為了解2017-2018中國(guó)H5亞型禽流感病毒在我國(guó)的流行狀況和生物學(xué)特性,本研究從2017-2018年全國(guó)范圍內(nèi)禽流感病毒流行病學(xué)監(jiān)測(cè)過程中根據(jù)HA、NA基因進(jìn)化關(guān)系差異以及不同毒株的分離地點(diǎn)、時(shí)間和宿主差異篩選出24株代表性病毒進(jìn)行全基因組的遺傳演化分析和抗原性分析。在以上分析結(jié)果基礎(chǔ)上,進(jìn)一步選擇出18株病毒進(jìn)行BALB/c小鼠的感染性實(shí)驗(yàn)以及9株病毒展開受體結(jié)合特性分析。通過分析24株病毒的表面基因遺傳進(jìn)化情況發(fā)現(xiàn),一株分離自浙江省的野鳥源毒株為H5N3亞型,屬低致病性AIV;19株病毒為H5N6亞型,此外還有4株病毒為H5N1亞型,且HA裂解位點(diǎn)處均含有5個(gè)連續(xù)堿性氨基酸,屬高致病性AIV。2.3.4.4分支病毒仍為2017-2018年我國(guó)H5亞型AIV的優(yōu)勢(shì)毒株,在該分支內(nèi)根據(jù)核苷酸96%的同源性差異為一個(gè)新分支為依據(jù),在該分支病毒可進(jìn)一步劃分為2.3.4.4.a、b、c、d四個(gè)小分支,這其中又以2.3.4.4.d分支的分離量最大。綜合分析病毒各個(gè)基因的遺傳進(jìn)化關(guān)系差異,24株病毒可劃分為16個(gè)不同的基因型,大部分病毒的內(nèi)部基因來源于2013年后H5N6亞型AIV,部分病毒內(nèi)部基因來源廣泛,和其他亞型AIV存在基因重排的現(xiàn)象。通過對(duì)24株病毒的抗原性分析可以得到,我國(guó)當(dāng)前優(yōu)勢(shì)毒株與最近使用的的Re-8疫苗種毒抗血清反應(yīng)性較差,存在明顯的抗原性差異,表明在當(dāng)前傳播的優(yōu)勢(shì)毒株抗原性變化明顯。通過對(duì)2017年以來監(jiān)測(cè)到的優(yōu)勢(shì)毒株的遺傳進(jìn)化以及抗原性差異等綜合分析,篩選到一株與2018年后2.3.4.4分支內(nèi)絕大部分病毒交叉反應(yīng)性良好的病毒用于構(gòu)建新的候選疫苗毒株,用于新毒株的防控。以10~6EID_(50)/50μL的劑量鼻腔感染BALB/c小鼠,18株病毒均不需提前適應(yīng)即可在小鼠哺乳動(dòng)物模型體內(nèi)復(fù)制;不同劑量感染小鼠發(fā)現(xiàn),這18株病毒對(duì)小鼠的致病性分別呈現(xiàn)高、中、低三種不同水平。對(duì)9株病毒的受體結(jié)合特性分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),4株病毒只具備強(qiáng)α-2,3受體結(jié)合特性,3株病毒具備強(qiáng)α-2,3受體結(jié)合特性和微弱或中等的α-2,6受體結(jié)合特性,2株病毒已經(jīng)具備了一定的結(jié)合α-2,6受體的能力。綜上所述,在2017-2018年間我國(guó)家禽H5亞型禽流感病毒在傳播過程中病毒抗原性發(fā)生顯著變化,病毒基因來源多樣,存在多種進(jìn)化來源的病毒;病毒的生物學(xué)特性表型多樣,部分毒株對(duì)哺乳動(dòng)物存在較強(qiáng)感染風(fēng)險(xiǎn)。
【學(xué)位單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S852.65
【部分圖文】：

基于HA基因繪制的遺傳進(jìn)化樹

基于N1基因繪制的遺傳進(jìn)化樹

圖 2.2 基于 N1 基因繪制的遺傳進(jìn)化樹Fig2.2 Phylogenetic tree of N1 gene of H5 avian influenza virus
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本文編號(hào)：2887717