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紫莖澤蘭乙醇提取制劑工藝優(yōu)化、臨床試驗及毒理學(xué)相關(guān)研究

發(fā)布時間:2020-09-23 10:02
   螨病是一種動物體表常見的慢性、接觸性寄生蟲病,在如今的養(yǎng)殖行業(yè)中疥螨科或者癢螨科的螨病寄生最為常見,治療螨蟲病的化學(xué)藥物在目前臨床上占主導(dǎo)地位,化學(xué)藥物引來的高殘留、抗性、對環(huán)境危害大等問題已經(jīng)引起全社會的關(guān)注。紫莖澤蘭(Eupatorium adenophorum)作為外來物種之一,它屬于多年生草本植物,原來產(chǎn)地是美洲的墨西哥,隨著人們對這種外來入侵植物的不斷深入研究,它雖然對30個以上的國家?guī)砹松鷳B(tài)環(huán)境危害,但是利用從紫莖澤蘭中提取出來的物質(zhì)卻能是很好的殺滅很多農(nóng)業(yè)害蟲和畜牧寄生蟲,尤其對疥螨病和癢螨病殺滅活性效果好,具有被開發(fā)為植物源殺螨劑的巨大潛力。為了開發(fā)新型治療螨蟲病的藥物制劑,本課題對紫莖澤蘭植物的提取工藝進(jìn)行研究,在此基礎(chǔ)上對提取出來的藥液進(jìn)行簡單的加工處理得到透皮制劑,并對制劑的安全性、臨床殺螨效果、毒理學(xué)進(jìn)行試驗研究。結(jié)果如下:一、紫莖澤蘭乙醇提取工藝研究以殺螨活性成分9-羰基-10,11-去氫澤蘭酮(EuptoxA)為測定指標(biāo),采用熱回流提取法,對乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取次數(shù)、提取時間四個因素進(jìn)行考察,設(shè)計L_9(3~4)正交實驗確定最佳提取工藝條件。結(jié)果為:紫莖澤蘭外用殺螨劑的最佳提取工藝是乙醇的體積分?jǐn)?shù)為95%,料液之比為1:20(g/ml),提取的時間時1h,提取的次數(shù)是3次。二、紫莖澤蘭制劑皮膚安全性和臨床殺螨效果評價采用急性毒性和刺激性試驗,評價了紫莖澤蘭透皮制劑體外用藥的安全性。結(jié)果表明:該制劑外用對動物沒有急性毒性反應(yīng),經(jīng)過完整皮膚組和破損組皮膚的用藥試驗,給藥72 h后沒有出現(xiàn)刺激性。臨床殺癢螨和疥螨效果評價試驗中,設(shè)殺螨透皮劑A、B、C、D組(分別為加氮酮生藥含量為1.0g·mL~(-1)、0.5g·mL~(-1)和不加氮酮生藥含量為1.0g·mL~(-1)、0.5g·mL~(-1),涂擦)、伊維菌素E陽性對照組(含伊維菌素0.2mg,注射)和0.9%生理鹽水F空白對照組(涂擦),殺螨效果最好的是生藥含量為1.0 g·mL~(-1)加氮酮高劑量組。三、紫莖澤蘭制劑的急性毒性試驗研究將昆明種小白鼠250只分成不同組,通過預(yù)試驗確定出小白鼠給藥劑量的大致范圍,然后選取60只,采用灌胃給藥的方式進(jìn)行正式試驗,試驗在給小白鼠灌藥之后,連續(xù)觀察7d,每天要對小白鼠的中毒反應(yīng)情況以及死亡情況進(jìn)行記錄,根據(jù)寇氏法計算出LD_(50)和95%的可信限。試驗結(jié)果為:紫莖澤蘭透皮制劑的LD_(50)為92.68g/kg,LD_(50)的95%可信限87.02~105.15g/kg,能夠引起心、肝、脾、肺、腎和腸等病變。四、紫莖澤蘭制劑的亞慢性毒性試驗研究80只SD大鼠隨機(jī)分4組,每組20只,通過灌胃的方法對大鼠進(jìn)行施藥,劑量大小分別是:1/10LD_(50)高劑量組、1/25LD_(50)中劑量組、1/50LD_(50)低劑量組與0g/kg體重的對照組,連續(xù)灌胃28d。試驗期間觀察臨床狀況,稱量每周大鼠體重并以此調(diào)整灌胃劑量。在試驗結(jié)束后進(jìn)行動物血液學(xué)指標(biāo)的測定并進(jìn)行病理,解剖學(xué)觀察,同時對每組動物的主要臟器進(jìn)行濕重稱量,根據(jù)稱量結(jié)果來進(jìn)行臟器指數(shù)的計算。結(jié)果表明:紫莖澤蘭外用殺螨制劑對大鼠的生長發(fā)育、血液學(xué)、臟器指數(shù)有性別差異性,對大鼠的總體影響不明顯,也沒有規(guī)律性。
【學(xué)位單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S859
【部分圖文】:

紫莖澤蘭素,乙醇,體積分?jǐn)?shù),提取率


1.2.8 數(shù)據(jù)處理用 Excel 作圖,設(shè)計正交試驗對提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。2 結(jié)果與分析2.1 單因素試驗2.1.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對紫莖澤蘭植物中紫荊澤蘭素 A 提取率的由圖 1-2 得出,紫莖澤蘭素 A 的提取率隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增呈現(xiàn)出增加的趨勢,并且在 95%時達(dá)到最高。0.5

紫莖澤蘭素,提取時間,提取率


Fig.1-2The influence ofvolume percentage of ethonal on euptoxA extraction rate2.1.2 提取時間對紫莖澤蘭植物中紫荊澤蘭素 A 提取率的影響由圖1-3得出,紫莖澤蘭素A提取率隨著提取時間的增加而呈現(xiàn)增加趨勢。00.050.10.150.20.250.30.350.40.450.50 2 0 4 0 6 0 8 0 1 0 0莖澤蘭醇提液中紫UEPTXOA取率提乙醇體積分?jǐn)?shù)18

紫莖澤蘭素,提取率,提取時間


圖 1-3 提取時間對紫莖澤蘭素 A 提取率的影響Fig.1-3 The influence of extraction time on euptoxA extraction rate2.1.3 料液比對紫莖澤蘭植物中紫荊澤蘭素 A 提取率的影響由圖 1-4 得出,紫莖澤蘭素 A 的提取率隨著提取時間的增加而呈現(xiàn)不趨勢,在 2h 時達(dá)到最高。00.050.10.150 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5莖澤蘭醇提液中紫提取時間/H0.3

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9 朱s闃

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