【摘要】：雞腸道菌群與宿主呈現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)互作關(guān)系,腸道微生物結(jié)構(gòu)與多樣性變化影響雞的增重和產(chǎn)蛋。目前使用抗生素手段調(diào)節(jié)腸道菌群的弊端不斷擴(kuò)大,而益生菌作為抗生素的有效替代品,其使用時(shí)間、種類等缺少依據(jù)。本研究從季節(jié)環(huán)境變化對(duì)雞腸道菌群影響入手,研究散養(yǎng)蘆花雞腸道菌群季節(jié)變化規(guī)律指導(dǎo)養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)際并篩選鑒定了腸道益生芽孢桿菌。研究?jī)?nèi)容如下。1.隨季節(jié)改變,蘆花雞雞腸道菌群結(jié)構(gòu)變化較大,盲腸、小腸的夏季菌群結(jié)構(gòu)與冬季相比只有66.7%、62.5%的相似度;小腸菌群結(jié)構(gòu)在夏季時(shí)出現(xiàn)明顯變化,小腸內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌乳桿菌占比明顯下降,梭菌類數(shù)量種類提升明顯;菌群豐富度未隨季節(jié)明顯變化,但小腸菌群種類與豐富度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于盲腸。2.通過多樣性指數(shù)分析,盲腸多樣性要明顯高于小腸;相較于雞春季腸道菌群,冬季、夏季的環(huán)境會(huì)導(dǎo)致雞盲腸菌群多樣性降低,小腸菌群多樣性提高;作為營(yíng)養(yǎng)主要吸收部位的小腸,在環(huán)境較為適宜的春季,其菌群香濃指數(shù)與均勻度均為最低,此時(shí)小腸內(nèi)菌群種類數(shù)較少且優(yōu)勢(shì)菌占比非常高。3.盲腸共性菌為乳桿菌、擬桿菌、梭菌類,小腸共性菌主要為乳桿菌。盲腸共性菌隨季節(jié)變化不大,小腸不同種類乳桿菌占比隨季節(jié)變化較大;冬季、夏季環(huán)境會(huì)造成特異腸桿菌、梭菌增多,春季時(shí)會(huì)出現(xiàn)更多的乳桿菌。4.共從蘆花雞腸道內(nèi)篩選鑒定到6種芽孢菌,其中一株為球形賴氨酸芽孢桿菌(Lysinibacillus sphaericus),其余5株分別為蕈狀芽孢桿菌(Bacillus mycosis)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、彎曲芽孢桿菌(Bacillus flexus)、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、馬氏芽孢桿菌(Bacillus marcorestinctum)。結(jié)果表明季節(jié)改變對(duì)散養(yǎng)蘆花雞腸道菌群多樣性與結(jié)構(gòu)影響明顯,盲腸菌群豐富度與多樣性均高于小腸菌群。散養(yǎng)蘆花雞腸道菌群季節(jié)變化規(guī)律:冬季、夏季腸道主要益生菌乳桿菌占比下降,夏季小腸變化最為明顯并出現(xiàn)較多梭菌增值;盲腸、小腸菌群多樣性呈現(xiàn)相反變化規(guī)律;較適宜生長(zhǎng)發(fā)育的春季,蘆花雞小腸菌群種類減少,益生乳桿菌占比最高。腸道芽孢桿菌還需益生性、安全性鑒定,用于微生態(tài)制劑研制。
【學(xué)位授予單位】：河北科技師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S831.89
【圖文】：

圖 2-1 樣品多樣性算法Fig 2-1 Sample Diversity Algorithms其中，pi 為凝膠上單一條帶的灰度值在該凝膠上所有條帶總灰率，N 為 DGGE 圖譜單一泳道上所有條帶的豐度，Ni 為第 i 條樣品中所有條帶數(shù)目總和。豐富度 R 用條帶數(shù)表示。結(jié)果1 雞腸道菌群基因組 DNA 提取使用試劑盒、CTAB/NaCl、CTAB 三種方法提取到的雞腸道內(nèi) 經(jīng)瓊脂糖電泳后得到大小約為 23kb 條帶，符合預(yù)計(jì)基因組 DNA如圖 2-2�；蚪M DNA 純度用 OD260/280 表示，結(jié)果見表 2-5，比值越接 純度越高。試劑盒法提取的基因組 DNA 濃度只有 46ng/μL，

圖 2-2 不同方法提取的基因組 DNA 電泳圖Fig. 2-2 Genomic DNA electrophoresis maps extracted by different methods1.CTAB/NaCl 法；2.試劑盒法；3.CTAB/NaCl 法 DNA 稀釋；4.CTAB 法；5.CTAB 法 DN稀釋采用 CTAB 法提取不同季節(jié)散養(yǎng)蘆花雞小腸盲腸菌群基因組 DNA，結(jié)果圖 2-3。由圖可知在約 23kb 處，發(fā)現(xiàn)與目的條帶大小相符、特異性良好、濃純度均符合要求的基因組 DNA 可以用于后續(xù)的 DNA 特異性擴(kuò)增。

圖 2-2 不同方法提取的基因組 DNA 電泳圖Fig. 2-2 Genomic DNA electrophoresis maps extracted by different methoTAB/NaCl 法；2.試劑盒法；3.CTAB/NaCl 法 DNA 稀釋；4.CTAB 法；5.CTA稀釋采用 CTAB 法提取不同季節(jié)散養(yǎng)蘆花雞小腸盲腸菌群基因組 DNA 2-3。由圖可知在約 23kb 處，發(fā)現(xiàn)與目的條帶大小相符、特異性良度均符合要求的基因組 DNA 可以用于后續(xù)的 DNA 特異性擴(kuò)增。

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本文編號(hào)：2780844