本試驗(yàn)以海藻多糖為研究材料,探討海藻多糖替代抗生素對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腸道屏障功能的影響。試驗(yàn)選用240頭遺傳背景相似、初始體重為(6.79±0.04)kg的24日齡斷奶仔豬,根據(jù)隨機(jī)性原則,分成4個(gè)處理組,每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭仔豬。對(duì)照組在基礎(chǔ)飼糧中添加75 mg/kg金霉素,其它處理組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加200mg/kg、400 mg/kg和800 mg/kg海藻多糖,試驗(yàn)期共21 d。試驗(yàn)一:于試驗(yàn)第1 d和21 d仔豬空腹個(gè)體稱(chēng)重,并記錄各組的總耗料量。計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和腹瀉頻率。根據(jù)生長(zhǎng)性能和腹瀉頻率指標(biāo),選出處理效果相對(duì)較好一組海藻多糖組并進(jìn)一步作機(jī)理分析。試驗(yàn)第21 d上午8:00,在海藻多糖組與對(duì)照組的各重復(fù)中挑選一頭仔豬,空腹?fàn)顟B(tài)下前腔靜脈采血10 mL,置4℃離心機(jī)3000 r/min離心10 min分離血清備用待測(cè)。結(jié)果表明:1)與對(duì)照組相比,飼糧中添加400 mg/kg和800 mg/kg海藻多糖均能顯著提高仔豬日增重,并且顯著降低仔豬腹瀉頻率和料重比(P0.05)。400 mg/kg與800mg/kg海藻多糖組仔豬在生長(zhǎng)性能和腹瀉頻率上無(wú)顯著差異。2)與對(duì)照組相比,飼糧中添加400 mg/kg海藻多糖能顯著降低仔豬血清皮質(zhì)醇含量(P0.05),且有升高白蛋白含量的趨勢(shì)(P=0.052),但兩組血清總蛋白和球蛋白含量均差異不顯著(P0.05)。3)與對(duì)照組相比,飼糧中添加400mg/kg海藻多糖顯著提高了仔豬血清總抗氧化能力及SOD、GSH-Px、CAT活性(P0.05),并且有降低MDA的趨勢(shì)(P=0.064)。同時(shí)400mg/kg海藻多糖組仔豬血清C3、C4含量顯著升高(P0.05),且血清IgG有升高的趨勢(shì)(P=0.09);血清中促炎性因子IL-6、TNF-α含量顯著降低(P0.05),抗炎性因子IL-10含量顯著升高(P0.05)。試驗(yàn)二:試驗(yàn)第21 d,仔豬空腹?fàn)顟B(tài)下,在400 mg/kg海藻多糖組與對(duì)照組的各重復(fù)中挑選一頭仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血并分離血漿,測(cè)定血漿DAO和D-乳酸含量。隨后挑選一頭接近平均體重仔豬進(jìn)行屠宰,分離腸段,剪取仔豬十二指腸、空腸、回腸中段各3 cm,置于4%多聚甲醛中固定24 h以上,采用HE染色法制作常規(guī)石蠟切片,觀(guān)察仔豬小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明:1)與對(duì)照組相比,400 mg/kg海藻多糖組仔豬小腸絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度比值顯著升高(P0.05),但隱窩深度無(wú)顯著差異(P0.05)。2)飼糧中添加400 mg/kg海藻多糖能顯著降低仔豬血漿D-乳酸含量(P0.05),此外血漿DAO活性也降低了42.71%(P0.05)。試驗(yàn)三:試驗(yàn)第21 d,在400 mg/kg海藻多糖組與對(duì)照組的各重復(fù)中挑選一頭接近平均體重仔豬屠宰,分離腸段,立即用pH計(jì)測(cè)定食糜pH值。取盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物,-80℃冰箱保存,測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸。剪取空腸和回腸各5 cm,洗凈腸段,小心刮取小腸黏膜,置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?采用試劑盒測(cè)定腸道消化酶和抗氧化酶活性。結(jié)果表明:1)與對(duì)照組相比,400 mg/kg海藻多糖組仔豬盲腸內(nèi)丙酸含量顯著提高了32.41%(P0.05),乙酸、丁酸及總酸含量分別提高了15.76%、17.95%、18.81%(P0.05);400mg/kg海藻多糖組與對(duì)照組相比,仔豬結(jié)腸乙酸、丁酸及總酸含量分別提高了17.15%、31.55%、12.42%(P0.05);400 mg/kg海藻多糖組與對(duì)照組仔豬各腸段pH值無(wú)顯著差異(P0.05)。2)相較于對(duì)照組,400 mg/kg海藻多糖組仔豬空腸乳糖酶、麥芽糖酶活性顯著升高(P0.05),空腸蔗糖酶活性提高了20.44%(P0.05)。3)與對(duì)照組相比,400 mg/kg海藻多糖組仔豬空腸粘膜SOD、GSH-Px、CAT活性顯著升高,且MDA含量顯著降低(P0.05)。試驗(yàn)四:試驗(yàn)第21 d,在400 mg/kg海藻多糖組與對(duì)照組的各重復(fù)中挑選一頭接近平均體重仔豬屠宰,小心刮取小腸黏膜,分裝在無(wú)菌凍存管中,于-80℃冰箱保存。取盲腸中段和結(jié)腸,包扎后做好標(biāo)記,用于細(xì)菌計(jì)數(shù)。結(jié)果表明:1)與對(duì)照組相比,400 mg/kg海藻多糖組仔豬十二指腸緊密連接蛋白ZO-1、Occludin mRNA表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05),空腸、回腸緊密連接蛋白Occludin、Claudin-1 mRNA表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05)。Western blot結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼糧中添加400mg/kg海藻多糖顯著上調(diào)仔豬空腸緊密連接蛋白Occludin、Claudin-1蛋白表達(dá)量(P0.05),ZO-1蛋白表達(dá)量?jī)山M無(wú)顯著差異(P0.05)。2)與對(duì)照組相比,400 mg/kg海藻多糖組仔豬回腸與結(jié)腸粘膜SIgA含量顯著升高(P0.05),空腸粘膜TLR-4、TLR-6、MyD88mRNA表達(dá)量顯著上調(diào)(P0.05),TLR-2 mRNA表達(dá)量無(wú)顯著差異(P0.05)�？漳c粘膜抗炎性因子IL-10、TGF-β1顯著高于對(duì)照組(P0.05),促炎性因子IL-6、TNF-αmRNA表達(dá)量顯著低于對(duì)照組(P0.05)。3)與對(duì)照組相比,飼糧中添加400mg/kg海藻多糖后顯著提高了仔豬盲腸乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量(P0.05),顯著降低了大腸桿菌數(shù)量(P0.05),沙門(mén)氏菌及總需氧菌數(shù)量無(wú)顯著差異(P0.05)。綜上所述,仔豬飼糧中添加400 mg/kg和800 mg/kg海藻多糖均可顯著提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能,降低腹瀉頻率。飼糧中添加400 mg/kg海藻多糖能夠改善仔豬小腸形態(tài)結(jié)構(gòu),增強(qiáng)腸道緊密連接功能,提高消化酶活性,增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答能力,并且還能通過(guò)改善腸道菌群結(jié)構(gòu),促進(jìn)仔豬腸道健康。
【學(xué)位單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：S828.5
【部分圖文】：

