的制備
            3.2.2 免疫組化染色
            3.2.3Western Bolt檢測(cè)
        3.3 試驗(yàn)結(jié)果
            3.3.1 CREBZF/Zhangfei在不同發(fā)情時(shí)期小鼠卵巢中的表達(dá)分布
            3.3.2 Western Blot檢測(cè)不同發(fā)情時(shí)期小鼠卵巢CREBZF/Zhangfei的表達(dá)
            3.3.3 Western Blot檢測(cè)人工誘導(dǎo)卵泡發(fā)育過(guò)程中不同時(shí)間小鼠卵巢CREBZF/Zhangfei的表達(dá)變化
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第四章 CREBZF/Zhangfei基因慢病毒干擾及過(guò)表達(dá)載體的擴(kuò)增和病毒顆粒包裝
        4.1 實(shí)驗(yàn)材料
            4.1.1 感受態(tài)細(xì)菌、質(zhì)粒、細(xì)胞
            4.1.2 主要試劑
            4.1.3 主要儀器
        4.2 試驗(yàn)方法
            4.2.1 CREBZF/Zhangfei基因慢病毒干擾和過(guò)表達(dá)載體的擴(kuò)增和鑒定
            4.2.2 用于病毒顆粒包裝的HEK 293T細(xì)胞的準(zhǔn)備
            4.2.3 慢病毒顆粒的包裝和濃縮
            4.2.3 病毒滴度的測(cè)定
        4.3 試驗(yàn)結(jié)果
            4.3.1 CREBZF/Zhangfei基因慢病毒干擾和過(guò)表達(dá)載體鑒定
            4.3.2 檢測(cè)重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染
            4.3.3 慢病毒滴度測(cè)定
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第五章 CREBZF/Zhangfei對(duì)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用
        5.1 實(shí)驗(yàn)材料
            5.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            5.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.2 試驗(yàn)方法
            5.2.1 實(shí)驗(yàn)小鼠的處理
            5.2.2 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞的采集和培養(yǎng)
            5.2.3 慢病毒顆粒感染小鼠卵巢顆粒細(xì)胞
            5.2.4 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率檢測(cè)
            5.2.5 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞蛋白提取及凋亡相關(guān)因子的檢測(cè)
        5.3 試驗(yàn)結(jié)果
            5.3.1 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)
            5.3.2 慢病毒感染小鼠卵巢顆粒細(xì)胞
            5.3.3 慢病毒顆粒的過(guò)表達(dá)和干擾效率測(cè)定
            5.3.4 干擾和過(guò)表達(dá)CREBZF/Zhangfei對(duì)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的影響
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Zhangfei在小鼠動(dòng)情周期卵巢和子宮中的分布[J]. 喬海嬌,林鵬飛,王愛(ài)華.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2011(12)

博士論文
[1]Zhangfei基因在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)中的生物功能研究[D]. 張亞妮.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010

碩士論文
[1]小鼠Zhangfei基因過(guò)表達(dá)和shRNA干擾慢病毒載體的構(gòu)建和鑒定[D]. 陳風(fēng)雷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]Zhangfei蛋白在小鼠發(fā)情周期卵巢及子宮中的表達(dá)[D]. 喬海嬌.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011



本文編號(hào)：2968679