乳腺炎是世界公認的奶牛三大疾病之一,每年乳腺炎都會造成奶牛產(chǎn)業(yè)巨大的經(jīng)濟損失,乳腺炎會引起奶牛產(chǎn)奶量下降和奶品質(zhì)降低,但是目前國內(nèi)外的研究多集中在乳腺炎的治療和抗炎藥物的篩選,忽略了乳腺炎發(fā)生后奶牛的泌乳問題,因此如何恢復奶牛泌乳成為乳腺炎治療的關(guān)鍵問題之一。有研究表明細胞因子信號抑制物3（Suppressor of Cytokine Signaling,SOCS3）能夠抑制JAK2-STAT5信號通路,而催乳素（Prolactin,PRL）主要通過激活JAK2-STAT5信號通路發(fā)揮促進泌乳的功能。那么PRL和SOCS3是否具有相互調(diào)節(jié)的作用機制呢。本試驗通過分離和培養(yǎng)原代乳腺上皮細胞（Bovine mammary Epithelial Cells,BMEC）,構(gòu)建脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）誘導的BMEC炎癥模型,并在此炎癥模型的基礎上開展后續(xù)試驗研究,探討PRL和SOCS3在BMEC中的相互作用。試驗內(nèi)容:為明確LPS、PRL及SOCS3的最適處理濃度,試驗分別以不同濃度的LPS、PRL及SOCS3處理細胞,利用熒光定量PCR法檢測相關(guān)細胞因子mRNA... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學黑龍江省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

奶牛乳腺上皮細胞的原代培養(yǎng)(100×)

視野中的成纖維細胞幾乎消失不見，視野中都是大片的乳腺上皮細胞（圖3-2B）。然后我們又進行了第三次純化，純化結(jié)果表明成纖維細胞完全消失不見，BMEC 能夠密集的生長，并符合后續(xù)傳代條件（圖 3-2C）。

圖 3-2 奶牛乳腺上皮細胞的分離純化(40×)Fig 3-2 Isolation and purification of mammary epithelial cells from dairy cows (40×)(A)：第一次純化的結(jié)果；(B)：第二次純化的結(jié)果；(C)：第三次純化的結(jié)果。(A) : The results of the purification of the first time; (B): The results of second purification ; (C): The resultof third purification.注：同 3-1。Note: The same as 3-1.3.1.3 奶牛乳腺上皮細胞的鑒定使用 CK-18 對乳腺上皮細胞進行染色，在普通光學顯微鏡下可觀察到乳腺上皮細胞的態(tài) 3-3A；進而使用 DAPI 進行細胞染色結(jié)果如圖 3-3B；使用綠色熒光染料標記了 CK-18（3-3C）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]多巴胺通過mTOR-EAAT2通路影響星形膠質(zhì)細胞谷氨酸攝取能力[J]. 溫芳芳,徐竹,劉樂平,楊建靜,丁賽丹.  中國病理生理雜志. 2017(10)
[2]兒童急性淋巴細胞白血病SOCS3 mRNA的表達水平與臨床特點、早期治療反應的相關(guān)性[J]. 吳正玉,王寧玲,劉亢亢,儲金華,汪燕,楊林海,謝志偉.  中國實驗血液學雜志. 2017(05)



本文編號：2926107