規(guī);N雞場沙門菌流行病學(xué)調(diào)查及噬菌體新型生物消減措施評估
發(fā)布時(shí)間:2020-07-20 21:30
【摘要】:據(jù)WHO統(tǒng)計(jì),沙門菌是世界范圍內(nèi)危害食品安全的主要病原微生物。沙門菌污染的雞肉及其產(chǎn)品是人類沙門菌病的主要原因之一。我國是家禽及其相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)和食用的大國,沙門菌防控更應(yīng)受到重視。然而在雞的飼養(yǎng)過程中,沙門菌常呈潛伏感染,易被忽視。規(guī);N雞場種雞養(yǎng)殖是家禽生產(chǎn)鏈的源頭,也是沙門菌防控的重要環(huán)節(jié),加強(qiáng)健康的種雞源頭沙門菌防控有益于促進(jìn)家禽生產(chǎn)鏈的發(fā)展,以保證我國“從農(nóng)場到餐桌”健康食品供應(yīng)。本研究通過對國內(nèi)三家規(guī);N雞場的沙門菌流行病學(xué)進(jìn)行調(diào)查,揭示規(guī)模化種雞場沙門菌流行規(guī)律,尋找沙門菌在種禽場內(nèi)流行的重要防控環(huán)節(jié),并探索噬菌體作為新型生物消減措施的可行性。1規(guī);N雞場沙門菌流行病學(xué)調(diào)查及其特性分析從三家規(guī);N雞場收集780份血清樣品進(jìn)行沙門菌血清流行病學(xué)調(diào)查,三家種禽場其沙門菌血清感染陽性率分別為,A種雞場5.30%,B種雞場16.72%,C種雞場為11.57%。在沙門菌病原流行病學(xué)調(diào)查中,從三家規(guī);N雞場,采集樣品2,033份,包括病死雞樣品15份,死胚樣品930份,環(huán)境樣品632份,收集送檢菌株456份,共分離539株沙門菌,死胚的分離率為12.04%,病死雞和環(huán)境樣品分別為6.67%和1.71%,送檢菌株中91.66%鑒定為沙門菌。三家種雞場沙門菌分離率存在明顯差異,除了送檢菌株樣品外,A種雞場沙門菌分離率為1.49%,B種雞場分離率為23.85%,C種雞場分離率為17.2%。血清型鑒定結(jié)果顯示腸炎沙門菌為三家種雞場的主要血清型,占比達(dá)96.10%,其它沙門菌為3.90%。抗生素耐藥性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在所測沙門菌分離株中,對萘啶酸耐藥比例最高,達(dá)99.13%;其次對呋喃妥因、氨芐西林、鏈霉素、恩諾沙星、阿莫西林耐藥率分別為72.60%、62.60%、62.17%、44.78%、36.08%。其余藥物耐藥率均在8.26%以下。毒力基因檢測結(jié)果顯示,122株分離株中120株毒力基因譜一致(98.36%),僅有2株(1.64%)例外。22株腸炎沙門菌分離株CRISPR測序結(jié)果顯示,其CRISPR類型與P1251209腸炎沙門菌一致,同為SET]類。對22株腸炎沙門菌分離株進(jìn)一步進(jìn)行全基因組測序,其結(jié)果表明來自不同種雞場的腸炎沙門菌分離株之間同源性達(dá)到99.8%,可能為同一克隆簇。對來源于同一種雞場不同環(huán)節(jié)的57株沙門菌進(jìn)行PFGE分型實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明該種雞場的水源及環(huán)境為沙門菌在種禽場內(nèi)流行的主要來源。2不同化學(xué)消毒劑和噬菌體新型生物消減措施評估化學(xué)消毒劑是生產(chǎn)中常見的防控措施,本實(shí)驗(yàn)選用五種類型七種不同的化學(xué)消毒劑開展沙門菌消減能力評估。通過檢測化學(xué)消毒劑的最小抑菌濃度(MIC)與最小殺菌濃度(MBC)評估其對沙門菌的消減能力,結(jié)果表明,五種不同類型的化學(xué)消毒劑對腸炎沙門菌、雞白痢沙門菌、印第安納沙門菌、鼠傷寒沙門菌、阿貢那沙門菌均有一定抑菌效果,其MIC分別為癸甲溴銨10.42 μg/mL,過硫酸氫鉀250μg/mL,二氯異氰尿酸鈉500 μg/mL,聚維酮碘5,000μμg/mL,稀戊二醛312.5μg/mL,戊二醛癸甲溴銨31.25μg/mL,戊二醛苯扎溴銨62.5μg/mL。其MBC結(jié)果除稀戊二醛濃度由312.5μg/mL變?yōu)?25 μg/mL外,其余結(jié)果與MIC結(jié)果一致。本研究使用噬菌體作為新型沙門菌特異性生物制劑進(jìn)行消減能力評估,噬菌體LP31在25℃與37℃條件下,LP31可完全殺滅水中的沙門菌。噴灑噬菌體對地面環(huán)境內(nèi)的沙門菌進(jìn)行消減能力評估結(jié)果顯示,與對照組相比,噬菌體LP31、SP55均顯著減少地面環(huán)境內(nèi)沙門菌,減少量分別達(dá)到0.951、0.643 logCFU/mL?诜删w懸液對雞體內(nèi)沙門菌也具有顯著的消減能力,與對照組相比,噬菌體LP31在雞體內(nèi)最高可降低3.021logCFU/mL。綜上所述,我國種禽場的沙門菌感染比較嚴(yán)重,其中腸炎沙門菌為主要血清型,水源及環(huán)境是沙門菌傳播的重要環(huán)節(jié),噬菌體具有顯著消減沙門菌的能力,能夠作為新型生物消毒劑,減少沙門菌傳播。
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S858.31
【圖文】:
其CRISPR類型全部與NCBI庫中P1251209腸炎沙門菌(提交號:逡逑AM933172)邋—致(表邋1-10),即邋CRISPR-1邋區(qū)均包含有邋Entl-8邋的邋8邋個(gè)邋spacer;逡逑而CRISPR-2區(qū)均包含有EntBO-9的10個(gè)spacer邋(圖1-1),即全部為SET1型。逡逑s邐Strain逡逑;邋Ujiuujujujujujujujujujujuiui邋luujuJuJ逡逑■■■■■■■■■■■■■■■■■I邋A4逡逑AS逡逑■■■■■■■■■■■■■■■■■■邋A13逡逑I媝nitvii梙Hi—梙
本文編號:2763976
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S858.31
【圖文】:
其CRISPR類型全部與NCBI庫中P1251209腸炎沙門菌(提交號:逡逑AM933172)邋—致(表邋1-10),即邋CRISPR-1邋區(qū)均包含有邋Entl-8邋的邋8邋個(gè)邋spacer;逡逑而CRISPR-2區(qū)均包含有EntBO-9的10個(gè)spacer邋(圖1-1),即全部為SET1型。逡逑s邐Strain逡逑;邋Ujiuujujujujujujujujujujuiui邋luujuJuJ逡逑■■■■■■■■■■■■■■■■■I邋A4逡逑AS逡逑■■■■■■■■■■■■■■■■■■邋A13逡逑I媝nitvii梙Hi—梙
本文編號:2763976
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