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荷包豬SLA-2/肽四聚體構(gòu)建與功能檢測

發(fā)布時間:2020-12-04 14:21
  主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex,MHC)是一種存在于脊椎動物中的由一個龐大的基因家族編碼的細胞表面分子,其產(chǎn)物是參與抗原提呈和T細胞激活的關(guān)鍵分子。不同種屬動物的MHC及其編碼的抗原系列有不同的命名,豬的MHC分子又叫做豬白細胞抗原(SLA)。MHC-I四聚體可以對抗原特異性細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)進行檢測和篩選,已作為研究機體細胞免疫功能、評價特異性免疫治療和探究疾病機理的重要工具。本研究中,首先亞克隆六個品系SLA-2-BSP(重鏈)胞外區(qū)以及一類sβ2m(輕鏈)成熟肽基因。包括三個國外品系長白豬(YC)、大約克豬(DCY)、托佩克豬(TPK),三個國內(nèi)地方品系荷包豬(HB)、萊蕪黑豬(LWH)和煙臺黑豬(YTH)。隨后,分別采用pET-21a(+)/E.coli或pET-28a(+)/E.coli表達系分別高效表達SLA-2-BSP和sβ2m重組蛋白,并對重組蛋白進行純化。通過生物信息學(xué)的方法,預(yù)測和合成豬口蹄疫病毒VP1和RNA聚合酶3D中的T細胞表位多肽,通過ELISPOT方... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

荷包豬SLA-2/肽四聚體構(gòu)建與功能檢測


MHC-肽四聚體的結(jié)構(gòu)

結(jié)構(gòu)圖,結(jié)構(gòu)圖


MHCII-肽四聚體的結(jié)構(gòu)圖

品系,成熟肽,基因


PCR擴增六品系豬SLA-2-BSP成熟肽基因

【參考文獻】:
期刊論文
[1]應(yīng)用四聚體技術(shù)檢測肺結(jié)核患者外周血及病變組織C5特異性CD4+T細胞[J]. 鄧向斌,黃利榮,謝丹,李研,劉志輝,賴小敏,譚守勇.  實用醫(yī)學(xué)雜志. 2012(13)
[2]應(yīng)用E7多肽/HLA-DR8四聚體監(jiān)測治療前后肺結(jié)核患者外周血多肽特異性CD4+ T細胞的變化[J]. 黎意芬,黃利榮,劉國標,方毅敏,李研,彭毅,賴小敏.  中國防癆雜志. 2011(07)
[3]湖南沙子嶺豬SLA-DR基因克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 唐醫(yī)亞,邢曉為,薛立群,黃生強,王維.  遺傳. 2007(12)
[4]雞MHCIα-生物素化序列融合基因的構(gòu)建、表達及純化[J]. 劉光亮,童鐵鋼,王群,肖一紅,孟慶文,吳東來.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2006(05)
[5]四聚體技術(shù)檢測原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血循環(huán)中抗原特異性T細胞[J]. 劉海英,張建,鄧安梅,耿紅蓮,周琳,朱燁,徐德興,仲人前.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(01)
[6]BirA酶基因表達載體的構(gòu)建、原核表達及表達產(chǎn)物的活性鑒定[J]. 李青,吳雄文,熊敏,翁秀芳,盧小玲,梁智輝,龔非力.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2005(05)
[7]加載HCMV抗原肽的HLA-A*0201單體及其四聚體制備和鑒定[J]. 何賢輝,徐麗慧,劉毅,蔡小嫦,曾耀英.  生物工程學(xué)報. 2004(03)



本文編號:2897755

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