香豬繁殖性狀相關(guān)SNPs的多態(tài)性研究
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【摘要】:香豬是我國稀有的優(yōu)良地方微型豬種,與大白豬、榮昌豬相比,香豬的繁殖生理特性明顯的不同,如產(chǎn)仔數(shù)低、性成熟早,但香豬繁殖率低的生理特性調(diào)控機制還不太清楚。本論文是利用Illumina Porcine SNP60K芯片進行全基因組關(guān)聯(lián)分析(Genome-wide association study,GWAS),得出與繁殖性狀相關(guān)聯(lián)候選單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位點。采用等位基因特異性PCR(allele-specific PCR,AS-PCR)方法對6個與繁殖相關(guān)的候選SNP:ASGA0076852、M1GA0008617、ASGA0020493、DIAS0003365、H3GA0056106、ALGA0115838進行大樣本驗證,得到以下結(jié)果:1.ASGA0076852多態(tài)性位點ASGA0076852(rs80839320)位于谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSS)基因的第三內(nèi)含子,rs80839320位點的高產(chǎn)香豬的A等位基因頻率低于低產(chǎn)香豬的相應值(P0.01),與香豬二胎產(chǎn)仔數(shù)、三胎產(chǎn)仔數(shù)呈弱的負相關(guān)。6個豬品種在ASGA0076852位點基因型分布存在多態(tài)性。6個豬群之間相比:香豬的A等位基因明顯高于糯谷豬、黔北黑豬、大白豬的相應值(P0.01);柯樂豬A等位基因明顯低于糯谷豬(P0.01),低于黔北黑豬(P0.05);糯谷豬、黔北黑豬的A等位基因明顯高于榮昌豬和糯谷豬的相應值(P0.01)。2.M1GA0008617多態(tài)性位點M1GA0008617(rs81388211)位于基因間,rs81388211位點的高產(chǎn)香豬的D等位基因頻率高于低產(chǎn)香豬的相應值(P0.01),與香豬二胎產(chǎn)仔數(shù)、三胎產(chǎn)仔數(shù)呈弱的正相關(guān)。4個貴州地方豬品種、榮昌豬和大白豬在rs81388211位點均存在多態(tài)性。6個豬品種之間相比:大白豬C等位基因頻率明顯高于其它5個豬品種的相應值(P0.01);榮昌豬D等位基因頻率明顯低于柯樂豬和香豬的相應值(P0.01),也低于黔北黑豬(P0.05);貴州4個地方豬品種之間沒有明顯(P0.05)。3.ASGA0020493多態(tài)性位點ASGA0020493(rs80951600)位于TBX19(T-box 19)基因的外顯子3中,為C/T單核苷酸變異,引起錯義突變,m RNA由ACC變?yōu)镚CC,導致189位的氨基酸(amina acid,AA)由蘇氨酸(threonine,Thr)變?yōu)楸彼?alanine,Ala)。rs80951600位點在高產(chǎn)香豬的E等位基因頻率高于低產(chǎn)香豬相應值,(卡方檢驗P值為0.073接近0.05)與香豬二胎產(chǎn)仔數(shù)、三胎產(chǎn)仔數(shù)呈弱的正相關(guān)。6個豬品種在ASGA0020493位點的基因型分布存在多態(tài)性。6個豬品種之間相比:大白豬的等位基因E頻率高于榮昌豬和4種貴州地方豬品種的相應值(P0.01);榮昌豬等位基因E頻率低于糯谷豬和黔北黑豬相應值(P0.01);柯樂豬的E等位基因頻率明顯高于糯谷豬和黔北黑豬相應值(P0.01);香豬等位基因E頻率低于糯谷豬相應值(P0.05)。4.DIAS0003365多態(tài)性位點DIAS0003365(rs81213998)位點位于MKLN1(muskelin 1,intracellular mediator containing kelch motifs)基因的外顯子18,rs81213998位點高產(chǎn)香豬的E等位基因頻率與低產(chǎn)香豬的相應值沒有差異(P0.05),與香豬的一胎、二胎、三胎的產(chǎn)仔數(shù)沒有相關(guān)性。4個貴州地方豬品種在rs81213998位點存在多態(tài)性。豬品種之間相比,香豬的等位基因G明顯高于柯樂豬、糯谷豬、黔北黑豬的相應值(P0.01);黔北黑豬、糯谷豬和柯樂豬之間的差異不明顯(P0.05)。5.H3GA0056106和ALGA0115838多態(tài)性位點H3GA0056106(rs81320066)和ALGA0115838(rs81345180)位于基因的間隔區(qū),rs81320066和rs81345180位點高產(chǎn)香豬的J和K等位基因頻率與低產(chǎn)香豬的相應值沒有差異(P0.05)。綜上,ASGA0076852、M1GA0008617位點可能是香豬繁殖相關(guān)的微效SNP位點;ASGA0020493位點的多態(tài)性可能反映了豬品種的進化信息;DIAS0003365位點可能與豬品種的生長表型有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:香豬 芯片 SNP位點 GWAS 關(guān)聯(lián)分析 基因型
【學位授予單位】:貴州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S828
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- SUMMARY8-11
- 第一章 前言11-19
- 1.1 論文中的豬品種11-13
- 1.1.1 從江香豬11-12
- 1.1.2 柯樂豬12
- 1.1.3 糯谷豬12
- 1.1.4 黔北黑豬12-13
- 1.1.5 榮昌豬13
- 1.1.6 大白豬13
- 1.2 全基因組多態(tài)性研究13-18
- 1.2.1 SNP的研究進展14-17
- 1.2.1.1 SNP的簡介14
- 1.2.1.2 SNP檢測的方法14-17
- 1.2.2 全基因組關(guān)聯(lián)分析17-18
- 1.3 研究目的和意義18-19
- 第二章 材料與方法19-35
- 2.1 實驗材料及試劑19-23
- 2.1.1 實驗材料19-21
- 2.1.2 主要試劑21-22
- 2.1.3 主要溶液的配制22
- 2.1.4 主要儀器設備22-23
- 2.2 實驗方法23-34
- 2.2.1 組織/血液基因組DNA的提取23-25
- 2.2.2 豬全基因組SNP研究25-27
- 2.2.3 AS-PCR分析27-34
- 2.3 數(shù)據(jù)處理34-35
- 第三章 結(jié)果35-61
- 3.1 香豬產(chǎn)仔數(shù)分析35
- 3.2 組織基因組DNA提取35-36
- 3.3 SNP分型36-61
- 3.3.1 SNP的獲得36-42
- 3.3.2 ASGA0076852多態(tài)性位點42-46
- 3.3.3 M1GA0008617多態(tài)性位點46-50
- 3.3.4 ASGA0020493多態(tài)性位點50-53
- 3.3.5 DIAS0003365多態(tài)性位點53-57
- 3.3.6 H3GA0056106多態(tài)性位點57-59
- 3.3.7 ALGA0115838多態(tài)性位點59-61
- 第四章 討論61-67
- 4.1 ASGA0076852多態(tài)性位點61-62
- 4.2 M1GA0008617多態(tài)性位點62-63
- 4.3 ASGA0020493多態(tài)性位點63-64
- 4.4 DIAS0003365多態(tài)性位點64-66
- 4.5 H3GA0056106和ALGA0115838多態(tài)性位點66-67
- 第五章 小結(jié)67-68
- 參考文獻68-75
- 縮略詞表75-77
- 致謝77-78
- 附錄78
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本文編號:283010
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