本研究旨在研究不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃發(fā)育的影響,選取72只20日齡體重相近健康的海門山羊羔羊,隨機(jī)分為三組,分別為僅飼喂代乳粉組(MRO)、代乳粉加精料組(MRC)、代乳粉加精料加苜蓿顆粒組(MCA)。試驗(yàn)預(yù)飼期3天,正式期40天。通過不同的飼糧誘導(dǎo)羔羊不同的瘤胃發(fā)育模式。探究不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃發(fā)酵、瘤胃微生物區(qū)系和瘤胃上皮基因表達(dá)的影響,以期為山羊羔羊早期的營(yíng)養(yǎng)調(diào)控提供理論依據(jù)。本研究分為四個(gè)部分。試驗(yàn)一:不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊生長(zhǎng)性能和表觀消化率的影響本試驗(yàn)旨在研究不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊生長(zhǎng)性能和表觀消化率的影響。試驗(yàn)采取單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì),以飼糧為試驗(yàn)因子。選用出生日齡一致、體重相近的健康山羊羔羊72只,分成3組,每組24只,每組6個(gè)重復(fù),每重復(fù)4只羊。羔羊0-20日齡隨母哺乳,自20日齡開始,對(duì)照組飼喂代乳粉(MRO)、試驗(yàn)組分別飼喂代乳粉+精料(MRC)、代乳粉+精料+苜蓿顆粒(MCA)至60日齡斷奶,羔羊自由采食精料與苜蓿顆粒,自由飲水。結(jié)果表明:MRC組和MCA組平均日增重顯著高于MRO組(P0.05)。MRO組干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、總能和非纖維性碳水化合物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率均顯著高于MRC和MCA組(P0.05)。MCA組可消化干物質(zhì)攝入量、可消化蛋白質(zhì)攝入量均顯著高于MRC組(P0.05),MRC組顯著高于MRO組(P0.05)。結(jié)論:在山羊羔羊20~60日齡飼喂精料或者精料+苜蓿顆�？梢燥@著提高山羊羔羊的生長(zhǎng)性能。在山羊羔羊20~60日齡,飼喂精料或者精料+苜蓿顆粒,顯著降低了羔羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。試驗(yàn)二:不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃發(fā)酵和組織形態(tài)的影響本試驗(yàn)旨在研究不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃發(fā)酵和組織形態(tài)的影響。試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)處理同試驗(yàn)一。在山羊羔羊60日齡時(shí)每處理每個(gè)重復(fù)選取健康、體重接近平均體重的羔羊1只屠宰。結(jié)果表明:MCA組羔羊瘤胃重量、瘤胃占復(fù)胃比例和瘤胃占宰前活重比例均顯著高于MRC組(P0.05),MRC組顯著高于MRO組(P0.05)。MRC組和MCA組瘤胃液pH和氨態(tài)氮含量顯著低于MRO組(P0.05)。MRC組和MCA組瘤胃微生物蛋白含量顯著高于MRO組(P0.05)。MCA組瘤胃液總揮發(fā)酸含量、乙酸和丁酸含量最高,顯著高于MRC組(P0.05),MRC組顯著高于MRO組(P0.05)。MCA組和MRC組羔羊瘤胃乳頭長(zhǎng)度顯著高于MRO組(P0.05)。MCA組羔羊瘤胃乳頭寬度顯著高于MRO組(P0.05)。瘤胃液pH與瘤胃乳頭長(zhǎng)度和寬度均呈顯著負(fù)相關(guān)(P0.05)。瘤胃液中總揮發(fā)酸、微生物蛋白、乙酸、丙酸、丁酸含量與瘤胃乳頭長(zhǎng)度呈顯著正相關(guān)(P0.05)。