創(chuàng)傷愈合是機(jī)體在受到損傷后對(duì)自身的組織進(jìn)行修復(fù)的過程,是機(jī)體在受損后使原有的細(xì)胞進(jìn)行增殖分化生成新的細(xì)胞或組織來(lái)替代已經(jīng)受損的細(xì)胞、組織結(jié)構(gòu)。創(chuàng)傷愈合中炎性反應(yīng)階段、細(xì)胞增殖階段以及組織重塑階段三個(gè)階段相輔相成,共同將組織修復(fù)。創(chuàng)傷在獸醫(yī)臨床一直都是最常見的問題,咬創(chuàng)、挫創(chuàng)等損傷經(jīng)常發(fā)生在動(dòng)物的生活中,創(chuàng)傷不僅影響動(dòng)物體生活質(zhì)量,還降低動(dòng)物的生產(chǎn)水平,因此加速創(chuàng)傷愈合是獸醫(yī)臨床長(zhǎng)期研究的問題。脂肪來(lái)源血管基質(zhì)組分(SVF)則是抽取于機(jī)體自身脂肪組織通過膠原酶消化、離心后將成熟的脂肪細(xì)胞去除后所得到的細(xì)胞沉淀,是一類含有多種細(xì)胞的細(xì)胞群,其擁有和干細(xì)胞一樣的增殖和多向分化的潛能,可以促進(jìn)機(jī)體組織的再生。本研究的研究目的是探討自體SVF對(duì)犬皮膚創(chuàng)傷的愈合作用,并初步探究SVF是通過何途徑影響創(chuàng)傷愈合的速率,為今后獸醫(yī)臨床實(shí)踐中創(chuàng)傷愈合的治療提供一個(gè)方法。本實(shí)驗(yàn)選用本地雜種犬6只,自身分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組,每只犬背部切取8個(gè)1.5 cm×1.5 cm的正方形傷口,每側(cè)4個(gè),左右對(duì)稱,一側(cè)規(guī)定為實(shí)驗(yàn)組,另一側(cè)規(guī)定為對(duì)照組。將犬自身腹股溝提取的脂肪制作成SVF注射到實(shí)驗(yàn)組傷口內(nèi),實(shí)驗(yàn)組每個(gè)傷口注射0.5 ml SVF(每cm~2傷口注射5×10~4個(gè)細(xì)胞),對(duì)照組注射0.5 ml生理鹽水。用ImageJ軟件于3、7、14、21 d測(cè)定出傷口的面積,計(jì)算出愈合率并記錄傷口完全愈合的時(shí)間;于第7、14、21、28 d切取皮膚樣本對(duì)其進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察實(shí)驗(yàn)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)免疫組化實(shí)驗(yàn),觀察細(xì)胞的炎癥反應(yīng),記錄平均血管條數(shù)以及細(xì)胞的增殖狀態(tài)。用試劑盒測(cè)定組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生因子以及羥脯氨酸的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組在創(chuàng)傷發(fā)生后的第7 d和第14 d愈合率顯著高于對(duì)照組(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組平均愈合時(shí)間約為22.5±1.38 d,對(duì)照組傷口的平均愈合時(shí)間約為27.17±0.75 d,實(shí)驗(yàn)組的愈合時(shí)間也相對(duì)較短(P0.05)。病理切片結(jié)果顯示第7 d實(shí)驗(yàn)組中,炎性細(xì)胞相對(duì)少于對(duì)照組,且血管條數(shù)多于對(duì)照組(P0.01);第14 d實(shí)驗(yàn)組存在大量膠原纖維,對(duì)照組仍存在少量炎性細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組血管數(shù)仍多于對(duì)照組(P0.05);第21 d實(shí)驗(yàn)組已有傷口完全愈合而對(duì)照組表皮還有缺損;第28 d,實(shí)驗(yàn)組已有皮膚附屬器再生的跡象,膠原纖維趨于有序排列而對(duì)照組并無(wú)皮膚附屬器再生。免疫組化結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組傷口中PCNA的積分光密度(IOD)值在第7、14、21 d均顯著高于對(duì)照組(P0.01)。ELISA結(jié)果顯示傷口新生組織的VEGF含量是逐漸下降的,在第7 d和第14 d以及21 d實(shí)驗(yàn)組含量都高于對(duì)照組(P0.05)。PDGF的含量也是下降的,第7 d實(shí)驗(yàn)組極高于對(duì)照組(P0.01),第14 d高于對(duì)照組(P0.05)。EGF含量則是逐漸升高的,第14、21、28 d實(shí)驗(yàn)組的含量都明顯高于對(duì)照組(P0.01)。HYP的含量也是逐漸升高,第14、21 d實(shí)驗(yàn)組的HYP含量明顯高于對(duì)照組(P0.01)。結(jié)果表明SVF在創(chuàng)傷愈合的過程中能夠促進(jìn)創(chuàng)傷部肉芽組織中血管的生成、提高創(chuàng)傷部位的生長(zhǎng)因子水平并促進(jìn)細(xì)胞增殖和膠原蛋白的合成,達(dá)到加快傷口愈合的目的。
【學(xué)位單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S858.292
【部分圖文】：

創(chuàng)傷模型的制備Fig.2-1Preparationofwoundmodel

圖 2-2 初次離心消化后的脂肪組 Adipose tissue after first centrifugeBS 稀釋為 0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液。將 S，靜置 1 分鐘后，在 3 分鐘內(nèi)用 2-3）。

SVF在顯微鏡下Fig.2-3SVFunderthemicroscope
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2864636