本試驗應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù),建立了一種快速檢測豬糞便中流行性腹瀉病毒（PEDV）的方法,并應(yīng)用于臨床檢測。用膠體金標記抗PEDV單克隆抗體B1,摸索與優(yōu)化標記條件并制備成金墊;將抗PEDV的單克隆抗體B2和羊抗鼠IgG多克隆抗體噴在硝酸纖維素膜上,優(yōu)化確定最佳包被濃度,組裝成試紙條并做成帶有樣本采集部件的檢測卡。結(jié)果表明,PEDV快速檢測卡可檢測最低病毒含量為100 TCID₅₀/mL;臨床檢測腹瀉豬糞便樣本,與PCR試劑盒結(jié)果對比,本檢測卡靈敏度為94.7%,特異性為100%。表明該方法簡單快速,結(jié)果準確,適合豬場現(xiàn)場采集發(fā)生腹瀉的豬只糞便,及時檢測豬發(fā)病感染情況。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)雜志. 2020年07期 北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

PEDV檢測卡組成

用1頭份/mL PEDV 疫苗(該批次的疫苗生產(chǎn)檢驗報告顯示PEDV實際病毒含量檢測結(jié)果為1.0×105.7TCID50/頭份)進行靈敏度檢測,用0.2 mol/L的PB緩沖液倍比稀釋,確定檢測卡的靈敏度。結(jié)果最低能檢測到稀釋104倍的病毒液,約100 TCID50的病毒量,如圖2所示。2.8 檢測卡重復(fù)性結(jié)果及加速穩(wěn)定性檢測

將檢測卡放置于50 ℃溫箱中,每周與常溫條件下存放的檢測卡對比檢測,結(jié)果檢測卡在50 ℃下保存10周其檢測結(jié)果無明顯差異,可依此確定檢測卡室溫保質(zhì)期最少為12個月。2.9 臨床樣本檢測

【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒檢測方法的研究進展[J]. 李亞蘭,袁曉民,湛洋,楊凌宸,胡意,譚磊,劉譚彬,郭時印,王愛兵.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(03)
[2]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒A多重熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[J]. 李軍,蔡良語,陳兵,劉建利,孫潔,陳書琨,林慶燕,陶虹,吳紹強,盧體康,陳金頂,秦智鋒.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2018(09)



本文編號：2958803