【摘要】：豬流感(Swine influenza,SI)是由豬流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的人畜共患傳染病,其臨床綜合征主要是呼吸道癥狀。引起豬流感的病原為豬流感病毒,屬于正黏病毒科,甲型流感病毒屬成員。豬流感病毒可按照病毒粒子表面對(duì)紅細(xì)胞有凝集性的血凝素和能將吸附在細(xì)胞表面的病毒粒子解脫下來(lái)的神經(jīng)氨酸酶糖蛋白進(jìn)行分類,共有16個(gè)H亞型和9個(gè)N亞型。根據(jù)HA和NA的不同,又可以將其分為很多血清亞型,目前主要存在的是H1N1、H1N2、H3N2三種豬流感亞型。豬、禽和人流感病毒通過(guò)HA蛋白上的凝集素位點(diǎn)都可以跟豬上皮細(xì)胞上的含唾液酸的糖蛋白受體結(jié)合。流感病毒基因在豬的身上發(fā)生重新的組合而產(chǎn)生新的病毒株,進(jìn)而流感病毒易于感染人類細(xì)胞,這種后果是很嚴(yán)重的,對(duì)人生命健康造成嚴(yán)重危害,對(duì)于該病的預(yù)防和治療也帶來(lái)很大挑戰(zhàn),因此具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。亞洲、歐洲、歐洲等的許多國(guó)家和地區(qū)都發(fā)生過(guò)該病,對(duì)養(yǎng)豬行業(yè)造成了巨大的損失。因此開展豬流感病毒的調(diào)查研究,進(jìn)而了解豬流感病毒在我國(guó)的基因進(jìn)化和致病性非常重要。為探究SIV在山東省豬群中流行情況及毒株的基本特性,本實(shí)驗(yàn)室在2016年從山東省部分地區(qū)采集鼻拭子樣品接種10日齡SPF雞胚進(jìn)行病毒的分離,經(jīng)過(guò)血凝試驗(yàn),RT-PCR擴(kuò)增NP或M基因,陽(yáng)性即確定為豬流感病毒,接著用分型引物進(jìn)行病毒亞型的鑒定,判定為H3N2亞型,命名為A/Swine/Shandong/JN1/2016(H3N2)。運(yùn)用RT-PCR擴(kuò)增豬流感基因的8個(gè)片段,進(jìn)行全基因組測(cè)序及序列分析,發(fā)現(xiàn)PA,NS和M基因來(lái)自于2009年H1N1大流行的流感病毒(pdm/09 H1N1)分支PB2,HA和NA來(lái)自于北美三重排流感病毒,NP基因來(lái)自歐洲類禽型流感病毒,PB1來(lái)自類人型流感病毒。為深層次了解病毒的特性,我們選用BALB/c小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物,以10~6EID_(50)/只感染劑量滴鼻感染6周齡雌性BALB/c小鼠,觀察小鼠的活動(dòng),死亡的情況,記錄小鼠的體重變化,采集小鼠臟器進(jìn)行病毒滴度測(cè)定,觀察小鼠內(nèi)臟的組織病理學(xué)變化,對(duì)該毒株特性進(jìn)行分析。結(jié)果顯示,小鼠活動(dòng)性下降,采食量減少,體重下降。臟器的滴定結(jié)果,在肺臟和鼻甲中能夠檢測(cè)到病毒復(fù)制,而在腎臟、脾臟和腦中均未檢測(cè)到病毒。肺臟中的病毒含量為2.25log_(10)EID50/mL,鼻甲中的病毒含量為1.75log_(10)EID50/mL。為了解山東省豬群中SIV的感染情況,采用HI抗體檢測(cè)方法,對(duì)764份血清進(jìn)行檢測(cè)。這對(duì)闡明豬流感病毒特性提供了進(jìn)一步的理論和實(shí)驗(yàn)方面的參考依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S852.651
【圖文】：

圖 9 感染后小鼠的體重變化Fig.9 Body weight changes after infection in mice3.14 小鼠臟器中病毒含量的滴定結(jié)果用 106EID50/50 μl 劑量H3N2亞型豬流感病毒經(jīng)過(guò)鼻腔感染小鼠后于第3天采集鼠臟器進(jìn)行病毒滴定，滴定結(jié)果顯示，小鼠感染病毒 3 天后，病毒僅在肺臟和鼻甲骨中分離到含量較低的病毒，在腦、脾和腎臟中均未檢測(cè)到病毒復(fù)制。在肺臟中，病毒制滴度在 2.25log10EID50/ml。在鼻甲骨，病毒復(fù)制滴度 1.75log10EID50/ml。

圖 9 感染后小鼠的體重變化Fig.9 Body weight changes after infection in mice3.14 小鼠臟器中病毒含量的滴定結(jié)果用 106EID50/50 μl 劑量H3N2亞型豬流感病毒經(jīng)過(guò)鼻腔感染小鼠后于第3天采鼠臟器進(jìn)行病毒滴定，滴定結(jié)果顯示，小鼠感染病毒 3 天后，病毒僅在肺臟和鼻甲中分離到含量較低的病毒，在腦、脾和腎臟中均未檢測(cè)到病毒復(fù)制。在肺臟中，病制滴度在 2.25log10EID50/ml。在鼻甲骨，病毒復(fù)制滴度 1.75log10EID50/ml。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2726018