性別控制和鑒定技術作為社會發(fā)展中最有應用價值的成就之一,對人類和動物尤其是家畜的育種和生產(chǎn)有著深遠的意義。精子流式分選和PCR擴增是目前用于性別控制和鑒定技術最為高效、主流和成熟的兩種方法。但是這兩種方法在實踐應用中都存在一些無法避免的技術壁壘和不足,如精子分選速度滿足不了需求、造成精子損傷等,以及PCR擴增需要樣品的采集,特別是胚胎PCR活檢容易引起胚胎污染,造成胚胎損傷,甚至死亡。探求一種無損的、非侵入性的、快速的胚胎性別鑒定方法,補充現(xiàn)有的性別控制和鑒定方法體系是必要的。本實驗利用拉曼光譜技術通過對豬ICSI胚胎和牛IVF胚胎培養(yǎng)液進行分析,并利用PCR擴增鑒定其對應胚胎的性別,基于這些數(shù)據(jù)構建基于培養(yǎng)液拉曼光譜二值分類模型,為無損的、快速胚胎性別鑒定方法進行探索性研究。本研究主要內容如下。1、機械損傷對豬孤雌胚胎發(fā)育代謝的影響本研究選擇豬ICSI胚胎培養(yǎng)液的代謝組學構建無損胚胎性別鑒定模型,為避免不同的顯微操作對后續(xù)豬ICSI胚胎性別鑒定建模的干擾。首先利用顯微操作儀制作了三個實驗組包含不同機械損傷的孤雌胚胎,利用拉曼光譜技術分析了這三組胚胎培養(yǎng)液的代謝指紋。結果發(fā)現(xiàn)（1）第二... 

【文章來源】：廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

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【學位級別】：博士

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圖１－１?ＸＯ轉基因小鼠構建示意圖（摘自Ｖｅｒｎｅｔ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?Ｙ?ｇｅｎｅ?ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｓ?ｏｆＸＯ?ｍａｌｅ?ｍｉｃｅ．??

圖２－?１豬嚢胚Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２熒光染色??ｉｇ．?２－１?Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｐｉｇ?ｂｌａｓｔ

量的７％ＰＶＰ；第三組是在第二組的操作后，再連續(xù)吹吸３次。處理后的三組卵母細胞??分別進行相同參數(shù)的孤雌電激活，第二天觀察并記錄胚胎的卵裂情況，第７天觀察統(tǒng)計??囊胚率。胚胎的發(fā)育形態(tài)（圖２＿１）來看，無機械損傷的孤雌胚胎更大，感覺生命力更??強盛，其它兩組囊胚的直徑較小，究其原因應該是因為透明帶破裂，細胞容易孵化到透??明帶外，而不需要費力撐開透明帶。??２３??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]消除拉曼光譜熒光背景的新方法及其應用[J]. 高國明,李雪,覃宗定,魏坤蓮,黃漢明,劉軍賢,姚輝璐.  光學學報. 2013(02)
[2]支持向量機理論與算法研究綜述[J]. 丁世飛,齊丙娟,譚紅艷.  電子科技大學學報. 2011(01)
[3]精子不同處理和胰島素不同濃度對豬卵母細胞胞質內單精子顯微受精的影響[J]. 羅龍興,盧晟盛,許丹娜,盧克煥.  中國獸醫(yī)學報. 2009(05)
[4]表面增強拉曼散射增強機理的部分研究進展[J]. 丁松園,吳德印,楊志林,任斌,徐昕,田中群.  高等學�；瘜W學報. 2008(12)
[5]Raman spectroscopic study on structure of human immunodeficiency virus （HIV） and hypericin-induced photosen- sitive damage of HIV[J]. XU Yiming & LU Chuanzong Laboratory of Visual Information Processing,Institute of Biophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(02)
[6]毛冠鹿ZFY、ZFX基因片段的克隆與性別鑒定[J]. 蔣華云,曹祥榮,張錫然,胡均,徐春茂.  遺傳. 2004(04)
[7]Raman spectroscopic study of space structure of membrane proteins and membrane lipids in photodamaged human erythrocyte sensitized by hypocrellin B[J]. 許以明,楊紅英,張志義.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 1998(06)
[8]Raman spectroscopic study of DNA after photosensitive damage caused by hypocrellins A and B[J]. 許以明,張志義,張洪雨.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 1998(04)
[9]Sexing Bovine Embryos Using PCR Amplification of Bovine SRY Sequence[J]. 曾溢滔,張美蘭,陳美玨,周霞娣,黃英,任兆瑞,黃淑幀,胡明信,吳學清,高建明,張斌,徐慧如.  Science in China,Ser.B. 1994(02)

博士論文
[1]表面增強拉曼散射化學增強機理的研究及其應用[D]. 紀偉.吉林大學 2013



本文編號：2954666