試驗(yàn)三:不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃微生物區(qū)系的影響本試驗(yàn)旨在研究不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃微生物區(qū)系的影響。試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)處理同試驗(yàn)一。在山羊羔羊60日齡時(shí)每處理每個(gè)重復(fù)選取健康、體重接近平均體重的羔羊1只屠宰,采集瘤胃內(nèi)容物和腹囊上皮測(cè)定微生物區(qū)系。結(jié)果顯示:MRC組和MCA組瘤胃內(nèi)容物微生物豐富度顯著低于MRO組(P0.05),MCA組擬桿菌門(Bacteroidetes)的相對(duì)豐度顯著低于MRO組(P0.05)。MRC組和MCA組的厚壁菌門(Firmicutes)的相對(duì)豐度顯著高于MRO組(P0.05)。MCA組纖維桿菌門(Fibrobacteres)的相對(duì)豐度顯著高于MRC組(P0.05),MRC組顯著高于MRO組(P0.05)。MRC組和MCA組的普雷沃氏菌屬相對(duì)豐度顯著高于MRO組(P0.05)。MCA組的纖維桿菌屬和琥珀酸菌屬(Succiniclasticum)相對(duì)豐度要顯著高于MRO組和MRC組(P0.05)。MCA組琥珀酸弧菌屬(Succinivibrio)和瘤胃球菌屬(Ruminococcus)相對(duì)豐度顯著高于MRO組(P0.05)。通過16S rDNA功能預(yù)測(cè),結(jié)果表明Ruminococcus unclassified是MRC組和MCA組共同的Transcription和Cellular_Processes_and_Signaling代謝通路的主要驅(qū)動(dòng)因子。月形單胞菌屬(Selenomonas)、羅氏菌屬(Roseburia)、普雷沃氏菌屬(Prevotella)、瘤胃球菌屬(Ruminococcus)和琥珀酸弧菌屬(Succiniclasticum)與總揮發(fā)酸、丙酸和丁酸含量均呈顯著正相關(guān)關(guān)系(P0.05)。瘤胃內(nèi)容物和腹囊上皮微生物區(qū)系組成存在較大差異,MRC組和MCA組瘤胃腹囊上皮微生物多樣性顯著高于MRO組(P0.05)。MRC和MCA組羔羊瘤胃上皮擬桿菌門(Bacteroidetes)的相對(duì)豐度顯著高于MRO組(P0.05),厚壁菌門(Firmicutes)的相對(duì)豐度顯著低于MRO組(P0.05)。MCA組羔羊瘤胃上皮變形菌門相對(duì)豐度顯著高于MRO組(P0.05)。MRC組和MCA組羔羊瘤胃上皮丁酸弧菌屬(Butyrivibrio)相對(duì)豐度顯著低于MRO組(P0.05)。試驗(yàn)四:不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃上皮基因表達(dá)的影響本試驗(yàn)旨在研究不同飼糧對(duì)20~60日齡山羊羔羊瘤胃上皮基因表達(dá)的影響。試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)處理同試驗(yàn)一。在山羊羔羊60日齡時(shí)每處理每個(gè)重復(fù)選取健康、體重接近平均體重的羔羊1只屠宰,采集瘤胃腹囊上皮進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。GO富集結(jié)果顯示:MRO-vs-MCA組的差異表達(dá)基因主要富集到生物過程調(diào)節(jié)、發(fā)育過程調(diào)節(jié)、解剖結(jié)構(gòu)發(fā)展、多細(xì)胞生物發(fā)育。MRO-vs-MRC組差異表達(dá)基因主要富集到膜內(nèi)在組成部分、膜整體組成部分、多細(xì)胞生物過程。MRC-vs-MCA組差異表達(dá)基因主要富集到有機(jī)環(huán)狀化合物結(jié)合、雜環(huán)化合物結(jié)合、碳水化合物衍生物結(jié)合。KEGG富集結(jié)果顯示:MRO-vs-MCA組差異表達(dá)基因富集主要富集到癌通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、人乳頭瘤病毒感染等。