性別控制和鑒定技術(shù)作為社會發(fā)展中最有應(yīng)用價值的成就之一,對人類和動物尤其是家畜的育種和生產(chǎn)有著深遠的意義。精子流式分選和PCR擴增是目前用于性別控制和鑒定技術(shù)最為高效、主流和成熟的兩種方法。但是這兩種方法在實踐應(yīng)用中都存在一些無法避免的技術(shù)壁壘和不足,如精子分選速度滿足不了需求、造成精子損傷等,以及PCR擴增需要樣品的采集,特別是胚胎PCR活檢容易引起胚胎污染,造成胚胎損傷,甚至死亡。探求一種無損的、非侵入性的、快速的胚胎性別鑒定方法,補充現(xiàn)有的性別控制和鑒定方法體系是必要的。本實驗利用拉曼光譜技術(shù)通過對豬ICSI胚胎和牛IVF胚胎培養(yǎng)液進行分析,并利用PCR擴增鑒定其對應(yīng)胚胎的性別,基于這些數(shù)據(jù)構(gòu)建基于培養(yǎng)液拉曼光譜二值分類模型,為無損的、快速胚胎性別鑒定方法進行探索性研究。本研究主要內(nèi)容如下。1、機械損傷對豬孤雌胚胎發(fā)育代謝的影響本研究選擇豬ICSI胚胎培養(yǎng)液的代謝組學(xué)構(gòu)建無損胚胎性別鑒定模型,為避免不同的顯微操作對后續(xù)豬ICSI胚胎性別鑒定建模的干擾。首先利用顯微操作儀制作了三個實驗組包含不同機械損傷的孤雌胚胎,利用拉曼光譜技術(shù)分析了這三組胚胎培養(yǎng)液的代謝指紋。結(jié)果發(fā)現(xiàn)（1）第二... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ＸＯ轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建示意圖（摘自Ｖｅｒｎｅｔ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?Ｙ?ｇｅｎｅ?ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｓ?ｏｆＸＯ?ｍａｌｅ?ｍｉｃｅ．??

圖２－?１豬嚢胚Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２熒光染色??ｉｇ．?２－１?Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｐｉｇ?ｂｌａｓｔ

量的７％ＰＶＰ；第三組是在第二組的操作后，再連續(xù)吹吸３次。處理后的三組卵母細(xì)胞??分別進行相同參數(shù)的孤雌電激活，第二天觀察并記錄胚胎的卵裂情況，第７天觀察統(tǒng)計??囊胚率。胚胎的發(fā)育形態(tài)（圖２＿１）來看，無機械損傷的孤雌胚胎更大，感覺生命力更??強盛，其它兩組囊胚的直徑較小，究其原因應(yīng)該是因為透明帶破裂，細(xì)胞容易孵化到透??明帶外，而不需要費力撐開透明帶。??２３??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]表面增強拉曼散射化學(xué)增強機理的研究及其應(yīng)用[D]. 紀(jì)偉.吉林大學(xué) 2013



本文編號：2954666