發(fā)布時間：2020-10-14 12:12

　　 試驗選取46日齡正常體重愛拔益加(AA)肉雞(簡稱AA肉雞,平均體重:1.86kg)32只和46日齡肉用絲羽烏骨雞(簡稱烏雞,平均體重:0.75kg)36只,隨機分配到6個處理組:AA肉雞對照組(注射PBS,n=10)、AA肉雞低劑量胰島素處理組(80μg/kg體重,n=10)、AA肉雞高劑量胰島素處理組(100μg/kg體重,n=6)、烏雞對照組(注射PBS,n=12)、烏雞低劑量胰島素處理組(80μg/kg體重,n=12)和烏雞高劑量胰島素處理組(100μg/kg體重,n=12)。為了研究體重效應對家禽血糖含量、血清生化指標以及基因表達的影響,另選取低體重AA肉雞(平均體重:0.88kg),注射低劑量胰島素(80μg/kg體重,n=6)命名為低體重組。在46日齡時進行饑餓處理12h,47日齡進行胰島素耐受性試驗。試驗分為以下兩個部分:試驗一不同胰島素劑量對AA肉雞和烏雞血糖含量和血清生化指標的影響為了研究:(1)AA肉雞和烏雞胰腺指數(shù)對血糖含量的影響,(2)不同胰島素劑量對AA肉雞和烏雞的血糖的影響,(3)不同胰島素劑量對AA肉雞和烏雞的血清生化指標的影響。試驗結(jié)果如下:(1)胰腺指數(shù):AA肉雞低體重組胰腺指數(shù)顯著高于正常體重組。烏雞胰腺指數(shù)極顯著高于AA肉雞正常體重組。AA肉雞低體重組胰腺指數(shù)與烏雞差異不顯著。(2)血糖含量:進行胰島素耐受性試驗,注射胰島素后AA肉雞和烏雞血糖呈直線下降。0min~120min血糖在AA肉雞和烏雞之間差異不顯著,120min時對AA肉雞和烏雞恢復飼喂,AA肉雞血糖含量基本維持不變,烏雞血糖含量升高幅度較大,240min時烏雞血糖含量極顯著高于AA肉雞(P0.01),約是AA肉雞的2.56倍。體重差異對胰島素調(diào)節(jié)雞血糖含量的效應:在自然狀態(tài)下,高體重組血糖含量顯著(P0.05)高于低體重組,低劑量胰島素注射后不同體重AA肉雞血糖含量差異不顯著。在選取的同等體重級別的AA肉雞和烏雞中,在自然狀態(tài)下,烏雞正常體重組血糖含量極顯著(P0.01)高于AA肉雞低體重組,低劑量胰島素注射后低體重組AA肉雞與烏雞血糖含量差異不顯著。(3)血清生化指標:胰島素注射240min后,胰島素高劑量處理組烏雞血清尿素含量顯著(P0.05)高于AA肉雞,約是AA肉雞的3.57倍。胰島素高劑量組AA肉雞血清胰島素含量顯著(P0.05)高于胰島素低劑量組AA肉雞,約是胰島素低劑量組2.94倍。低劑量胰島素處理后,血清中尿素含量在120min和240min時烏雞組極顯著(P0.01)高于AA肉雞組,約是AA肉雞組3.54和2.65倍。在240min時,烏雞血清中尿素含量顯著(P0.05)高于AA肉雞。低劑量胰島素處理后,在240min時烏雞血清中尿酸含量顯著(P0.05)高于0min時,約是0min的2.09倍。在120min時,烏雞血清中總膽固醇含量極顯著(P0.01)高于AA肉雞。低劑量胰島素處理后,在烏雞中,僅120min時血清中總膽固醇含量極顯著(P0.01)高于240min。(4)體重差異對血清生化指標的影響:低劑量胰島素注射后240min,低體重組AA肉雞血清中葡萄糖含量顯著(P0.05)高于高體重組。同樣在胰島素注射后240min,烏雞中血清中尿素含量極顯著(P0.01)高于AA肉雞低體重組,約是AA肉雞低體重組的2.93倍,烏雞血清中尿酸含量顯著(P0.05)高于AA肉雞低體重組。試驗二不同胰島素劑量對AA肉雞和烏雞基因表達效應的影響為了研究胰島素劑量對AA肉雞和烏雞基因相對表達量的影響,試驗采集47日齡0min、120min和240minAA肉雞和烏雞肝臟、下丘腦、胸肌和胰腺。根據(jù)相關(guān)家禽胰島素抵抗的基因(GLUT2、GLUT12、NPY和胰島素受體(Insulin receptor,IR))以及相關(guān)序列設(shè)計引物,采用熒光定量FQ-PCR對候選基因及相關(guān)序列進行定量分析。試驗結(jié)果如下:(1)在AA肉雞下丘腦中低劑量組GLUT2相對表達量顯著(P0.05)高于高劑量組,約是高劑量組的11.51倍,低劑量組AA肉雞GLUT2相對表達量顯著(P0.05)高于烏雞,約是烏雞的11.68倍。在烏雞下丘腦中低劑量組NPY相對表達量顯著(P0.05)高于高劑量組,約是高劑量組的3.78倍。AA肉雞下丘腦GLUT2 240min時相對表達量極顯著(P0.01)高于120min時、顯著(P0.05)高于0min時,約是120min的7.48倍、0min的3.06倍。240min時,AA肉雞下丘腦GLUT2相對表達量極顯著高于烏雞,約是烏雞的11.67倍。(2)低劑量胰島素處理后,體重差異對AA肉雞和烏雞基因表達效應的影響發(fā)現(xiàn),在胰島素注射后240min的AA肉雞中,在下丘腦中高體重組GLUT2相對表達量顯著(P0.05)高于低體重組,約是低體重組的8.28倍,而IR的相對表達量則是低體重組顯著(P0.05)高于高體重組,約是高體重組的2.13倍。低劑量胰島素處理后,低體重組胸肌IR相對表達量顯著(P0.05)高于高體重組,約是高體重組的2.56倍。
【學位單位】：河南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S831
【部分圖文】：