MRO-vs-MRC差異表達(dá)基因主要富集到人乳頭瘤病毒感染、PI3K-Akt信號(hào)通路、細(xì)胞粘附分子等。MRC-vs-MCA的差異基因主要富集到細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用、血小板活化、細(xì)胞粘附分子等。HMGCL、HMGCS2和BDH1這類生酮基因在MCA組和MRC組中的表達(dá)量顯著高于MRO組(q0.05)。但I(xiàn)GFBP4和IGFBP2在MRC組和MCA組中表達(dá)量顯著低于MRO組(q0.05)。HMGCL、HMGCS2和BDH1表達(dá)量與瘤胃液乙酸、丙酸和丁酸含量存在極顯著正相關(guān)關(guān)系(P0.01)。結(jié)果顯示:在山羊羔羊20~60日齡階段,飼喂精料或者精料加苜蓿顆粒提高了羔羊瘤胃液中乙酸、丙酸和丁酸含量,乙酸、丙酸和丁酸促進(jìn)了羔羊瘤胃腹囊上皮生酮基因的表達(dá),提高了瘤胃生酮能力,另一方面,飼喂精料或者精料加苜蓿顆粒降低了IGFBP4和IGFBP2的表達(dá),促進(jìn)了上皮細(xì)胞的增殖。綜上所述,在山羊羔羊20~60日齡階段,飼喂精料或者精料加苜蓿顆粒促進(jìn)了山羊羔羊瘤胃中優(yōu)勢(shì)菌群的建立和菌群相似性的升高,使羔羊瘤胃微生物組成更趨近于成年山羊。在山羊羔羊20~60日齡階段,飼喂精料或者精料加苜蓿顆粒提高了羔羊瘤胃中纖維分解菌和蛋白分解菌的比例,提高了瘤胃發(fā)酵功能。在山羊羔羊20~60日齡階段,飼喂精料或者精料加苜蓿顆粒提高了瘤胃中乙酸、丙酸和丁酸含量進(jìn)而促進(jìn)HMGCL、HMGCS2和BDH1等生酮基因的表達(dá),提高瘤胃生酮能力,為瘤胃發(fā)育提供充足的能量,另一方面,飼喂精料或者精料加苜蓿顆粒顯著降低了IGFBP2和IGFBP4基因的表達(dá),降低了IGFBP2和IGFBP4對(duì)IGF的抑制作用,促進(jìn)了瘤胃上皮細(xì)胞的增殖。
【學(xué)位單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S827.5
【部分圖文】：

由液體飼料向固體的轉(zhuǎn)變。開食料根據(jù)物理性狀的不同，可以分為粉末狀開食料、顆�；_食和細(xì)磨狀開食料，在我國(guó)，顆粒化開食料使用最為廣泛。羔羊斷母乳，補(bǔ)飼開食料已經(jīng)成為許國(guó)家的通行做法。本課題組，研究已經(jīng)證實(shí)，與僅飼喂代乳粉的羔羊相比，補(bǔ)飼開食料顯著提了瘤胃的重量和乳頭長(zhǎng)度(岳喜新，2011b；柴建民，2015)。Connor 等(2013a)研究發(fā)現(xiàn)，飼喂食料的犢牛瘤胃上皮乳頭長(zhǎng)度顯著高于僅飼喂代乳粉的犢牛（圖一）。Wang 等(2016)在綿羊羔上的研究表明，補(bǔ)飼開食料的羔羊瘤網(wǎng)胃重量提高了 50%，容積提高了 40%，瘤胃乳頭長(zhǎng)度提了 34%，但瘤胃乳頭寬度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。此外，開食料的補(bǔ)飼日齡也會(huì)對(duì)羔羊的瘤胃發(fā)育產(chǎn)生要的影響，郭江鵬等(2018)研究表明，羔羊 28 日齡補(bǔ)飼開食料對(duì)瘤胃組織形態(tài)學(xué)發(fā)育效果好42 日齡。除補(bǔ)飼開食料外，實(shí)際生產(chǎn)中也有補(bǔ)飼干草的措施。但關(guān)于是否應(yīng)該在幼齡反芻動(dòng)物斷奶補(bǔ)飼干草，目前仍然沒有達(dá)成一致。贊成飼喂干草的學(xué)者認(rèn)為幼齡反芻動(dòng)物斷奶前，瘤胃容積小，消化能力不夠完全。干草在瘤胃中可以起到充盈瘤胃的作用，可以擴(kuò)大瘤胃的容積，增加齡反芻動(dòng)物的采食量，促進(jìn)瘤胃肌肉層的發(fā)育(Norouzian, 2015)。此外，適當(dāng)補(bǔ)飼干草可以預(yù)瘤胃乳頭黏連和角質(zhì)化不完全(Beiranvand et al., 2014a)。反對(duì)飼喂干草的學(xué)者認(rèn)為，幼齡反芻物斷奶前，瘤胃消化能力較低，補(bǔ)飼干草等粗飼料，會(huì)降低消化率。Connor 等(2013a)研究發(fā)現(xiàn)飼喂?fàn)倥４榉奂痈刹菘梢源龠M(jìn)犢牛瘤胃乳頭的增長(zhǎng)，但效果不如飼喂代乳粉加精料（圖 1.1）王立斌(2013b)在犢牛上的研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)飼苜蓿干草降低了瘤胃乳頭的高度和寬度。

