酮體是脂肪酸不完全氧化分解的中間產(chǎn)物,包括乙酰乙酸、β-羥基丁酸及丙酮三種組份,主要由肝臟實質(zhì)細(xì)胞中的線粒體生成,被轉(zhuǎn)運至如大腦、心臟和骨骼肌等肝外組織。除作為能量供應(yīng)的原料外,酮體還在作為信號傳導(dǎo)的介質(zhì)及調(diào)控炎癥和氧化應(yīng)激等方面也發(fā)揮著積極作用。許多研究結(jié)果都證實了酮體在哺乳動物細(xì)胞代謝、體內(nèi)穩(wěn)態(tài)及機(jī)體多種生理和病理狀態(tài)下的重要作用。目前已知,多種寄生蟲感染會引起宿主體內(nèi)酮酸代謝異常,甚至酮酸中毒,對患者造成嚴(yán)重的危害,但尚未有對其致病機(jī)理表述明確的研究結(jié)果。因此,本研究選擇體外培養(yǎng)的伊氏錐蟲和剛地弓形蟲作為侵入宿主病原,分別建立小鼠急性與慢性(包括初蟲期與瀕死期)感染的模型。采用電化學(xué)傳感器法檢測小鼠外周血中的酮體含量;應(yīng)用分光光度法測定小鼠肝臟與腦組織酮體水平;采用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測小鼠肝臟中酮體生成途徑4種相關(guān)酶基因(Acaa2、Hmgcl、Hmgcs2與Bdh1)與小鼠腦組織中酮體分解途徑3種相關(guān)酶基因(Acaa2、Oxct1與Bdh1)的轉(zhuǎn)錄水平。研究結(jié)果表明,伊氏錐蟲4V1M蟲株感染小鼠,肝臟酮體生成途徑相關(guān)酶基因Acaa2、Hmgcl、Hmgcs2與Bdh1的轉(zhuǎn)錄水平顯著下調(diào)(p0.01),腦組織中酮體分解途徑關(guān)鍵酶基因Oxct1的轉(zhuǎn)錄顯著上調(diào)(p0.05),減少宿主肝臟酮體的生成,促進(jìn)腦組織中酮體分解。提示伊氏錐蟲感染不會引起宿主發(fā)生酮酸中毒。剛地弓形蟲RH蟲株慢性感染小鼠,肝臟中酮體生成途徑相關(guān)酶基因Acaa2、Hmgcl、Hmgcs2與Bdh1的轉(zhuǎn)錄水平顯著上調(diào)(p0.01),腦組織中酮體分解途徑相關(guān)酶基因Acaa2、Oxct1與Bdh1的轉(zhuǎn)錄水平顯著下調(diào)(p0.01),促進(jìn)酮體在宿主肝臟的生成,并減少在宿主腦組織中的分解,引起宿主血液中酮體含量顯著升高,提示剛地弓形蟲感染可引發(fā)宿主發(fā)生酮酸中毒。本研究首次從宿主的角度分析寄生性原蟲感染對小鼠酮體生成與分解途徑相關(guān)酶基因轉(zhuǎn)錄水平的影響,探究其酮體異常的機(jī)制,為寄生蟲感染引起宿主酮體代謝診斷標(biāo)志物的篩選提供參考。
【學(xué)位單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S855.9
【部分圖文】：

圖 1 - 1 BALB/c 小鼠外周血酮體含量（mmol/L）注釋：A：錐蟲組小鼠外周血酮體含量檢測結(jié)果；B：弓形蟲組小鼠外周血酮體含量檢測結(jié)果；與空白對照組小鼠外周血酮體含量比較，* P < 0.05；** P < 0.01。Fig. 1 - 1 The peripheral blood ketone body content in BALB/c mouse （mmol/L）Note. A: The peripheral blood ketone body content test results from mouse of trypanosoma groups; B: The peripheral bloodketone body content test results from mouse of Toxoplasma groups; Compared with the Blank, * P < 0.05；** P < 0.01.1.3.4 小鼠肝臟與腦組織酮體含量檢測結(jié)果分別檢測試驗組與對照組 BALB/c 小鼠肝臟與腦組織中的酮體含量，如表 1 - 8、表 1 - 9所示。表 1 - 8 BALB/c 小鼠肝臟酮體含量（mmol/L）Table 1 - 8 The liver ketone body content in BALB/c mouse （mmol/L）寄生蟲Parasites分組Groups小鼠 BALB/c平均值A(chǔ)veragevalue標(biāo)準(zhǔn)差Standarddeviation變異系數(shù)Coefficientof variation1 2 3 4 5 6急性組PBS 對照組1.01.11.01.21.11.10.91.00.81.01.00.90.9671.0500.0940.0960.0970.091

圖 1 - 2 BALB/c 小鼠肝臟與腦組織酮體含量（mmol/L）注：A：錐蟲組小鼠肝臟酮體含量檢測結(jié)果；B：錐蟲組小鼠腦組織酮體含量檢測結(jié)果；C：弓形蟲組小鼠肝臟酮體含量檢測結(jié)果；D：弓形蟲組小鼠腦組織酮體含量檢測結(jié)果；與空白對照組小鼠肝臟與腦組織酮體含量比較，* P < 0.05；** P < 0.01。Fig. 1 - 2 The liver and brain tissue ketone body content in BALB/c mouse （mmol/L）Note. A: The liver ketone body content test results from mouse of Trypanosoma groups; B: The brain tissue ketone bodycontent test results from mouse of Trypanosoma groups; C：The liver ketone body content test results from mouse ofToxoplasma groups; D：The brain tissue ketone body content test results from mouse of Toxoplasma groups;Compared with the Blank, * P < 0.05；** P < 0.01.1.4 討論1.4.1 錐蟲對小鼠酮體代謝影響討論寄生蟲在不同的宿主中寄生時，其本身生物化學(xué)過程都會隨之改變，因其生活史也較為復(fù)雜，以至于寄生蟲內(nèi)部的生物化學(xué)多種代謝過程也適應(yīng)其生活環(huán)境。包括能量代謝過程、氨基酸代謝過程甚至蟲體形態(tài)的變化過程，于此同時，寄生蟲也必將引起宿主的生物化學(xué)代謝改變。相較于剛地弓形蟲對宿主酮體代謝的影響，錐蟲對宿主影響較小。錐蟲寄生于宿

- 1 BALB/c 小鼠各肝臟與腦組織總 RNA 完整性注：1、4、5：腦組織；2、3、6：肝臟； Integrity of the total RNA from the BALB/c liveNote. 1，4，5: Brain; 2，3，6: Liver;結(jié)果單菌落進(jìn)行普通 PCR 擴(kuò)增后，進(jìn)行 2%檢測如圖 2 - 2 所示。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2829782