目的：結(jié)核病是由結(jié)核桿菌引起的慢性傳染病。結(jié)核桿菌可以通過多種途徑侵入人體全身各個器官，但其主要侵犯肺臟，稱為肺結(jié)核病。目前我國是世界上受結(jié)核病影響最嚴(yán)重的國家之一，一直極為重視結(jié)核病的預(yù)防和治療�，F(xiàn)階段我國對結(jié)核病的預(yù)防普遍通過注射卡介苗（BCG）來實(shí)現(xiàn)，但由于卡介苗一定程度上存在免疫缺失，預(yù)防效果不盡如人意。與此同時，在結(jié)核病診斷中常用的ELISA反應(yīng)準(zhǔn)確性不高。尋找新型診斷或治療方法，開發(fā)相應(yīng)產(chǎn)品就顯得尤為重要。現(xiàn)階段，已有一定數(shù)量的科研人員開始著手運(yùn)用融合蛋白[1]檢測結(jié)核病抗體。本實(shí)驗(yàn)選取并克隆部分結(jié)核分枝桿菌的保護(hù)性抗原基因。并從中選取MPT-64基因，將其轉(zhuǎn)入原核感受態(tài)細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，以獲得MPT-64融合蛋白，為結(jié)核病診斷、疫苗開發(fā)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：選取結(jié)核桿菌保護(hù)性抗原基因Ag85a、Ag85b、MPT-63、MPT-64、CFP-10、CFP-21、TB10.4、ESAT-6，為8種結(jié)核桿菌保護(hù)性抗原基因設(shè)計引物并進(jìn)行PCR擴(kuò)增。從中選取結(jié)核桿菌保護(hù)性抗原基因MPT-64，構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-32a-MPT-64，并通過原核細(xì)胞對重組質(zhì)粒進(jìn)行表達(dá)，從而獲取融合蛋白... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 結(jié)核病新疫苗的研究進(jìn)展
        1.1.1 現(xiàn)階段 BCG 在抗結(jié)核病過程中的缺陷
        1.1.2 新疫苗的研發(fā)現(xiàn)狀
        1.1.3 目前新疫苗研究存在的問題[14]
    1.2 microRNA 在疾病診斷方面的應(yīng)用
        1.2.1 血清 microRNA 在疾病診斷方面的應(yīng)用
        1.2.2 血漿 miRNA 在疾病診斷中的應(yīng)用
        1.2.3 microRNA 在結(jié)核病診斷方面的應(yīng)用
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    2.1 結(jié)核分枝桿菌部分保護(hù)性基因的克隆
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
        2.1.3 結(jié)果與分析
    2.2 結(jié)核分枝桿菌保護(hù)性基因 MPT64 在大腸桿菌中的表達(dá)
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
        2.2.3 結(jié)果與分析
第三章 討論
    3.1 結(jié)核桿菌抗原保護(hù)性基因的選擇
    3.2 載體的選擇及誘導(dǎo)條件優(yōu)化
    3.3 microRNA 在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血漿miR-122作為藥源性肝損傷生物標(biāo)志物的研究及應(yīng)用[J]. 湯納平,王雁,馬璟.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2013(03)
[2]microRNA-183家族的表達(dá)在肝細(xì)胞癌臨床診斷中的價值[J]. 邱歷偉,吳瑋,賽文莉,楊君伶,張海健,顧星,時運(yùn),陸少林,姚登福.  世界華人消化雜志. 2013(16)
[3]Micro-RNA-122在不同時期慢性乙肝患者外周血漿中表達(dá)變化的研究[J]. 李祥云,陳兆軍,潘峰,劉玉華,黃玲玲,樓洪萍.  中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2013(04)
[4]對研發(fā)新型結(jié)核病疫苗的分析和展望[J]. 王秉翔.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2012(02)
[5]牛結(jié)核病疫苗的最新研究進(jìn)展[J]. 阿曼古麗·加孜,古麗娜爾·沙哈巴.  新疆畜牧業(yè). 2012(02)
[6]血清miR-375水平可能是胃遠(yuǎn)端腺癌的標(biāo)志物[J]. 張文輝,桂俊豪,王昌正,常青,吳本儼.  中華保健醫(yī)學(xué)雜志. 2011(05)
[7]四種方法對肺結(jié)核診斷價值的研究分析[J]. 孫文芹,呂建曉,李桂蘭.  中國實(shí)用醫(yī)藥. 2011(04)
[8]牛分枝桿菌mpb51-63融合基因的克隆及其原核表達(dá)[J]. 李璐璐,王春芳,任飛,劉新宇,寧浩然,劉磊,李冰潔,姜秀云,何昭陽.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2010(11)
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博士論文
[1]乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌FFPE組織及血清中microRNA表達(dá)及其與肝癌預(yù)后的研究[D]. 朱海濤.復(fù)旦大學(xué) 2011
[2]miRNA-375在胃癌中的功能及作用機(jī)制[D]. 徐艷珺.浙江大學(xué) 2011

碩士論文
[1]5種血清microRNA作為胃癌診斷標(biāo)志物的研究[D]. 李構(gòu).南京大學(xué) 2012



本文編號：2956756