湖羊是我國特有的羔皮用綿羊品種,具有性成熟早,繁殖率強,肉質(zhì)細嫩的優(yōu)點。但與杜泊羊等專門化肉羊品種相比,湖羊的肉用性能和屠宰率較低。本論文針對雄性初生及六月齡湖羊與杜泊羊×湖羊雜交F1代羊的肌纖維特性、MYL3與ACTG2基因的可變剪接在不同肌肉組織的表達情況進行研究,探究湖羊骨骼肌生長發(fā)育的分子機理,探尋MYL3和ACTG2基因與肌纖維生長和脂肪積累的關(guān)系,這些結(jié)果可為湖羊產(chǎn)肉性狀的分子改良提供新的思路,也為肉用湖羊新品系的選育奠定理論基礎。本試驗屠宰了 12頭雄性初生及六月齡純種湖羊和杜泊×湖羊雜交F1代羊(剛出生、6月齡各半),采集了 BFM、LDM、MGM、GM、VLM、SOL和SSC7種肌肉組織,(1)利用石蠟切片、HE染色測定了不同肌肉組織的肌纖維直徑和長度,利用油紅O染色顯示肌肉樣品的脂肪分布;(2)分析了雄性純種湖羊、杜泊×湖羊雜交羊7種肌肉組織內(nèi)MYL3、ACTG2及其5' UTR可變剪接的表達情況;(3)構(gòu)建ACTG25'UTR不同剪接方式的雙熒光素酶報告基因,轉(zhuǎn)染豬腎細胞(PK-15)和雞成纖維細胞(DF-1),測定了熒光素酶活性和ACTG2 5'UTR不同剪接方式的表達情況。研究結(jié)果如下:(1)除雄性湖羊SOL肌纖維直徑和長度在初生羊和6月齡羊間不存在顯著差異外,雄性湖羊和杜泊×湖羊雜交F1代羊初生羊的BFM、LDM、MGM、GM、VLM和SSC肌纖維直徑和長度均顯著或極顯著小于6月齡羊(P0.05或P0.01);雄性湖羊初生羊、6月齡羊的LDM樣品肌纖維直徑均小于同月齡的杜泊×湖羊雜交F1代羊(P0.05);雄性6月齡純種湖羊BFM(P0.05)、LDM(P0.01)肌纖維長度顯著或極顯著小于同月齡杜泊×湖羊雜交羊。雄性純種湖羊及杜泊X湖羊雜交羊初生羊BFM的脂肪含量顯著低于同品種的6月齡羊(P0.05),SOL中脂肪含量極顯著低于同品種6月齡羊(P0.01)。雄性純種湖羊初生羊VLM.SSC肌肉組織中脂肪含量顯著低于同品種6月齡羊(P0.05)。(2)構(gòu)建了 ACTG2 5'7UTR不同剪接序列(65bp、83bp、116bp)的雙熒光素酶報告基因pLUC-pLUC-83、pLUC-116載體,豬腎細胞(PK-15)和雞成纖維細胞(DF-1)轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示,pLUC-83和pLUC-116啟動子活性最強,可顯著提高ACTG2 83bp的5'UTR序列的載體的表達量(P0.05)。(3)初生純種湖羊SOL中MYL3的表達量極顯著高于LDM、SSC(P0.01),顯著高于MGM中的表達量(P0.05);BM中MYL3的表達量顯著高于LDM、SSC(P0.05);SOL中ACTG2基因5'UTR長度為83bp的剪接表達量顯著高于LDM(P0.05);SSC中該種剪接形式在總的ACTG2基因表達量所占的比例顯著高于BFM、GM、VLM、SOL(P0.05)。6月齡純種湖羊BFM中MYL3基因的表達量極顯著高于其他6種組織(P0.01),LDM中MYL中的表達量顯著高于SSC(P0.05);BFM、MG 中ACTG2基因的表達量顯著高于其它5種組織(P0.05);VLM中ACTG2 5' UTR長度為83bp的剪接的表達量顯著高于LDM MGM、SSC樣品(P0.05);初生杜泊×湖羊雜交羊LDM中ACTG2 5' UTR長度為83bp的剪接的表達量極顯著高于BFM、MGM(P0.01),顯著高于GM、VLM、SOL(P0.05);6月齡杜泊×湖羊雜交羊BFM中MYL3基因的表達量顯著高于LDM、VLM、SSC(P0.05);MGM中ACTG2基因的表達量極顯著高于BFM(P0.01),顯著高于 GM、VLM、SSC(P0.05);SOL 中ACTG2 5' UTR 長度為 83bp 的剪接形式的表達量極顯著高于其它6種組織(P0.01),且在LDM中表達量顯著高于MGM、GM、VLM(P0.05)。MYL3、ACTG2基因及ACTG2 5' UTR長度為83bp的剪接形式對湖羊的肌肉生長發(fā)育及肉質(zhì)都有一定的影響。
【學位單位】：浙江師范大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S826
【部分圖文】：

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【參考文獻】

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本文編號：2850834