表達H5亞型禽流感病毒Mosaic HA蛋白重組火雞皰疹病毒的構(gòu)建與免疫效力的測定
發(fā)布時間:2021-01-05 03:11
H5亞型禽流感(Avian Influenza,AI)是由正黏RNA病毒科流感病毒屬A型流感病毒引起的禽類烈性、高致病性傳染病,對家禽的致死率可達100%。H5亞型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)的自然宿主是水禽,但其宿主范圍已擴大到可感染多種哺乳動物,甚至是引起人類死亡,并且隨著候鳥的遷徙傳播到多個洲,因此家禽H5亞型禽流感的有效防控對人類的公共衛(wèi)生安全至關(guān)重要。H5亞型禽流感病毒表面糖蛋白血凝素(Hemagglutinin,HA)變異迅速,在遺傳進化上產(chǎn)生很多不同的分支,近幾年我國主要流行clade 2.3.4.4和clade 2.3.2.1兩個分支,目前禽流感的控制主要是通過疫苗免疫,常用的疫苗分別為Re-8和Re-6滅活疫苗。H5 AIV的暴發(fā)往往是由于現(xiàn)有疫苗的抗原性與流行株抗原性不匹配,每當病毒抗原變異或重組,新的毒株出現(xiàn)時,就需要篩選新的疫苗株,這個過程耗時費力,而且?guī)缀趺扛?~5年就需要更新疫苗。因此廣譜疫苗的開發(fā)成為目前流感疫苗研究的一個熱點,包括設(shè)計針對流感病毒保守區(qū)域如莖部的疫苗、Mosaic疫苗等。另外,現(xiàn)有的商品化疫苗通常為滅活...
【文章來源】:揚州大學江蘇省
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2-1質(zhì)粒構(gòu)建示意圖??Fag?2-1?Diagram?of?plasmid?construction??
分別為pAB-Pec-H5M(P-H5M)、pAB-Pec-SQ1402?(P-SQ1402)、pAB-Pec-YZllll(P-??YZ1111)、pAB-HgB-H5M?(H-H5M)、pAB-HgB-SQ1402?(H-SQ1402)和?pAB-HgB-YZllll??(H-YZ1111)。如圖2-2。連接體系如下,體系混勻后16°C金屬浴連接16h。??目的片段?25叫??載體?M??T4DNA連接酶?1叫??lOxBuffer?4(il??SW?2[i\??總體積?2〇nl??
我們可以發(fā)現(xiàn),9表位長度的覆蓋率都稍高于12表位長度,這是由于表位長度設(shè)置為12??時,只有當12個氨基酸匹配時才能計算得分,而表位長度設(shè)置為9時,9個氨基酸發(fā)生匹??配時就可以計算得分(如圖2-3,表2-2,表2-3)。??A?1]?—?[腸,,??0.9?-?l?-??2;SQ1402??He】1??1?2?3?4?5??D?1?]?r??°?1:H5M??...!?2:SQ1402??1?2?3?4?5??注.??A:?9-mer抗原表位覆蓋率;B:?12-mer抗原表位覆蓋率;??圖2-3抗原表位覆蓋率??Fig?2-3?The?map?of?epitope?coverage??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]兩種重組禽流感病毒H5亞型疫苗免疫效果的研究[J]. 奉佳,楊輝,顏克旭,劉增再,譚丹,陳智,寧華杰. 湖南畜牧獸醫(yī). 2017(05)
[2]第2.3.2.1分支H5亞型禽流感變異株候選疫苗株的構(gòu)建及免疫效力試驗[J]. 蔣文明,李金平,侯廣宇,王素春,袁萬哲,孫文博,彭程,陳繼明. 中國動物檢疫. 2017(09)
[3]H5亞型禽流感病毒的研究與應(yīng)用[J]. 吳宗耀,張建超,彭祿庭,韓奇鵬. 湖南畜牧獸醫(yī). 2017(04)
[4]H5亞型禽流感Re-6株+Re-7株+Re-8株三價滅活苗免疫效果的評估與分析[J]. 蔡文博. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(05)
[5]γ-環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶在畢赤酵母中高效表達[J]. 張燕,李夢臘,張建國. 工業(yè)微生物. 2017(01)
[6]禽流感-火雞皰疹病毒重組活載體疫苗的研究進展[J]. 郝小利,劉秀梵. 中國家禽. 2015(21)
[7]CMV啟動子驅(qū)動報告基因EGFP在轉(zhuǎn)基因豬和轉(zhuǎn)基因小鼠不同組織中的表達效率比較[J]. 杜寶珠,覃玉鳳,楊曉亮,孫燕霞,劉志國,叢佩清,陳瑤生,何祖勇. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報. 2015(10)
[8]不同啟動子表達載體的構(gòu)建及其體外活性分析[J]. 劉正偉,李慧敏,黃妙容,郭凱,王建麗,李延鵬,陳瑞愛. 中國畜牧獸醫(yī). 2014(02)
[9]基因設(shè)計對重組蛋白表達的影響研究進展[J]. 蔡海鶯,李楊,張輝,馮鳳琴. 生物工程學報. 2013(09)
[10]重組火雞皰疹病毒載體疫苗研究進展[J]. 劉培欣,曹殿軍. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2003(11)
博士論文
[1]CRISPR/Cas9靶向編輯技術(shù)的優(yōu)化及其在干細胞中的應(yīng)用[D]. 王曄博.浙江大學 2016
碩士論文
[1]表達H7N9亞型禽流感病毒HA蛋白重組火雞皰疹病毒的構(gòu)建與免疫效力測定[D]. 何東昌.揚州大學 2017
本文編號:2957906
【文章來源】:揚州大學江蘇省
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2-1質(zhì)粒構(gòu)建示意圖??Fag?2-1?Diagram?of?plasmid?construction??
