發(fā)布時(shí)間：2020-10-19 15:06

　　 人粒細(xì)胞無形體病(human granulocytic anaplasmosis,HGA)是由嗜吞噬細(xì)胞無形體(Anaplasma phagocytophilum,AP)侵染人末梢血中性粒細(xì)胞引起的一類人畜共患病,屬于自然疫源性疾病。蜱蟲是本病的主要傳播媒介,如全溝硬蜱、森林革蜱、肩突硬蜱、太平洋硬蜱等。HGA主要是通過蜱蟲叮咬感染不同的宿主動(dòng)物進(jìn)行傳播,該病原體宿主廣泛,可以感染人、家畜、鼠類和各種野生動(dòng)物,各種野生動(dòng)物的持續(xù)感染是維持本病在自然界中長(zhǎng)期存在的重要條件。近年來國(guó)內(nèi)外報(bào)道人和各種動(dòng)物感染嗜吞噬細(xì)胞無形體的病例越來越多,我國(guó)也陸續(xù)從多種動(dòng)物,蜱和人的體內(nèi)檢測(cè)到嗜吞噬細(xì)胞無形體,說明無形體病的感染數(shù)量和分布范圍在逐步擴(kuò)大。新疆地處亞歐大陸腹地,地域廣闊,生態(tài)環(huán)境多樣,綿羊養(yǎng)殖是新疆傳統(tǒng)畜牧業(yè),綿羊與各種蜱和鼠類的活動(dòng)接觸密切,極大的增加了人和動(dòng)物被粒細(xì)胞無形體感染的風(fēng)險(xiǎn)。我們對(duì)新疆天山北麓不同地區(qū)品種綿羊感染無形體進(jìn)行分子流行病學(xué)調(diào)查,病原形態(tài)學(xué)觀察與動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn),確定不同品種綿羊無形體的感染率,病原遺傳特征與致病性,為養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展保駕護(hù)航。主要的研究方法和結(jié)果如下:(1)新疆不同地區(qū)三個(gè)品種綿羊無形體流行病學(xué)調(diào)查:采集新疆伊犁哈薩克自治州尼勒克縣木斯鄉(xiāng)哈薩克羊血樣300份,瑪納斯湖羊血樣300份,瑪納斯廣東地鄉(xiāng)薩�？司d羊血樣300份,通過巢氏PCR檢測(cè)無形體16sRNA,結(jié)果顯示,伊犁哈薩克羊無形體的陽(yáng)性率為28%,瑪納斯湖羊無形體陽(yáng)性率為18%,瑪納斯薩�？搜驘o形體的陽(yáng)性率為24%,總體感染率為23.3%。其中伊犁尼勒克縣木斯鄉(xiāng)哈薩克羊感染率最高,瑪納斯縣湖羊感染率最低。(2)新疆綿羊無形體16sRNA遺傳進(jìn)化分析:隨機(jī)挑選30個(gè)陽(yáng)性樣本,針對(duì)無形體16sRNA特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增,測(cè)序后選取5條差異序列進(jìn)行遺傳進(jìn)化樹分析,將這些序列分別命名為Sheep1,Sheep2,Sheep3,Sheep4,Sheep5。用DNAstar將以上基因序列與在GenBank中國(guó)內(nèi)外典型無形體序列進(jìn)行比對(duì),結(jié)果顯示Sheep1-5之間序列同源性88.8%以上,5個(gè)陽(yáng)性序列與吉林、浙江、黑龍江同源性較高,都在91.6%以上,Sheep1與浙江來源的無形體同源性高達(dá)98.2%,與日本,俄羅斯,美國(guó)公布的部分序列同源性在91.6%以上,與俄羅斯來源的無形體同源性高達(dá)99.2%。(3)無形體病原人工感染綿羊和小白鼠:采用無形體PCR檢測(cè)為陽(yáng)性的綿羊血液,制作血涂片,觀察病原形態(tài)特點(diǎn)。將PCR檢測(cè)為陽(yáng)性的綿羊血液通過腹腔接種無形體檢測(cè)為陰性的綿羊,每隔2天觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的精神狀態(tài),頸靜脈采血并通過PCR進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果在實(shí)驗(yàn)第8天檢測(cè)到實(shí)驗(yàn)組B組中有1只綿羊無形體PCR為陽(yáng)性,但在隨后的采血PCR檢測(cè)中陽(yáng)性消失;將PCR檢測(cè)為陽(yáng)性的綿羊血液通過腹腔接種陰性小白鼠,每隔2天觀察小鼠的精神狀態(tài),采集小鼠脾臟PCR檢測(cè)小鼠均未感染無形體,實(shí)驗(yàn)第12天后,解剖剩余小鼠發(fā)現(xiàn)感染小白鼠脾臟明顯腫大。綜上所述,新疆地區(qū)不同品種綿羊存在無形體病的感染,且感染率比較高;無形體不能通過腹腔接種途徑感染綿羊和小鼠,其傳播途徑可能必須通過媒介蜱進(jìn)行傳播。
【學(xué)位單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S858.26
【部分圖文】：

部分哈薩克羊無形體巢氏PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果

無形體核苷酸序列比較

無形體系統(tǒng)進(jìn)化樹
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2847369