圖 2-1 海藻多糖與對(duì)照組仔豬小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)切片圖（100 X）Fig. 2-1 Seaweed polysaccharide and control piglets of small intestine morphology and structure inweaned piglets（100 X）圖 2-2 為仔豬小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)圖，如圖所示，400 mg/kg 海藻多糖組仔豬小腸絨毛高度及絨毛高度/隱窩深度比值顯著升高（P<0.05），但兩組隱窩深度無(wú)顯著差異（P>0.05）。十二指腸 空腸 回腸

圖 2-2 海藻多糖對(duì)斷奶仔豬小腸粘膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響Fig.2-2 Effects of seaweed polysaccharide on the morphological structure of small intestinal mucosa inweaned piglets2.2 海藻多糖對(duì)斷奶仔豬腸道通透性的影響由表 2-1 可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加 400 mg/kg 海藻多糖能顯著降低仔豬血漿 D-乳酸含量（P<0.05），同時(shí)血漿 DAO 活性也降低了 42.71%，但未達(dá)到顯著差異（P>0.05）。表 2-1 海藻多糖對(duì)斷奶仔豬腸道通透性的影響Table 2-1 Effect of seaweed polysaccharide on intestinal permeability of weaned piglets項(xiàng)目 對(duì)照組 400 mg/kg 海藻多糖組 P 值P-valueItems Control 400 mg/kg SWP二胺氧化酶 DAO(U/L) 3.02±0.57 1.73±0.19 0.078

圖 4-1 海藻多糖對(duì)斷奶仔豬緊密連接蛋白 mRNA 表達(dá)量和蛋白表達(dá)的影響Fig. 4-1 Effect of seaweed polysaccharide on the mRNA and protein expression of tight junction proteinin Weaned Piglets2.2 海藻多糖對(duì)斷奶仔豬腸道粘膜免疫功能的影響由表 4-4 可知，400 mg/kg 海藻多糖組仔豬回腸與結(jié)腸粘膜 sIgA 含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。由圖 4-2 可知，相比對(duì)照組，400 mg/kg 海藻多糖組仔豬空腸粘膜TLR-4、TLR-6、MyD88 mRNA 表達(dá)量顯著升高（P<0.05），但 TLR-2 mRNA 表達(dá)量無(wú)顯著差異（P>0.05）。
【參考文獻(xiàn)】

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