分別為pAB-Pec-H5M(P-H5M)、pAB-Pec-SQ1402?(P-SQ1402)、pAB-Pec-YZllll(P-??YZ1111)、pAB-HgB-H5M?(H-H5M)、pAB-HgB-SQ1402?(H-SQ1402)和?pAB-HgB-YZllll??(H-YZ1111)。如圖2-2。連接體系如下,體系混勻后16°C金屬浴連接16h。??目的片段?25叫??載體?M??T4DNA連接酶?1叫??lOxBuffer?4(il??SW?2[i\??總體積?2〇nl??
我們可以發(fā)現(xiàn),9表位長度的覆蓋率都稍高于12表位長度,這是由于表位長度設(shè)置為12??時,只有當12個氨基酸匹配時才能計算得分,而表位長度設(shè)置為9時,9個氨基酸發(fā)生匹??配時就可以計算得分(如圖2-3,表2-2,表2-3)。??A?1]?—?[腸,,??0.9?-?l?-??2;SQ1402??He】1??1?2?3?4?5??D?1?]?r??°?1:H5M??...!?2:SQ1402??1?2?3?4?5??注.??A:?9-mer抗原表位覆蓋率;B:?12-mer抗原表位覆蓋率;??圖2-3抗原表位覆蓋率??Fig?2-3?The?map?of?epitope?coverage??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]兩種重組禽流感病毒H5亞型疫苗免疫效果的研究[J]. 奉佳,楊輝,顏克旭,劉增再,譚丹,陳智,寧華杰. 湖南畜牧獸醫(yī). 2017(05)
[2]第2.3.2.1分支H5亞型禽流感變異株候選疫苗株的構(gòu)建及免疫效力試驗[J]. 蔣文明,李金平,侯廣宇,王素春,袁萬哲,孫文博,彭程,陳繼明. 中國動物檢疫. 2017(09)
[3]H5亞型禽流感病毒的研究與應(yīng)用[J]. 吳宗耀,張建超,彭祿庭,韓奇鵬. 湖南畜牧獸醫(yī). 2017(04)
[4]H5亞型禽流感Re-6株+Re-7株+Re-8株三價滅活苗免疫效果的評估與分析[J]. 蔡文博. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2017(05)
[5]γ-環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶在畢赤酵母中高效表達[J]. 張燕,李夢臘,張建國. 工業(yè)微生物. 2017(01)
[6]禽流感-火雞皰疹病毒重組活載體疫苗的研究進展[J]. 郝小利,劉秀梵. 中國家禽. 2015(21)
[7]CMV啟動子驅(qū)動報告基因EGFP在轉(zhuǎn)基因豬和轉(zhuǎn)基因小鼠不同組織中的表達效率比較[J]. 杜寶珠,覃玉鳳,楊曉亮,孫燕霞,劉志國,叢佩清,陳瑤生,何祖勇. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報. 2015(10)
[8]不同啟動子表達載體的構(gòu)建及其體外活性分析[J]. 劉正偉,李慧敏,黃妙容,郭凱,王建麗,李延鵬,陳瑞愛. 中國畜牧獸醫(yī). 2014(02)
[9]基因設(shè)計對重組蛋白表達的影響研究進展[J]. 蔡海鶯,李楊,張輝,馮鳳琴. 生物工程學報. 2013(09)
[10]重組火雞皰疹病毒載體疫苗研究進展[J]. 劉培欣,曹殿軍. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2003(11)
博士論文
[1]CRISPR/Cas9靶向編輯技術(shù)的優(yōu)化及其在干細胞中的應(yīng)用[D]. 王曄博.浙江大學 2016
碩士論文
[1]表達H7N9亞型禽流感病毒HA蛋白重組火雞皰疹病毒的構(gòu)建與免疫效力測定[D]. 何東昌.揚州大學 2017
本文編號:2957906
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