為建立一種快速、靈敏、適用于大批量樣品檢測非洲豬瘟病毒（ASFV）的方法,本研究使用金納米顆粒與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相結(jié)合,針對(duì)ASFV中P72保守序列,建立了一種新的ASFV的NanoPCR分子檢測方法,并對(duì)其特異性和敏感性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,對(duì)于相關(guān)病毒,包括豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）和豬瘟病毒（CSFV）,NanoPCR分析均未發(fā)現(xiàn)交叉反應(yīng)。與常規(guī)PCR相比,NanoPCR靈敏度更高,每個(gè)反應(yīng)的檢出限為2.86×10³copies/μL,而常規(guī)PCR檢出限為2.86×10⁴copies/μL。用建立的方法對(duì)23份臨床樣品進(jìn)行檢測,結(jié)果 ASFV的陽性檢出率為60.86%。綜上所述,本研究開發(fā)的靈敏、特異性的NanoPCR方法可廣泛應(yīng)用于ASFV感染的臨床診斷和現(xiàn)場監(jiān)測。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 Nano PCR引物設(shè)計(jì)
    1.3 Nano PCR的建立及反應(yīng)條件的優(yōu)化
    1.4 ASFV Nano粒子敏感性的優(yōu)化
    1.5 ASFV Nano粒子的特異性鑒定
2 結(jié)果
    2.1 Nano PCR的建立及反應(yīng)條件的優(yōu)化
    2.2 ASFV Nano PCR的敏感性試驗(yàn)與普通PCR敏感性的對(duì)比
    2.3 Nano PCR的特異性檢測
    2.4 臨床樣品的Nano PCR檢測
3 討論



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