雞痘是由雞痘病毒（Fowlpox virus，F(xiàn)PV）引起的一種接觸性傳染病，廣泛發(fā)生于雞和火雞，臨床上主要分為皮膚型、黏膜型和混合型三種。皮膚型雞痘特征性病變表現(xiàn)為局灶性上皮組織增生；黏膜型又稱“白喉型”，以口腔和咽喉黏膜發(fā)生纖維素性壞死性炎癥為主要特征，由于該型病雞常發(fā)生窒息死亡而導致此病變在臨床上不常見；混合型則兼有以上兩種類型的病理變化。FPV感染可引起母雞產蛋量下降、育肥雞生長遲緩，甚至出現(xiàn)繼發(fā)感染而導致病雞死亡，因此該病的發(fā)生對世界養(yǎng)禽業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。近半個世紀以來，在雞痘流行區(qū)域，主要使用雞痘和鴿痘病毒疫苗進行免疫預防，雖然因普遍采用疫苗免疫接種使雞痘疫情報道明顯減少，但由于病毒變異而導致免疫失敗引發(fā)雞痘的病例時有發(fā)生。近年來，在我國的FPV疫苗毒和野毒株中不斷有REV的污染和基因整合的報道，REV基因片段甚至完整的基因組整合在FPV基因組中的現(xiàn)象比較普遍。2009年，本實驗室從吉林省公主嶺市某爆發(fā)雞痘的大型雞場中分離到了一株高致病性雞痘病毒，通過雞胚進行克隆純化，并將其命名為FPV JL09C2。對FPV JL09C2株進行全基因組測序發(fā)現(xiàn)，其基因組中整合了接近全... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

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FPV基因組結構

圖1.1 PCR擴增FPV ORF 202(1，4)，REV gag(2，5)、gp90(3)、及env(6)的電泳分析;M 為100bp DNA Ladder Marker。 Amplification of FPV ORF 202(1，4)，REV gag(2，5)、gp90(3)and env geneM: 100bp DNA Ladder Marker (bp).V-gag， REV-gp90 蛋白在 E.coli BL21(DE3)中的誘導表達得 REV-gag， REV-gp90 重組原核表達蛋白，分別將構建好的 pET28a-gag 原核表達重組質粒轉化表達菌 E.coli BL21(DE3)中，表達重組菌在 37℃0=0.8-1.0 后加入終濃度為 1mM IPTG 誘導表達 5 小時后 SDS-PAGE 檢查目的在誘導表達 5h 后與誘導表達前相比在蛋白分子量大小 45 和 50KDa 左右的蛋白條帶（圖 1.2）。

圖1.2 SDS-PAG分析蛋白的表達和純化情況1：誘導前;2：誘導后。B，D為A，C純化后的蛋白; M:蛋白預Fig. 1.2 SDS-PAG analysis of gene expression1：pre-expression;2：expression; M:protein marker.REV-gp90 表達情況分析C2 中插入的 REV 序列在 5’ 和 3’ 端 LTR 分別缺失 29 和 320bR 為 REV 的啟動子。為了驗證兩端缺失的序列是否會影響 RECD

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2966323