圖 3-2 胰島素標準曲線圖Fig.3-2 Insulin standard curve和測得 OD 值如表 3-4，計算標準曲線回歸方程，使用 E參數(shù)）擬合模型。標準曲線如圖 3-2，曲線方程：方程: y ==1.26082、C=36.36894、D=0.96749），r^2=0.998的測定以及胰腺指數(shù)的計算日齡，測定活重并屠宰全部試驗組 AA 肉雞和烏雞，解剖重（g）/活重（kg）析AS9.2 軟件中 ANOVA(GLM)過程進行單變量單因素、單驗。結(jié)果以平均值±標準誤（mean±SE）表示，以 P<0.05 為重、胰腺重以及胰腺指數(shù)的差異分析

A 質(zhì)量檢測中提取的總 RNA 以微量紫外分光光度計檢測 RNA 的純度均到目標，隨機抽樣經(jīng) 1%電泳鑒定，由圖 4-1 可以看出三個條 RNA 的 1%瓊脂糖凝膠電泳圖（圖中的三條帶從上往下依次為 28s、18A with 1 % agarose gel electrophoresis (the three bands from top to bottom is cDNA 質(zhì)量

的結(jié)果以 Excel 表格的形式導出，以便進行下一步由加樣等操作過程引起的誤差。β-actin 為內(nèi)標基因，每個樣本的目的基因和內(nèi)參基用 2-△△Ct法進行數(shù)據(jù)分析，相對定量數(shù)據(jù)處理的計-平均△Ct（每個基因△Ct 平均值最低組平均值）=因-內(nèi)參基因）]（對照組）。平均相對表達量=2-△9.2 軟件中 ANOVA(GLM)過程進行單變量單因素。結(jié)果以平均值±標準誤（mean±SE）表示，以 P<0.0檢測取的總 RNA 以微量紫外分光光度計檢測 RNA 的純，隨機抽樣經(jīng) 1%電泳鑒定，由圖 4-1 可以看出三
【參考文獻】

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本文編號：2840643