【摘要】：現(xiàn)代生產(chǎn)中,給奶畜飼喂高精料日糧來滿足泌乳能量需求的飼喂模式已成為一種流行趨勢(shì),但反芻動(dòng)物攝入過多的高精料會(huì)導(dǎo)致瘤胃中揮發(fā)性脂肪酸的積累和脂多糖等有害物質(zhì)的釋放增加。揮發(fā)性脂肪酸的累積會(huì)增加亞急性瘤胃酸中毒(subacute ruminal acidosis,SARA)的發(fā)病率;脂多糖經(jīng)門靜脈入肝臟,會(huì)影響肝臟形態(tài)和代謝功能,并誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡,使肝臟功能減弱;脂多糖經(jīng)體循環(huán)進(jìn)入脾臟還會(huì)對(duì)脾臟造成損傷,從而影響反芻動(dòng)物的健康。本研究以關(guān)中奶羊?yàn)閯?dòng)物模型,模擬實(shí)際生產(chǎn)中的喂養(yǎng)模式,通過在日糧中添加高比例的精料誘導(dǎo)SARA模型,研究SARA對(duì)泌乳期關(guān)中奶山羊肝脾炎癥因子和肝脾細(xì)胞凋亡的影響,以期為奶山羊SARA與肝脾炎癥反應(yīng)關(guān)系和細(xì)胞凋亡的研究積累資料,結(jié)果對(duì)奶山羊養(yǎng)殖中高精料日糧的使用和實(shí)際生產(chǎn)中奶牛和奶山羊等反芻動(dòng)物的養(yǎng)殖有一定的指導(dǎo)意義。本研究的內(nèi)容和結(jié)果如下:試驗(yàn)選用16只體重相近、健康狀況良好,2-3胎齡的奶山羊,隨機(jī)分為對(duì)照組和高精料組,每組8只,對(duì)照組奶山羊飼喂精粗比為35∶65的日糧,高精料組奶山羊飼喂精粗比為65∶35的日糧,試驗(yàn)期19周,在試驗(yàn)期間所有奶山羊可自由飲水。1.在試驗(yàn)的第7周、第9周、第11周、第13周、第15周、第17周和第19周,所有奶山羊頸靜脈采血進(jìn)行血常規(guī)分析,19周的血同時(shí)進(jìn)行血液生化分析。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,高精料組奶山羊白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞在整個(gè)試驗(yàn)過程中均無顯著變化,而紅細(xì)胞在試驗(yàn)第19周時(shí)顯著升高,紅細(xì)胞體積分布寬度在試驗(yàn)中期有顯著升高(P0.05),其他血常規(guī)指標(biāo)均無顯著變化(P0.05);所測(cè)的生化指標(biāo)均無顯著變化(P0.05),提示,高精料對(duì)奶山羊的血常規(guī)和血液生化指標(biāo)無顯著影響,但可提高血液中紅細(xì)胞數(shù)量。2.試驗(yàn)結(jié)束時(shí)采集肝、脾組織制作HE切片進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,高精料組奶山羊肝細(xì)胞腫大、發(fā)生顆粒變性和空泡變性,中央靜脈有大量淋巴細(xì)胞浸潤;脾臟紅髓中含鐵血黃素含量降低,但結(jié)構(gòu)無肉眼可見變化;提示SARA對(duì)泌乳奶山羊肝臟造成炎性損傷,泌乳奶山羊脾臟中含鐵血黃素含量下降。3.采集所有奶山羊肝脾組織樣品,采用RT-qPCR檢測(cè)肝臟和脾臟中炎性因子及其TLR4調(diào)控通路重要蛋白的基因表達(dá)。結(jié)果顯示,高精料組奶山羊肝臟組織中TLR4、NF-κB2和IL-6的表達(dá)量顯著升高(P0.05),其他基因變化不顯著(P0.05);脾臟組織中TLR4基因表達(dá)顯著升高(P0.05),NF-κB2基因表達(dá)顯著下降(P0.05),抗炎因子IL-10和促炎因子TNF-β基因表達(dá)顯著升高(P0.05),其他均無顯著性變化。4.采用Western blot技術(shù)檢測(cè)肝脾組織中TLR4信號(hào)通路重要蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示,在肝臟和脾臟中,MAPK通路中的JNK、ERK、P-38蛋白表達(dá)量均無顯著變化(P0.05),NF-κB通路中的NF-κB蛋白無顯著變化(P0.05)。5.通過RT-qPCR檢測(cè)肝臟和脾臟中凋亡通路上重要凋亡調(diào)控蛋白bcl-2和Bax以及凋亡執(zhí)行蛋白caspase3、caspase8和caspase9基因的表達(dá),結(jié)果顯示,高精料組奶山羊肝臟和脾臟中的caspase9基因表達(dá)量均顯著升高(P0.05)。采用Western blot技術(shù)檢測(cè)肝臟組織caspase3蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,高精料組奶山羊肝脾組織caspase3蛋白表達(dá)無明顯變化。本研究結(jié)果顯示,長(zhǎng)期給泌乳奶山羊飼喂高精料會(huì)導(dǎo)致奶山羊發(fā)生SARA,SARA會(huì)使血液中紅細(xì)胞數(shù)量增加;使肝細(xì)胞發(fā)生顆粒變性和空泡變性,使肝小葉中淋巴細(xì)胞浸潤,導(dǎo)致肝臟中IL-6基因表達(dá)升高,脾臟中TNF-β基因表達(dá)升高,脾臟中含鐵血黃素沉著降低,脾臟中NF-κB基因表達(dá)量降低,表明長(zhǎng)期給泌乳奶山羊飼喂高精料日糧,導(dǎo)致奶山羊發(fā)生SARA,產(chǎn)生的LPS經(jīng)TLR4受體通路導(dǎo)致肝脾臟中IL-6、TNF-β等炎性因子表達(dá)升高,從而會(huì)對(duì)奶山羊肝脾臟造成炎性損傷。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S858.27
【圖文】：

