為探明福州某患病大熊貓的病因,研究病原菌的生物學(xué)特性、藥物敏感性及致病性,從患病大熊貓的糞便中分離、純化病原菌,經(jīng)培養(yǎng)特性、形態(tài)學(xué)觀察、生化試驗(yàn)及16S rRNA PCR擴(kuò)增、測(cè)序及進(jìn)化樹(shù)分析等系統(tǒng)鑒定,并對(duì)鑒定菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)、動(dòng)物致病性試驗(yàn)、組織病理學(xué)觀察及毒力因子檢測(cè)。結(jié)果分離到1株具有遷徙生長(zhǎng)特點(diǎn)的革蘭陰性桿菌,生化特性與普通變形桿菌（Proteus vulgaris）相一致,16S rRNA基因序列與普通變形桿菌的相似性為99.9%,進(jìn)化樹(shù)分析顯示,與普通變形桿菌處于同一分支,確定分離菌為普通變形桿菌,命名為GP19株。該分離菌至少攜帶ureC、mrpA、fli L、flhA、flhB、flhD和pmbA等7種毒力基因,小鼠腹腔接種后12 h內(nèi)死亡,半數(shù)致死量（LD50）為9.73×106CFU/m L。病理切片觀察可見(jiàn)肝、脾、肺、腎、腦等實(shí)質(zhì)器官淤血、出血,十二指腸腸絨毛大量壞死、脫落。藥敏試驗(yàn)表明,該菌對(duì)環(huán)丙沙星、頭孢克肟和氨曲南等23種藥物敏感,對(duì)林可霉素、強(qiáng)力霉素和頭孢唑啉等13種藥物耐藥。以上研究表明,患病大熊貓糞便中存在攜帶多種毒力因子的普通變形桿菌,并表現(xiàn)出較強(qiáng)的... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(11)北大核心

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【部分圖文】：

臨床病料及細(xì)菌的分離培養(yǎng)

圖2 分離菌形態(tài)學(xué)觀察（革蘭染色，箭頭指的是菌體，1 000×）

利用細(xì)菌16S r RNA引物對(duì)分離菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果（圖3）顯示，大約在1500 bp處可見(jiàn)單一、明亮的特異性條帶。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序及組裝，與NCBI中已公布的序列進(jìn)行BLAST比對(duì)，結(jié)果顯示，分離菌與普通變形桿菌的同源性為99.9%。選取變形桿菌屬相關(guān)菌株構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，結(jié)果分離菌與普通變形桿菌聚集在同一個(gè)小分支上（圖4），進(jìn)一步確證分離菌GP19株為普通變形桿菌。2.4 致病性試驗(yàn)及組織病變觀察

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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