不同飼糧對(duì) 20~60 日齡山羊羔羊瘤胃組織形態(tài)的影響見表 3.3 和圖 3.1（從圖 3.1 我們可出 MCA 和 MRC 組羔羊瘤胃乳頭長(zhǎng)度和寬度顯著高于 MRO 組，且 MCA 組羔羊瘤胃乳頭寬于 MRC 組）。由表 3.3 可知，MCA 組和 MRC 組羔羊瘤胃乳頭長(zhǎng)度顯著高于 MRO 組(P<0.0MRC 組和 MCA 組差異不顯著(P>0.05)。MCA 組羔羊瘤胃乳頭寬度顯著高于 MRO 組(P<0.0但 MCA 組和 MRC 組差異不顯著(P>0.05)。三組之間瘤胃角質(zhì)層厚度和肌肉層厚度無顯著(P>0.05)。MRC 組瘤胃上皮厚度顯著高于 MRO 組(P<0.05)，但 MRC 組和 MCA 組之間差異著(P>0.05)。表 3.3 不同飼糧對(duì) 20~60 日齡山羊羔羊瘤胃組織形態(tài)的影響Table 3.3 Effects of different diets on the rumen morphology in 20~60 days old Goat kids項(xiàng)目 處理組 SEM P 值Items MRO MRC MCA P-value乳頭長(zhǎng)度 Papilla length / (μm) 786.6b1191.6a1389.6a80.44 0.001乳頭寬度 Papilla width / (μm) 169.81b206.52ab237.13a9.85 0.001角質(zhì)層厚度 Keratin layer thickness / (μm) 33.68 49.98 36.75 3.38 0.126肌肉層厚度 Muscle layers thickness / (μm) 698.60 628.40 861.30 47.28 0.117上皮厚度 Epithelium thickness / (μm) 43.13b56.07a47.72ab2.19 0.040

圖 4.2 A 基于 16S rDNA 測(cè)序的 Chao 1 指數(shù)稀疏曲線圖 4.2 B 基于 16S rDNA 測(cè)序的 Observed- species 指數(shù)稀疏曲線Figure 4.2 A Rarefaction curves of the Chao1 index based on the 16S rDNA gene sequencing (at 0Figure 4.2 B Rarefaction curves of the Observed- species index based on the 16S rDNA gene sequencilevel)表 4.1 不同飼糧對(duì) 20~60 日齡山羊羔羊瘤胃內(nèi)容物微生物 α 多樣性的影響Table4.1 Effects of different diets on microbial α diversity in rumen content of 20~60 days 項(xiàng)目 Items處理 TreatmentsSEM MRO MRC MCAOTUs 367.00a204.33b236.50b20.9554 Chao1 429.32a266.56b289.51b23.8454 Good’s coverage 0.996b0.998a0.997a0.0002 Shannon 4.751 4.316 4.754 0.1647 Simpson 0.864 0.885 0.915 0.0136 4.2.1.2 不同飼糧對(duì) 20~60 日齡山羊羔羊瘤胃內(nèi)容物微生物 Beta 多樣性的影響

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本文編號(hào)：2830592