【摘要】：抗苗勒氏管激素(Anti-mullerian hormone,AMH)可以作為評(píng)價(jià)山羊卵巢儲(chǔ)備功能的可靠指標(biāo),研究發(fā)現(xiàn)不同人種其AMH基因多態(tài)性存在著差異,并且AMH基因多態(tài)性影響著卵巢的儲(chǔ)備功能。那么在山羊繁殖生產(chǎn)中,不同的山羊品種是否也會(huì)因AMH基因多態(tài)性的不同造成山羊卵巢儲(chǔ)備功能差異,從而造成繁殖性能差異?目前,國(guó)內(nèi)尚無(wú)有關(guān)山羊AMH基因分子水平變異影響卵巢功能儲(chǔ)備的相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)以大足黑山羊、內(nèi)蒙古絨山羊、波爾山羊、努比山羊等4個(gè)山羊品種(遺傳資源)為研究對(duì)象。首先通過PCR-SSCP技術(shù)分別對(duì)4個(gè)山羊品種(每個(gè)品種50只)共200只個(gè)體進(jìn)行AMH單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)分析,確定其是否存在AMH基因多態(tài)性差異。再采集大足黑山羊、內(nèi)蒙古絨山羊和波爾山羊的心、肝、脾、肺、腎和卵巢等組織,采用RT-PCR分析不同品種的各個(gè)器官AMH的表達(dá)差異。最后對(duì)4個(gè)品種的山羊進(jìn)行頸靜脈采血,采用ELISA法檢測(cè)不同品種血液中AMH的水平以及9日齡、15日齡、31日齡、6月齡、1歲、2歲和3歲的大足黑山羊個(gè)體間血液中AMH水平。為研究AMH對(duì)山羊卵巢儲(chǔ)備功能影響的分子機(jī)制提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支撐。本研究所得結(jié)果如下:1.PCR-SSCP分析發(fā)現(xiàn),大足黑山羊、內(nèi)蒙古絨山羊、波爾山羊、努比山羊4個(gè)品種間AMH基因及其受體基因AMHR2無(wú)多態(tài)性差異。2.針對(duì)NCBI上查找到的rs662076763、rs649255341、rs647977151、rs663303947、rs672197988和rs650783324這6個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行PCR產(chǎn)物重測(cè)序。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)這6個(gè)位點(diǎn)沒有發(fā)生突變。3.山羊中AMH基因只在卵巢中表達(dá),在其他器官中不表達(dá),且大足黑山羊、內(nèi)蒙古絨山羊、波爾山羊、努比山羊AMH m RNA表達(dá)無(wú)顯著差異(P0.05)。4.在哺乳期,大足黑山羊與努比山羊血液中AMH水平?jīng)]有差異(P0.05),波爾山羊與內(nèi)蒙古絨山羊液中AMH水平?jīng)]有差異(P0.05),但大足黑山羊、努比山羊與波爾山羊、內(nèi)蒙古絨山羊血液中AMH含量有著極顯著差異(P0.01)。在6月齡時(shí),大足黑山羊與內(nèi)蒙古絨山羊血液中AMH激素水平并無(wú)顯著差異(P0.05),波爾山羊比大足黑山羊和努比亞山羊AMH水平分別高12.6%(P0.05)和36.7%(P0.01)。成年期,大足黑山羊與波爾山羊、努比山羊和內(nèi)蒙古絨山羊血液中AMH并沒有顯著差異(P0.05),但波爾山羊和努比山羊血液中AMH含量分別比內(nèi)蒙古絨山羊血液中含量高13.5%和15.9%(P0.05)。5.在大足黑山羊中,隨著年齡的增大AMH激素的水平呈逐漸下降的趨勢(shì)。9日齡的AMH水平分別比6月齡、1歲、2歲和三歲高13.9%,15.2%,29.4%和32.1%(P0.01)本研究證實(shí)了在山羊中AMH只在卵巢中表達(dá),在其他器官不表達(dá)。且不同山羊品種AMH及其受體基因AMHR2在DNA序列上無(wú)差異,在m RNA表達(dá)上沒有差異,但不同品種的山羊在AMH激素水平卻存在差異,且同一品種不同日齡血液中AMH水平也有差異,這說明AMH基因在轉(zhuǎn)錄后激素合成時(shí)存在著差異,這也提示了后期要從AMH轉(zhuǎn)錄后水平上研究AMH表達(dá)調(diào)控機(jī)理。
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S827
【圖文】：

圖 4-1 山羊基因組 DNA4-1 Extraction result of genomic DNA i擴(kuò)增出 AMH（圖 4-2）和 AMH性條帶。可以采用 AMH 和 AM圖 4-2 AMH PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物1-6 為 PCR 產(chǎn)物，M 為 markerFig.4-2 PCR production of AMH1-6show PCR production, M shows m

可以看出 DNA 條帶清晰，無(wú)拖帶圖 4-1 山羊基因組 DNAg.4-1 Extraction result of genomic DNA in功擴(kuò)增出 AMH（圖 4-2）和 AMH異性條帶�？梢圆捎� AMH 和 AM

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2726566