發(fā)布時間：2020-06-17 09:57

【摘要】：蛇是一種具有較高的經(jīng)濟價值的特種動物,在醫(yī)藥和食品工業(yè)方面都有非常廣闊的前景。銅綠假單胞菌可產(chǎn)生多種致病因子損害機體組織,引起各種病變和炎癥,給養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴重的經(jīng)濟損失。目前,銅綠假單胞菌感染家畜的報道很多,但是感染蛇的報道極少。2013年11月陜西商洛的某蛇養(yǎng)殖場的蛇突然發(fā)病,為了研究可能性病原,從蛇病變組織分離細菌,并對分離菌進行生化特性、耐藥性、致病性以及16SrRNA序列分析,主要獲得以下結(jié)果:1、從病蛇的病變組織中分離到2株共同性細菌,命名為B2和2G2。分離細菌可在普通培養(yǎng)基上生長,菌落呈圓形,菌落中等大小,光滑,濕潤,邊緣整齊,產(chǎn)生綠色色素,并向周圍擴散,使培養(yǎng)基著色。在血平板上出現(xiàn)溶血環(huán),麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)24 h后,菌落為成紅色。對細菌進行革蘭染色鏡檢,結(jié)果顯示為陰性,中等大小桿菌,根據(jù)以上特點,分離菌疑似假單胞綠膿菌。2、將分離菌進行糖發(fā)酵試驗,分離菌不發(fā)酵葡萄糖、乳糖、木糖、蔗糖等,M-R試驗和V-P試驗呈陰性,觸酶和氧化酶試驗呈陽性,符合銅綠假單胞菌的生化特性。3、對分離細菌的16SrRNA進行序列測定,并與標準參考菌株進行序列比對分析、構(gòu)建系統(tǒng)進化樹。結(jié)果表明,B2和2G2兩株細菌的16SrRNA序列的同源性接近100%,B2和2G2的核苷酸序列與銅綠假單胞菌標準菌株核苷酸的同源性為99.9%,且這兩株細菌與發(fā)表的菌株MW3A同源性最接近,由此可將分離株B2和2G2確定為銅綠假單胞桿菌。將其兩株細菌的基因序列已經(jīng)上傳到Genbank,分別命名為:B2和2G2,登陸號分別為KP099548、KP099549。4、用藥敏試驗檢測了兩株分離菌對抗生素的耐藥性,結(jié)果表明分離菌對紅霉素、四環(huán)素、苯挫西林、氯霉素、氨芐西林、復(fù)方新諾明等具有很強的抗藥性,為該蛇病的治療提供了理論依據(jù)。5、致病性結(jié)果顯示B2和2G2均有很強的毒性,腹腔注射72 h之后,試驗組小白鼠全部死亡。死亡小白鼠的心臟、肝臟、腎臟、肺等組織均有明顯病變。綜上所述,本研究中的病例為銅綠假單胞菌病,且分離出的銅綠假單胞菌具有很強的耐藥性和致病性。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S858.9

【參考文獻】

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1 陳衛(wèi)東;唐中華;徐峰;;TAC方案聯(lián)合使用綠膿桿菌制劑在乳腺癌新輔助化療中的應(yīng)用研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年06期

本文編號：2717438