發(fā)布時間：2017-04-09 11:26

  本文關(guān)鍵詞：γ-干擾素對仔豬耳廓微循環(huán)相關(guān)因子蛋白質(zhì)組學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：微循環(huán)障礙是疾病的一個重要表現(xiàn)。眾多醫(yī)學(xué)相關(guān)報道以鼠兔為動物模型研究微循環(huán)障礙的成因。但目前尚未見有關(guān)豬耳廓微循環(huán)障礙形成機理的研究報道。IFN-γ作為重要的前炎性因子,在微循環(huán)障礙發(fā)展過程中扮演著重要的角色。本實驗以仔豬耳廓為研究對象,應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法,探討了γ-干擾素對豬耳微循環(huán)相關(guān)因子變化的影響。方法:(1)對仔豬耳尖靜脈分別注射IFN-γ或等體積的生理鹽水,取耳尖組織,采用iTRAQ蛋白質(zhì)組學(xué)方法,分析其蛋白質(zhì)組學(xué)差異;(2)根據(jù)蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果,對其中表達差異明顯的蛋白質(zhì)用免疫組織化學(xué)方法確定其在組織中的定位,并對蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果進行驗證。結(jié)果:(1)在2組樣品中共同鑒定到蛋白質(zhì)2444種,其中122種蛋白質(zhì)在實驗組中表現(xiàn)為顯著的表達上調(diào),102種蛋白質(zhì)表現(xiàn)為顯著下調(diào);(2)2組樣品間的差異蛋白在機體內(nèi)執(zhí)行的主要功能是血小板激活、脫氧核糖核酸酶活性調(diào)控和多細胞生物過程的正調(diào)控;(3)差異表達蛋白中顯著富集的KEGG通路是植物病原菌互作過程、補體和凝血級聯(lián)反應(yīng)和NOD樣受體信號通路。(4)內(nèi)皮型一氧化氮合酶、誘導(dǎo)型一氧化氮定位在血管及毛囊的毛細血管網(wǎng)上,核因子-κB定位在毛囊的內(nèi)根鞘和外根鞘,蛋白激酶C則定位在周圍疏松結(jié)締組織中;免疫組化結(jié)果與蛋白組學(xué)結(jié)果相符。本研究揭示了IFN-γ對豬耳廓微循環(huán)作用的可能機制,為后續(xù)研究豬耳廓微循環(huán)障礙形成機理提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：γ-干擾素 微循環(huán) 蛋白質(zhì)組學(xué) 蛋白激酶C 核因子-κB
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S858.28
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 1 前言9-16
• 1.1 微循環(huán)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能9-10
• 1.2 IFN-γ的研究進展10-13
• 1.2.1 IFN-γ的產(chǎn)生10-11
• 1.2.2 IFN-γ受體和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)11-12
• 1.2.3 IFN-γ的生物活性12-13
• 1.3 微循環(huán)相關(guān)因子13-14
• 1.3.1 NF-κB與微循環(huán)的關(guān)系13
• 1.3.2 PKC與微循環(huán)的關(guān)系13-14
• 1.3.3 NOS與微循環(huán)的關(guān)系14
• 1.4 基于iTRAQ的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)14-15
• 1.5 研究目的與意義15-16
• 2 材料與方法16-23
• 2.1 組織樣品16
• 2.2 主要試劑16-17
• 2.3 主要儀器17
• 2.4 蛋白質(zhì)組學(xué)檢測17-22
• 2.4.1 組織總蛋白提取17-18
• 2.4.2 BCA法測定蛋白質(zhì)濃度18
• 2.4.3 SDS-PAGE18-19
• 2.4.4 還原烷基化和酶解19
• 2.4.5 iTRAQ標(biāo)記19-20
• 2.4.6 高pH UPLC第一維分離20-21
• 2.4.7 液相串聯(lián)質(zhì)譜21
• 2.4.8 搜庫21-22
• 2.5 HE染色22
• 2.6 免疫組織化學(xué)22-23
• 2.6.1 免疫組化染色22-23
• 2.6.2 免疫組化結(jié)果判斷23
• 2.7 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計23
• 3 結(jié)果與分析23-38
• 3.1 蛋白質(zhì)濃度測定23-24
• 3.2 蛋白質(zhì)譜鑒定及表達差異分析24-29
• 3.3 蛋白質(zhì)功能聚類分析29-31
• 3.4 KEGG注釋通路分析31-32
• 3.5 差異蛋白GO分析32-35
• 3.6 差異蛋白KEGG注釋通路分析35
• 3.7 HE染色35
• 3.8 免疫組化結(jié)果35-38
• 4 討論38-44
• 4.1 耳尖組織中的總蛋白38-40
• 4.2 差異蛋白功能和通路分析40-42
• 4.3 免疫組化結(jié)果42-43
• 4.4 進一步工作建議43-44
• 全文總結(jié)44-45
• 致謝45-46
• 參考文獻46-54
• 附錄54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 楊麗華;蘇瑩;胡萬芹;;核因子kappa B與卵巢上皮癌血管生成及復(fù)發(fā)的關(guān)系研究[J];中國醫(yī)藥指南;2013年09期

2 羅麗珊;孫嘉;;微循環(huán)障礙相關(guān)細胞信號通路的研究進展[J];微循環(huán)學(xué)雜志;2013年01期

3 鮮盡紅;何莉;汪正清;;補體級聯(lián)反應(yīng)在腦缺血/再灌注炎癥損傷中的作用[J];創(chuàng)傷外科雜志;2011年06期

4 夏倫斌;王新華;連宏軍;薄新文;鐘發(fā)剛;;γ干擾素及其在動物疾病防控中的應(yīng)用[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2007年05期

5 王汝琨;林慧芳;;410例健康人甲皺微循環(huán)觀察[J];河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1978年04期

  本文關(guān)鍵詞：γ-干擾素對仔豬耳廓微循環(huán)相關(guān)因子蛋白質(zhì)組學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：295176