發(fā)布時間：2020-06-18 22:59

【摘要】：肌內(nèi)脂肪含量(IMF)的高低直接影響肉的嫩度、多汁性及風(fēng)味。IMF含量受到了遺傳、營養(yǎng)、環(huán)境等多種因素的共同影響。肌內(nèi)脂肪前體細胞是研究肌內(nèi)脂肪形成的良好模型。AMPK是細胞調(diào)節(jié)能量代謝最重要的酶之一,參與了糖、脂肪及蛋白質(zhì)的代謝過程。本試驗旨在研究AMPK在羔羊肌內(nèi)脂肪前體細胞分化中的作用及機制。本試驗取3日齡羔羊背最長肌,采用差速貼壁法分離肌束膜中原代細胞。改變AMPK與Wnt信號通路的活性并誘導(dǎo)細胞成脂分化,采用qRT-PCR和Western blotting方法檢測脂肪細胞分化關(guān)鍵基因及蛋白的表達,應(yīng)用油紅O染色觀察成熟脂肪細胞的油滴情況。試驗結(jié)果如下:1、AMPK激活顯著減少了油紅的著色(P0.05),抑制了PPARγ、C/EBPα和aP2等關(guān)鍵基因的mRNA及蛋白含量(P0.01),而抑制AMPK活性則表現(xiàn)出相反的結(jié)果。2、激活Wnt信號通路活性顯著抑制了肌內(nèi)脂肪前體細胞的分化,并下調(diào)了PPARγ、C/EBPα和aP2等基因的表達,而抑制Wnt信號通路活性則促進了細胞的成脂分化。3、AMPK的活性變化未影響β-catenin的轉(zhuǎn)錄,但顯著改變了 β-catenin的蛋白表達(P0.05)。4、進一步研究表明,AMPK活化后顯著增加了 GSK3β的磷酸化水平(P0.01),降低了其活性。綜上所述,AMPK通過改變GSK3β的活性影響胞內(nèi)β-catenin穩(wěn)定性,進而影響羔羊肌內(nèi)脂肪前體細胞的成脂分化。
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S826
【圖文】：

ｌ．ｌ脂肪細胞定向階段逡逑多種細胞因子參與了脂肪細胞的定向分化階段調(diào)控，包括Ｗｎｔｓ，ＧＡＴＡ和ＡＰ－ｌ等。逡逑Ｗｎｔｓ是一種調(diào)控細胞生長和細胞命運的旁分泌和自分泌因子家族，超過１６種分泌逡逑糖蛋白［１４］，Ｗｎｔ信號可維持前體脂肪細胞的不分化狀態(tài)，在前脂肪細胞中抑制Ｗｎｔ信號逡逑會導(dǎo)致自發(fā)分化，表明前脂肪細胞產(chǎn)生的內(nèi)源性Ｗｎｔ信號是一種有效的分化抑制因子。逡逑Ｗｎｔ信號抑制脂肪細胞分化是通過減少ＰＰＩｙ和Ｃ／ＥＳＰｃｉ的表達。此外，Ｗｎｔ通路的激逡逑活減弱了棕色脂肪標(biāo)記基因ｔ／ＣＰｉ和輔激活因子ＰＧＣ－７ａ的表達，在成熟的棕色逡逑脂肪細胞中，用ｔ／ＣＰ－７啟動子激活ＷｎｔｌＯｂ，會刺激棕色脂肪細胞向白色脂肪細胞轉(zhuǎn)變逡逑［１５］。研宄表明＾＾也５３、＼＾泣１０１３在脂肪細胞生成過程中不表達；而＼＾付１０１３缺乏會增加逡逑肌纖維的脂質(zhì)積累，增加肌細胞的脂肪生成潛能；相比之下Ｗｎｔ邋１０ｂ的過度表達抑制了逡逑白色脂肪和棕色脂肪的發(fā)育［１６］。逡逑ＧＡＴＡ是鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子家族，包括六種成分（ＧＡＴＡ１－６），影響脂肪細胞分化的逡逑主要是該家族的ＧＡＴＡ－２和ＧＡＴＡ－３兩種成員。在前體脂肪細胞階段，ＧＡＴＡ－２和ＧＡＴＡ－３逡逑

Ｆｉｇ．２－１邋Ｌｏｃａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ邋ｆａｔ邋ａｎｄ邋ｉｎｔｅｒｍｕｓｃｕｌａｒ邋ｆａｔ逡逑２．１肌內(nèi)脂肪生成逡逑肌內(nèi)脂肪的早期發(fā)育發(fā)生在胚胎發(fā)育過程中，晚期妊娠有明顯的表現(xiàn)，在產(chǎn)后快速逡逑發(fā)育，在青春期后期發(fā)育減慢逡逑在產(chǎn)前階段，骨骼肌發(fā)育主要包括肌肉纖維細胞、脂肪細胞和成纖維細胞的發(fā)育。逡逑這些細胞來自于一個共同的多功能細胞，間充質(zhì)祖細胞。在胎兒骨骼肌發(fā)育過程中，間逡逑充質(zhì)祖細胞首先分化為肌原性或纖維／脂肪細胞系。肌原性細胞系進一步發(fā)展為肌肉纖維，逡逑肌內(nèi)脂肪，肌間脂肪，棕色脂肪細胞和衛(wèi)星細胞；纖維／脂肪細胞系細胞則發(fā)展為肌肉的逡逑基質(zhì)血管細胞，包括白色脂肪細胞、成纖維細胞和靜止的纖維／脂肪祖細胞ＦＡＰｓ逡逑（ｆｉｂｒｏ／ａｄｉｐｏｇｅｎｉｃ邋ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ）。這些靜止的ＦＡＰｓ用于出生后的脂肪形成和成熟肌肉中逡逑的纖維形成在發(fā)育后期通過增大脂肪細胞體積和重量來完成脂肪的沉積。逡逑２．２肌內(nèi)脂肪與肉品質(zhì)的相關(guān)性逡逑ＩＭＦ含量顯著影響肉的風(fēng)味，多汁性，嫩度和肉的總體可接受性［４５，４６】。低含量的ＩＭＦ逡逑

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本文編號：2719957