奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖過(guò)程中的常見(jiàn)疾病之一,并且在有奶牛飼養(yǎng)的地區(qū)均有此病的發(fā)生。該病的發(fā)生與飼養(yǎng)管理和環(huán)境因素密切相關(guān),一旦發(fā)病,難以控制其傳播或從根本上消除。本研究根據(jù)河北DHI數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)奶牛體細(xì)胞水平,對(duì)邯鄲、衡水、石家莊、滄州、保定、廊坊、張家口等七個(gè)地區(qū)規(guī)�；膛ｐB(yǎng)殖場(chǎng)采集的175份奶樣進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)、形態(tài)觀察、生化試驗(yàn)等,從而對(duì)所分離的細(xì)菌進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示,從175份奶樣中分離出了4種主要致病菌。其中,金黃色葡萄球菌有93株,占53.1%;無(wú)乳鏈球菌有85株,占48.6%;大腸桿菌共112株,占64%;綠膿桿菌共28株,占16%。在檢出的奶樣中大部分表現(xiàn)為金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌和大腸桿菌的混合感染,并且檢出的28株綠膿桿菌均是由張家口地區(qū)和石家莊地區(qū)的奶樣中分離得到,且其中的12株為單獨(dú)感染。本試驗(yàn)根據(jù)引起奶牛乳房炎主要致病菌金黃色葡萄球菌的nuc基因、無(wú)乳鏈球菌的ef-tu基因、大腸桿菌的phoA基因和綠膿桿菌的eta基因保守序列設(shè)計(jì)并合成4對(duì)特異性引物,所擴(kuò)增目的片段的大小分別為920bp、515bp、268bp和126bp。通過(guò)對(duì)四種細(xì)菌的單一PCR檢測(cè)法進(jìn)行退火... 

【文章來(lái)源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基Figure3MacconkeyAgarmedium

3 結(jié)果與分析3.1 病原菌的分離鑒定3.1.1 病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果從 175 份奶樣中分離出 4 種主要致病菌。其中金黃色葡萄球菌 93 株，占 53.1%；無(wú)乳鏈球菌 85 株，占 48.6%；大腸桿菌 112 株，占 64%；綠膿桿菌 28 株，占 16%。將初步鑒定的疑似金黃色葡萄球菌的菌液接種于甘露醇高鹽瓊脂和 B-P 瓊脂上，在甘露醇高鹽瓊脂上可見(jiàn)金黃色葡萄球菌由于能夠利用甘露醇產(chǎn)酸使酚紅由紅色變?yōu)辄S色；在 B-P 瓊脂培養(yǎng)基上可見(jiàn)有黑色菌落生長(zhǎng)且菌落周?chē)袦啙釒�；將疑似大腸桿菌的菌液接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)有粉紅色菌落生長(zhǎng)，同時(shí)將菌液接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)菌落有金屬光澤；將疑似無(wú)乳鏈球菌的菌液接種于血瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)乳白色、圓形的小菌落；而綠膿桿菌在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，形成綠色的菌落。結(jié)果見(jiàn)圖 1、2、3、4、5、6。

3 結(jié)果與分析3.1 病原菌的分離鑒定3.1.1 病原菌分離培養(yǎng)結(jié)果從 175 份奶樣中分離出 4 種主要致病菌。其中金黃色葡萄球菌 93 株，占 53.1%；無(wú)乳鏈球菌 85 株，占 48.6%；大腸桿菌 112 株，占 64%；綠膿桿菌 28 株，占 16%。將初步鑒定的疑似金黃色葡萄球菌的菌液接種于甘露醇高鹽瓊脂和 B-P 瓊脂上，在甘露醇高鹽瓊脂上可見(jiàn)金黃色葡萄球菌由于能夠利用甘露醇產(chǎn)酸使酚紅由紅色變?yōu)辄S色；在 B-P 瓊脂培養(yǎng)基上可見(jiàn)有黑色菌落生長(zhǎng)且菌落周?chē)袦啙釒�；將疑似大腸桿菌的菌液接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)有粉紅色菌落生長(zhǎng)，同時(shí)將菌液接種于伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)菌落有金屬光澤；將疑似無(wú)乳鏈球菌的菌液接種于血瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)乳白色、圓形的小菌落；而綠膿桿菌在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，形成綠色的菌落。結(jié)果見(jiàn)圖 1、2、3、4、5、6。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]山東某規(guī)�；膛�(chǎng)乳房炎流行病學(xué)調(diào)查[D]. 韓書(shū)娟.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]奶山羊乳房炎病原菌分離鑒定及多重PCR檢測(cè)方法建立[D]. 謝曉艷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
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[6]多重PCR檢測(cè)牛肉中沙門(mén)氏菌、單增李斯特菌和大腸桿菌O157：H7的研究[D]. 宋東曉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]奶牛鏈球菌性乳房炎可視化LAMP檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[D]. 賀婷.廣西大學(xué) 2014
[8]奶牛乳房炎致病菌分離鑒定及快速診斷試劑盒的研發(fā)與應(yīng)用[D]. 陳亞明.廣西大學(xué) 2014
[9]六種牛源致病性細(xì)菌多重PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 劉曉丹.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[10]奶牛乳房炎病原菌分離鑒定及其多重PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 聶培.廣西大學(xué) 2013



本文編號(hào)：2912235