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雞傳染性支氣管炎病毒疫苗候選毒株的篩選及評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2020-08-26 10:13
【摘要】:雞傳染性支氣管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的一種急性、接觸性傳染病,雛雞感染可造成高達(dá)30%死亡,還可造成生殖器官的損傷,母雞到產(chǎn)蛋期沒有產(chǎn)蛋高峰,產(chǎn)蛋雞感染,造成產(chǎn)蛋率下降,蛋殼品質(zhì)下降;給養(yǎng)殖業(yè)造成臣大的經(jīng)濟(jì)損失。疫苗免疫是預(yù)防IB最有效的方法之一。然而,因?yàn)镮BV容易變異導(dǎo)致不斷出現(xiàn)新的血清型,且不同血清型之間交叉保護(hù)能力較差,因此研究更適合的疫苗迫在眉睫。為了解我國(guó)當(dāng)前IB的流行現(xiàn)狀,掌握IB優(yōu)勢(shì)流行毒株的基因型和血清型,制備匹配當(dāng)前優(yōu)勢(shì)血清型的疫苗,成為當(dāng)前IB防治工作的重點(diǎn)。本研究從2010年-2013年全國(guó)18個(gè)省份臨床發(fā)病的雞群采集了4855份組織樣品,通過病毒的分離、鑒定后,分析統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示IBV感染普遍存在,4年間 IBV檢出陽性率分別為8.1%、18.1%、15.5%、10.9%。對(duì)其中30株IBV分離株的Sl基因序列系統(tǒng)分析后發(fā)現(xiàn)我國(guó)當(dāng)前優(yōu)勢(shì)流行毒株基因型為L(zhǎng)X4型,占比90%(27/30),27株之間同源性在93.5%-100%,與疫苗毒株H120株的同源性僅為77.6%-78.5%,且裂解位點(diǎn)氨基酸序列也存在明顯差異;表明目前我國(guó)IB流行優(yōu)勢(shì)毒株和常用疫苗毒株基因型不同,且同源性較低。根據(jù)S1基因系統(tǒng)分析結(jié)果結(jié)合病料采集背景,篩選其中5株(JS101024株、SD100426株、JS121019株、BJ100306株和HuN100427株)與3株疫苗毒株(H120株、LDT3株、4/91株)制備單因子血清,通過氣管環(huán)血清交叉中和試驗(yàn)鑒定血清型,計(jì)算相關(guān)性發(fā)現(xiàn)其中3株LX4基因型IBV分離株(JS101024株、SD100426株和HuN100427株)屬于同一血清型(暫命名為JS101024血清型),與目前常用疫苗毒株不屬于同一血清型。致病性研究結(jié)果表明:5株1BV分離株以相同劑量回歸28日齡的SPF雞后,都出現(xiàn)相似的臨床發(fā)病癥狀、病理剖檢和組織病變:但是致死率不同,其中SD100426株(JS101024血清型/LX4基因型)毒力較強(qiáng),致死率40%,可作為攻毒候選株;而同血清型的JS101024株(JS101024血清型/LX4基因型)毒力較弱,致死率為0,抗體產(chǎn)生時(shí)間較其它毒株早3-7天,其F6代種毒在雞胚上的效價(jià)高達(dá)107.16EID50/0.1ml,繁殖性能最好,為最佳疫苗候選株。3株疫苗候選株(JS101024株、SD100426株和BJi00306株)與M41株制備成火活疫苗,免疫SPF雞后,用SD100426株進(jìn)行攻毒保護(hù)試驗(yàn),結(jié)果表明:JS101024株制備的火活疫苗攻毒后100%臨床保護(hù),抗體上升速度快,抗體轉(zhuǎn)陽時(shí)間比其它毒株早7日,且抗體滴度高;較其它毒株疫苗雞只帶毒、排毒時(shí)間短3~7天,該毒株制備的疫苗具有與當(dāng)前IBV優(yōu)勢(shì)流行毒株匹配性好、保護(hù)率高、能顯著降低IBV水平傳播風(fēng)險(xiǎn)的優(yōu)點(diǎn),是優(yōu)秀的疫苗候選株。本研究為篩選匹配IBV流行毒株的疫苗候選株提供了依據(jù),為制定IBV綜合防治措施奠定了叢礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S858.31

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本文編號(hào):2805041

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