亞急性瘤胃酸中毒對(duì)泌乳期奶山羊表觀指標(biāo)及肝脾形態(tài)結(jié)構(gòu)診斷結(jié)果中，隨時(shí)觀察奶山羊臨床癥狀。前期高精料組奶山羊狀等與對(duì)照組相比無明顯差異，到試驗(yàn)后期，高精料組佳，糞便形態(tài)呈扁狀異常。于試驗(yàn)的第 0 周、1 周，4 周18 周和 19 周采集所有奶山羊的乳汁，監(jiān)測(cè)乳脂率，結(jié)果料飼喂時(shí)間的延遲，高精料組奶山羊乳汁中的乳脂率不 19 周，與對(duì)照組相比差異顯著，（P < 0.05）。試驗(yàn)結(jié)束日料導(dǎo)致高精料組奶山羊糞便 pH 下降（圖 2-2）。表明

與對(duì)照組相比差異顯著，（P < 0.05）。試驗(yàn)導(dǎo)致高精料組奶山羊糞便 pH 下降（圖 2-2）。表圖 2-1 高精料日糧對(duì)泌乳奶山羊乳脂率的影響ect of high-precision diet on milk fat percentage of lactatin著（P < 0.05），（n = 8）。P 值是“均值 ± SEM”（以下ant difference between groups （P < 0.05）, （n = 8）

圖 2-3 SARA 對(duì)肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響Fig. 2-3 Effect of SARA on liver tissue structureA 和 B 是對(duì)照組，C 和 D 為高精料組，其中 A 和 C 放大倍數(shù)為（100×）；B 和 D 放大倍數(shù)為（400×）A and B are the control group, C and D are the high concentrate group, wherein themagnifications of A and C are（100×）;B and D magnifications are（400×）

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本文編號(hào)：2747904