【摘要】：甘露寡糖(Manno-oligosaccharides,MOS)是一種常見的功能性寡糖,具有促進(jìn)腸道有益菌增殖,抑制腸內(nèi)病原菌的黏附、增加腸粘膜免疫應(yīng)答等作用。但目前對于甘露寡糖的結(jié)構(gòu)與功能特性及作用機(jī)制研究相對較少。本研究通過模擬胃腸道環(huán)境及飼料加工工藝對甘露寡糖結(jié)構(gòu)的影響;通過將甘露寡糖分別與嗜酸乳桿菌和大腸桿菌的共培養(yǎng),探討甘露寡糖對細(xì)菌凝集的影響;以IPEC-1腸道上皮細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?研究寡糖對腸道細(xì)菌作用機(jī)制。(1)實(shí)驗(yàn)選用6 mol/L HCl溶液、0.1mol/L HCl溶液、120℃及0.15 MPa和120℃高溫條件對酵母源甘露寡糖PW120和PW220進(jìn)行處理,結(jié)果表明:6 mol/L鹽酸、0.1mol/L鹽酸、高溫高壓或高溫對甘露寡糖的官能團(tuán)結(jié)構(gòu)沒有影響;0.1mol/LHCl致使甘露寡糖的表面結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,出現(xiàn)孔洞,而6 mol/LHCl、高溫高壓和高溫可使甘露寡糖表面結(jié)塊并伴有孔洞生成;甘露寡糖PW120和PW220分別在270.94℃和267.76℃時(shí)物質(zhì)失重速率達(dá)到峰值,質(zhì)量損失率分別為76.472%和74.156%,且PW120的熱穩(wěn)定性高于PW220;兩種寡糖經(jīng)過高溫高壓、高溫處理對其晶體結(jié)構(gòu)影響不顯著,而稀鹽酸和濃鹽酸則改變甘露寡糖的晶胞結(jié)構(gòu)。(2)將嗜酸乳桿菌和大腸桿菌分別在添加甘露寡糖PW120和PW220的培養(yǎng)液中37℃培養(yǎng)24 h,觀察菌體狀態(tài),并測定OD_(600)值。結(jié)果表明:1%甘露寡糖對嗜酸乳桿菌和大腸桿菌都產(chǎn)生了凝集作用。0.2%的兩種甘露寡糖在6~9 h對大腸桿菌的凝集作用顯著(P0.05),0.5%的甘露寡糖PW120在12~24 h對大腸桿菌凝集效果顯著(P0.05)。在添加0.2%~2.0%的甘露寡糖培養(yǎng)液中,兩種甘露寡糖在3~24 h對嗜酸乳桿菌均有凝集作用(P0.05),其中0~12 h,0.5%甘露寡糖PW220和0.2%甘露寡糖PW120對嗜酸乳桿菌凝集作用顯著(P0.05);12~24 h,均為1%的甘露寡糖PW220和PW120對嗜酸乳桿菌的凝集作用最強(qiáng)(P0.05)。(3)以豬小腸上皮細(xì)胞(IPEC-1)為模型,探討不同濃度甘露二糖和甘露三糖抑制菌體對IPEC-1細(xì)胞黏附、侵襲和損傷的影響。結(jié)果表明甘露二糖和甘露三糖能顯著抑制大腸桿菌對IPEC-1細(xì)胞的黏附與侵襲,但對嗜酸乳桿菌沒有顯著的影響。嗜酸乳桿菌對IPEC-1具有一定的黏附能力,但不具有侵襲PEC-1細(xì)胞的能力。甘露二糖、甘露三糖濃度在40μg/mL對大腸桿菌的黏附抑制達(dá)到最強(qiáng);甘露二糖、甘露三糖能降低大腸桿菌和嗜酸乳桿菌對IPEC-1細(xì)胞的損傷。
【學(xué)位授予單位】：河南工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S816
【圖文】：

糖的掃描電子顯微鏡分析甘露寡糖分別用稀鹽酸、濃鹽酸、高溫高壓、高溫等四種微鏡對寡糖的表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，所得圖片見圖 11~圖 20 的空白對照組與分別經(jīng)過 0.1mol/L 稀鹽酸、6 mol/L 濃鹽條件處理過的掃描電鏡圖。從圖中可以看出，經(jīng)過幾種物20 寡糖表面結(jié)構(gòu)變化較大，差異顯著。具體如下，從形態(tài)態(tài)類似于石子橢球狀；經(jīng)過鹽酸處理過的寡糖顆粒為黏連高溫高壓處理，寡糖顆粒變?yōu)樗槠瑺�，類似于珊瑚礁；而出現(xiàn)密集的針孔。

的層次感；經(jīng)過高溫高壓處理，寡糖顆粒變?yōu)樗槠瑺�，類似于珊瑚礁；而�?jīng)過高溫處理后寡糖表面則出現(xiàn)密集的針孔。圖 11 PW120 空白對照（原始樣品）掃描電鏡圖

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2722216