發(fā)布時間：2020-12-12 18:42

　　目的為了獲得四黃止痢復(fù)方中藥提取物（Extract from compound Chinese medicine Sihuangzhili,ECCS）、獲悉ECCS抗禽致病性大腸桿菌（Avian pathogenic Escherichia coli,APEC）作用機制及其治療效果,本研究開展了建立ECCS多組分HPLC檢測方法、優(yōu)化其制備工藝參數(shù)、研究其體外抗APEC-O₂的活性、對毒力基因的影響及體內(nèi)治療效果系列實驗,為ECCS的進一步的研究提供實驗依據(jù)。方法以四黃止痢復(fù)方中藥（黃芩、黃柏、大黃、黃連、板藍根、甘草）為原料,甲醇為提取溶劑,用浸漬法提取,設(shè)計浸漬溫度、浸漬時間、液料比、甲醇體積分數(shù)4個因素為自變量,黃芩苷、鹽酸小檗堿含量及干膏率綜合評分為因變量,采用高效液相色譜法（HPLC）測定含量。以單因素試驗結(jié)果為基礎(chǔ),用Design-expert軟件設(shè)計三因素三水平,響應(yīng)面法建立數(shù)學模型,得到最優(yōu)制備工藝參數(shù),制備ECCS;利用肉湯二倍稀釋法測定ECCS對APEC-O₂菌的最小抑菌濃度（MIC）;吸光光度法檢測ECCS對細菌生長曲線... 

【文章來源】：錦州醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

專屬性試驗色譜圖

圖 2 鹽酸小檗堿、黃芩苷標準曲線（三）單因素實驗由圖 3a 所示，綜合評分在溫度為 25℃時達到峰值，但隨浸漬溫度的不斷升高，綜合評分也逐漸下降，到 100℃時達到最低，所以最佳浸漬溫度選為 25℃。由圖 3b 所示，綜合評分從 30 min 到 120 min 時顯著升高，120 min 時到達最大值，超過 120 min 時開始降低�？赡苁请S著浸漬時間的增加，鹽酸小檗堿和黃芩苷中的水溶性雜質(zhì)的溶出增加，將有效成分分子包裹起來，阻止其擴散，導致其提取率下降。為了試驗精確，選取綜合評分最高點 120 min 以及其兩側(cè) 90 min 和150 min 三個水平進行響應(yīng)面優(yōu)化試驗。由圖 3c 可知，料液比在 1:200 至 1:250 時，綜合評分顯著提高，但在 1:250到 1:350 時升高緩慢，當料液比超過 1:350 后綜合評分開始降低。可能是料液比較小時，黃芩苷、鹽酸小檗堿不能完全溶出，達到一定料液比后完全溶出，但若

圖 3 單因素實驗結(jié)果圖注：浸漬溫度（a）、浸漬時間（b）、料液比（c）、甲醇體積分數(shù)（d）對綜合評分的影響（四）響應(yīng)面法優(yōu)化1、響應(yīng)面優(yōu)化試驗設(shè)計根據(jù)單因素試驗結(jié)果，將浸漬溫度固定為 25℃，其它因素選取合適的水平，展開響應(yīng)面試驗。具體因素水平見表 13。表 13 響應(yīng)面分析因素水平因素 浸漬時間（A）/min 甲醇體積分數(shù)（B）/% 料液比（C）/（g/mL）-1 90 65 1︰3000 120 75 1︰3501 150 85 1︰400

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：2913082