【摘要】：雞大腸桿菌病是由禽致病性大腸桿菌引起。臨床表現(xiàn)為敗血癥、氣囊炎、腹膜炎、肝周炎、心包炎、眼球炎、關(guān)節(jié)炎等,發(fā)病率為11%-69%,死亡率為3.8%-72.9%,對養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的損失。大腸桿菌致病菌株多,其疾病病變復(fù)雜。因此,該病及時診斷和菌株的準確分型,對雞大腸桿菌病的控制具有重要意義。從病雞內(nèi)臟器官和雞舍空氣分離菌株,觀察菌落、菌體形態(tài),提取分離株DNA,進行16S rDNA擴增,經(jīng)測序比對對分離株鑒定。同時,觀察病雞剖檢病變,并采集病料制作常規(guī)石蠟切片,進行組織病理學(xué)觀察。結(jié)果顯示分離株在營養(yǎng)瓊脂上菌落呈圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色;伊紅美藍瓊脂板上菌落呈金屬色光澤,圓形棕色菌落;革蘭染色陰性兩極著色的短桿菌。與GeneBank大腸桿菌同源性為98.2%-99.3%。經(jīng)序列分析結(jié)合菌體菌落形態(tài),共鑒定65株大腸桿菌,其中42株來源臨床,23株來源環(huán)境。病雞剖檢發(fā)現(xiàn)肝臟腫大、有纖維素性滲出、氣囊渾濁、腹腔內(nèi)有卵黃樣物質(zhì);組織觀察發(fā)現(xiàn)肝外膜增厚,表面覆蓋纖維性偽膜,在血管周圍及匯管區(qū),炎性細胞增多;心肌外膜增厚,表面有大量纖維性滲出,炎性細胞浸潤,心肌纖維排列紊亂,個別心肌纖維斷裂。病理變化結(jié)合大腸桿菌的分離鑒定,對雞大腸桿菌病進行診斷。對65株大腸桿菌進行多位點序列分型,同時對毒力基因、血清型、藥敏進行分析,并探討基因型與致病基因、血清型、耐藥間的關(guān)系。結(jié)果顯示65株大腸桿菌分為32個序列型(sequence types,ST)。其中已知ST為13個,新ST為19個。32個ST型在數(shù)據(jù)庫中屬于9個同源復(fù)合體和2個獨特型。通過UPGMA分為5個群,14個單獨型。雞舍空氣分離株以ST-21為主,肛拭子分離株以nST-8為主,成年病雞分離株以ST-88為主,病雛雞分離株以nST-11為主,不同來源的ST型除個別菌株有交叉外,其余均不相同,說明不同來源的分離株其主要的ST型不同,大腸桿菌ST型的種類、優(yōu)勢型與其寄生的環(huán)境和宿主日齡不同有關(guān)。22株大腸桿菌血清型共有9種、ST型有14種。其中雞舍空氣分離株有3種血清型7種ST型;成年病雞分離株有6種血清型8個ST型。成年病雞分離株血清型包含雞舍空氣分離株血清型,但基因型只有個別有交叉。從結(jié)果上可以看出ST型分辨力更高,更精細。23株大腸桿菌(14種ST型)對6類12種抗生素進行耐藥分析。其中林可胺類(Lincosamides,LINs)耐藥率最高,達100%,β-內(nèi)酰胺類(Beta-Lactams antibiotics,BLs)為95.65%,四環(huán)素類(Tetracycline,TCs)為91.30%,對氨基糖苷類(Aminoglycoside antibitics,AGs)和大環(huán)內(nèi)酯類(Macrolides antibiotics,MALs)為86.96%,喹諾酮類(Quinolione,QLs)最低,為82.61%。形成18種耐藥譜。65株大腸桿菌的glgP、menA、fimC、fimH檢出率為100%,evgA檢出率為95.40%,traB檢出率為33.80%。65株分離株形成有3個毒力譜,以glgP-menA-evgA-fimC-fimH毒力譜為主。
【學(xué)位授予單位】：河北工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S852.61
【圖文】：

12圖 2-1 雞的大體解剖圖A、B 肝臟、心包表面有纖維素性物質(zhì)；C、D 腹腔內(nèi)有卵黃樣物質(zhì)；E、氣囊壁增厚有干酪樣物質(zhì)；F、對照雞肝臟；箭頭是指示說明。Fig. 2-1 Gross anatomy of chickenThe liver of A and B, the surface of the pericardium has a cellulose substance; C, D is a yolk-likesubstance in the abdominal cavity; E, the wall of the air bag is thickened with a cheese-likesubstance; and F, the liver of the control chicken; The arrow is an indication.

圖 2-2 肝臟病理學(xué)觀察A、肝外膜增厚；B、炎性細胞增多、竇間隙增大；C、肝出血、空泡增多；D、E、F 肝細胞內(nèi)炎性細胞浸潤；G、H 對照組肝臟組織切片；箭頭是指示說明。Fig. 2-2 Liver pathology observationA, The thickening of the adventitia of the liver; B, the increase of inflammatory cells and theincrease of the interstitial space; C, the bleeding of the liver, the increase of vacuoles; Theinfiltration of inflammatory cells in D, E and F hepatocytes; G, H control group liver tissue sectionThe arrow is an indication.A B

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本文編號：2733634