發(fā)布時間：2020-12-16 07:17

　　隨著養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,大型規(guī)模化養(yǎng)殖場增多,飼養(yǎng)密集,在此條件下,豬群免疫力下降,應(yīng)激因素增多。導(dǎo)致主要寄居于上呼吸道中的機會致病性鏈球菌發(fā)病率逐年上升,對養(yǎng)豬廠造成了嚴重的經(jīng)濟損失。尤其是1998年和2005年新出現(xiàn)的由豬鏈球菌2型導(dǎo)致的中毒休克綜合癥（STSS）,更是對人類的生命安全構(gòu)成嚴重威脅。SS2致病性較強,若發(fā)現(xiàn)不及時,后期即使給予大量抗生素治療,亦不能避免癱瘓、耳聾、失明、運動失調(diào)等嚴重的神經(jīng)性后遺癥的發(fā)生,最終只能作為殘豬淘汰。由于傳統(tǒng)的檢測方法,PCR技術(shù)、血清學(xué)、生化反應(yīng)和免疫學(xué)手段等,大多數(shù)耗時較長,且對儀器設(shè)備的要求較高,而鏈球菌有35個血清型,導(dǎo)致在用傳統(tǒng)方法檢測的時候造成試劑與耗材的大量消耗,且傳統(tǒng)檢測方法,如PCR等,所需儀器價格普遍較貴,操作也繁瑣,不利于在基層推廣應(yīng)用。LAMP（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技術(shù)能夠克服上述傳統(tǒng)檢測儀器昂貴,耗時較長的缺點,且檢測快速準確,能夠在基層推廣應(yīng)用。本次試驗根據(jù)LAMP原理,通過NCBI查找豬鏈球菌2型毒力因子保守序列設(shè)計兩種引物。溶菌酶釋放蛋白（Mu... 

【文章來源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

豬鏈球菌革蘭氏染色鏡檢結(jié)果(40x100)

圖 2-2 LAMP 反應(yīng)引物比的優(yōu)化結(jié)果Fig. 2-2 Optimization results of LAMP primer ratioNA Marker； 1~7：引物比分別為 1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、S2J 毒力因子下引物比優(yōu)化結(jié)果如圖 2-3 所示，當(dāng)引物比為 1:1 時出現(xiàn)梯狀條帶，在繼續(xù)增大內(nèi)引物濃度，條帶無明顯變化，因此選定 內(nèi)引物比。

圖 2-2 LAMP 反應(yīng)引物比的優(yōu)化結(jié)果Fig. 2-2 Optimization results of LAMP primer ratio Marker； 1~7：引物比分別為 1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:J 毒力因子下引物比優(yōu)化結(jié)果圖 2-3 所示，當(dāng)引物比為 1:1 時出現(xiàn)梯狀條帶，在引續(xù)增大內(nèi)引物濃度，條帶無明顯變化，因此選定 1：引物比。


本文編號：2919763