豬植入前體外胚胎及naive-like ESCs的脂肪酸代謝分析
發(fā)布時(shí)間:2021-01-08 06:10
脂質(zhì)在植入前胚胎發(fā)育(preimplantation embryonic development,PED)過(guò)程中作為能量來(lái)源以影響生物膜的特性和功能,在細(xì)胞間的相互作用及細(xì)胞增殖中發(fā)揮重要作用,而且脂質(zhì)在卵母細(xì)胞成熟,胚胎發(fā)育和干細(xì)胞增殖中起重要作用,豬在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生物醫(yī)學(xué)研究中具有很重要的研究?jī)r(jià)值,和其他細(xì)胞比較,豬卵母細(xì)胞和植入前胚胎中存在較多脂質(zhì)。然而,目前脂肪酸代謝在豬PED過(guò)程中的作用機(jī)制知之甚少。因此,本研究初步探索了脂肪酸代謝在豬PED和naive樣胚胎干細(xì)胞(naive-like Embryonic stem cells,nlESCs)中的作用機(jī)制。首先,我們確立了2種卵母細(xì)胞體外成熟的培養(yǎng)體系,通過(guò)觀察成熟率、囊胚率及其細(xì)胞形態(tài),最終確定的成熟體系為在體外成熟液中添加10%的卵泡液。獲得成熟卵母細(xì)胞后,我們通過(guò)5種不同激活方式,分別為電激活、電激活結(jié)合CB和9%乙醇分別作用3 min、8 min、11 min。通過(guò)比較卵裂率和囊胚率,發(fā)現(xiàn)電激活(卵裂率為81.69±0.41%,囊胚率為26.45±0.28%)方式是最優(yōu)的方案。隨后本研究通過(guò)脂滴染色的方式對(duì)孤雌胚胎的脂...
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:83 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
生物信息分析流程圖
27圖 2-2 豬體外孤雌培養(yǎng)各時(shí)期胚胎的形態(tài);( B ) 4-細(xì)胞;( C ) 8-細(xì)胞;( D ) 桑椹胚;( E ) 囊胚;圖 A、B、C、D 和 E 放大倍0 μm。Fig.2-2 The morphology of embryos in each stage of pig in vitro culture-cell stage; ( B ) The 4-cell stage; ( C ) The 8-cell stage; ( D ) The morula stage; ( E ) The b, C, D and E are magnification 20× and a scale of 100 μm.入前胚胎的脂滴染色分析
劉芳 豬植入前體外胚胎及 naive-like ESCs 的脂肪酸代謝分析一步明確脂質(zhì)在豬早期胚胎中的存在情況,本研究使用 LD 的 BODIP對(duì)各階段胚胎進(jìn)行染色 ( Fig.2-3 ),利用 Photoshop 軟件測(cè)量各時(shí)期中數(shù)據(jù)處理 ( Fig.2-4 )。ig.2-3 和 Fig.2-4 可知,LD 染色顯示 LD 形態(tài)在胚胎發(fā)育過(guò)程中不斷變最后沒(méi)有明顯的顆粒形態(tài),桑椹胚中 LD 含量高于其他時(shí)期,8-細(xì)胞時(shí)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Pathogenesis and management issues for non-alcoholic fatty liver disease[J]. Marko Duvnjak,Ivan Leroti,Neven Bari,Vedran Tomai,Lucija Virovi Juki,Vedran Velagi. World Journal of Gastroenterology. 2007(34)
[2]對(duì)脂肪滴的新認(rèn)識(shí)(英文)[J]. REN BARTZ,JOHNK ZEHMER. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(05)
[3]不同激活方法對(duì)豬體外成熟卵母細(xì)胞孤雌發(fā)育的影響[J]. 劉國(guó)世,曾申明,吳中紅,邢鳳英,田見(jiàn)暉,林平,姜午旗,劉敬浩,朱士恩,張忠誠(chéng). 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(06)
[4]乙醇激活誘導(dǎo)小鼠孤雌胚的發(fā)育與核型分析[J]. 劉紅林,汪河海,范必勤,王公金. 畜牧與獸醫(yī). 2000(01)
博士論文
[1]豬NANOG基因的特性及其上下游調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究[D]. 楊藩.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
本文編號(hào):2964071
【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:83 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
生物信息分析流程圖
27圖 2-2 豬體外孤雌培養(yǎng)各時(shí)期胚胎的形態(tài);( B ) 4-細(xì)胞;( C ) 8-細(xì)胞;( D ) 桑椹胚;( E ) 囊胚;圖 A、B、C、D 和 E 放大倍0 μm。Fig.2-2 The morphology of embryos in each stage of pig in vitro culture-cell stage; ( B ) The 4-cell stage; ( C ) The 8-cell stage; ( D ) The morula stage; ( E ) The b, C, D and E are magnification 20× and a scale of 100 μm.入前胚胎的脂滴染色分析
劉芳 豬植入前體外胚胎及 naive-like ESCs 的脂肪酸代謝分析一步明確脂質(zhì)在豬早期胚胎中的存在情況,本研究使用 LD 的 BODIP對(duì)各階段胚胎進(jìn)行染色 ( Fig.2-3 ),利用 Photoshop 軟件測(cè)量各時(shí)期中數(shù)據(jù)處理 ( Fig.2-4 )。ig.2-3 和 Fig.2-4 可知,LD 染色顯示 LD 形態(tài)在胚胎發(fā)育過(guò)程中不斷變最后沒(méi)有明顯的顆粒形態(tài),桑椹胚中 LD 含量高于其他時(shí)期,8-細(xì)胞時(shí)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Pathogenesis and management issues for non-alcoholic fatty liver disease[J]. Marko Duvnjak,Ivan Leroti,Neven Bari,Vedran Tomai,Lucija Virovi Juki,Vedran Velagi. World Journal of Gastroenterology. 2007(34)
[2]對(duì)脂肪滴的新認(rèn)識(shí)(英文)[J]. REN BARTZ,JOHNK ZEHMER. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(05)
[3]不同激活方法對(duì)豬體外成熟卵母細(xì)胞孤雌發(fā)育的影響[J]. 劉國(guó)世,曾申明,吳中紅,邢鳳英,田見(jiàn)暉,林平,姜午旗,劉敬浩,朱士恩,張忠誠(chéng). 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2004(06)
[4]乙醇激活誘導(dǎo)小鼠孤雌胚的發(fā)育與核型分析[J]. 劉紅林,汪河海,范必勤,王公金. 畜牧與獸醫(yī). 2000(01)
博士論文
[1]豬NANOG基因的特性及其上下游調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究[D]. 楊藩.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
本文編號(hào):2964071
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