發(fā)布時間：2020-06-27 10:18

【摘要】：白藜蘆醇具有豐富的生理功能和較強的生物學(xué)活性。然而其水溶性差,且在溶液中的穩(wěn)定性受到各種因素的影響,這些原因限制了白藜蘆醇作為藥品的開發(fā)和應(yīng)用。本研究以改善白藜蘆醇難以分散混懸于水中的特點,保證其溶液中的穩(wěn)定性為目標(biāo),研制白藜蘆醇干混懸劑(RDS),在此基礎(chǔ)上,以小鼠和豬作為研究對象,評價其對免疫功能的影響,為白藜蘆醇新獸藥的研制奠定基礎(chǔ),主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1白藜蘆醇干混懸劑的制備和評價采用單因素法和正交試驗篩選出合適的輔料用于制備白藜蘆醇干混懸劑,從性狀,鑒別,檢查,含量和穩(wěn)定性等方面對RDS進(jìn)行了質(zhì)量評價;采用高效液相色譜法分析含量并研究了RDS在7天內(nèi)的含量變化,再分散性,沉降體積比等指標(biāo)。結(jié)果表明RDS符合干混懸劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),7天內(nèi)再分散性較好,沉降體積比和含量變化均符合要求,在高溫高濕和光照影響下穩(wěn)定性良好。2白藜蘆醇干混懸劑對小鼠免疫功能的影響采用腹腔注射環(huán)磷酰胺法建立小鼠免疫功能低下的模型。共設(shè)立7個組:空白組,即健康小鼠組,不給藥;模型組,即免疫低下小鼠,不給藥;陽性藥物組,即免疫低下小鼠,分別灌胃黃芪多糖粉50mg/kg b.w.和紫錐菊末250mg/kg b.w.;高中低劑量組,即免疫低下小鼠分別灌胃RDS 0.88g/kg b.w、1.67g/kg b.w、3.33g/kg b.w。一周后檢測小鼠臟器系數(shù)、T淋巴細(xì)胞亞群的變化、脾淋巴細(xì)胞增殖活性及細(xì)胞因子水平等。結(jié)果表明,環(huán)磷酰胺造模顯著降低了小鼠的各項免疫指標(biāo),而RDS給藥能顯著提高免疫抑制小鼠的脾臟指數(shù),恢復(fù)環(huán)磷酰胺造成的輔助/誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞(CD3+CD4+)比抑制/細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CD3+CD8+)比值的下降,顯著提高小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖活性,提高細(xì)胞因子白介素-2(IL-2)的釋放。證明RDS對于免疫低下的小鼠有良好的增強免疫的作用。分別采用醋酸致小鼠腹腔通透性增加模型,二甲苯致小鼠耳腫脹模型,腹股溝植入棉球致小鼠肉芽腫模型評價RDS對于不同炎癥反應(yīng)的作用。結(jié)果表明,RDS能顯著抑制小鼠的腹腔通透性增加程度和耳腫脹程度,并降低棉球所致的肉芽腫重量。RDS對于急性炎癥和慢性炎癥均表現(xiàn)出了良好的抗炎活性。3白藜蘆醇干混懸劑對仔豬免疫功能的影響采用28日齡的健康仔豬,灌胃不同劑量的RDS 14天,檢測仔豬的生長性能,注射疫苗后產(chǎn)生的抗體水平,血清中免疫球蛋白含量和細(xì)胞因子水平,淋巴細(xì)胞的增殖活性,血常規(guī)和生化指標(biāo)的變化情況等,評價制劑對于仔豬免疫功能的影響。結(jié)果表明,RDS(0.1-0.33g/kg b.w.)顯著提高了外周血淋巴細(xì)胞和脾淋巴細(xì)胞的增殖活性,提高了仔豬在豬瘟疫苗(CSFV)和豬口蹄疫疫苗(FMDV)刺激下產(chǎn)生的抗體水平,顯著提高了仔豬血清中免疫球蛋白IgG和IgM的含量(p0.05)。RDS還能增強血清的總抗氧化能力;促進(jìn)干擾素-γ(IFN-γ)的釋放,抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的釋放。RDS對仔豬的血常規(guī)和生化指標(biāo)無明顯影響。表明了RDS對增強仔豬免疫功能具有良好的效果。綜上所述,白藜蘆醇干混懸劑能夠改善白藜蘆醇難以分散混懸于水中的特點,具有良好的穩(wěn)定性;對于免疫抑制小鼠具有顯著的增強免疫功能的效果,對于急性炎癥和慢性炎癥都有良好的抑制作用;能顯著增強仔豬的免疫功能,提高免疫疫苗后血清中的抗體水平,有望進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用于獸醫(yī)臨床。
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S853.73
【圖文】：

圖 2-1 白藜蘆醇的濃度-峰面積的線性關(guān)系g.2-1 The linear relationship of concentration - peak area of re的測定結(jié)果供試品溶液，甲醇稀釋，過濾，進(jìn)樣 10μl, 注入高效液測定峰面積。按照回歸曲線方程計算含量。為三批樣品的白藜蘆醇含量分別為 32.2mg/g，32.3mg中的含量要求。R2 = 0.999201000000020000000300000004000000050000000600000000 20 40 60 80 100 120

的測定結(jié)果供試品溶液，甲醇稀釋，過濾，進(jìn)樣 10μl, 注入高效液測定峰面積。按照回歸曲線方程計算含量。為三批樣品的白藜蘆醇含量分別為 32.2mg/g，32.3mg中的含量要求。圖 2-2 標(biāo)準(zhǔn)品的 HPLC 圖譜Fig.2-2 HPLC Atlas of standard products

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 曹燁;關(guān)新強;徐志懿;高秉仁;;白藜蘆醇對心血管保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年23期

2 騫秀芳;郭U

本文編號：2731699