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BVDV的分離鑒定及BVDV-1型毒株感染細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2020-06-14 20:38
【摘要】:本研究采用RT-PCR檢測方法從內(nèi)蒙古呼和浩特某屠宰場采集的32份牛肺臟樣品中檢測到兩個(gè)BVDV陽性樣本。通過在MDBK細(xì)胞上傳代、IFA鑒定、5'-UTR序列測定及分子進(jìn)化分析對其進(jìn)行分離鑒定。結(jié)果顯示兩分離株在MDBK細(xì)胞中盲傳10代后沒有產(chǎn)生病變;經(jīng)IFA檢測,在病毒感染的細(xì)胞中可見明顯的特異性熒光;系統(tǒng)進(jìn)化分析表明兩毒株屬于BVDV-2a型,將兩毒株命名為HT1704、HT1723 株。在相繼研究中,應(yīng)用DIA技術(shù)對BVDV-1型的CP型毒株和NCP型毒株分別感染MDBK細(xì)胞后18 h和48 h進(jìn)行定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析,同時(shí)設(shè)有未感染病毒的細(xì)胞對照。對定量到的5094個(gè)有效蛋白進(jìn)行差異表達(dá)篩選以及生物信息學(xué)分析,將四組樣本(CP18hpi、CP48hpi、NCP18hpi和NCP48hpi)與相應(yīng)對照組比對分析,分別篩選到351、327、156、120個(gè)差異蛋白。差異表達(dá)蛋白主要參與代謝過程、生物調(diào)節(jié)以及定位作用等生物過程。兩生物型毒株在感染早期與晚期的差異表達(dá)蛋白在參與通路等方面存在差異。本研究為BVDV的致病機(jī)制及防控思路的研究提供了一定的參考依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S852.653
【圖文】:

BVDV的分離鑒定及BVDV-1型毒株感染細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)分析


瘟病毒的基因組結(jié)構(gòu)

BVDV的分離鑒定及BVDV-1型毒株感染細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)分析


圖2邋RT-PCR檢測結(jié)果逡逑Fig.2邋Amplification邋of邋5’-UTR邋fragment邋in邋BVDV逡逑圖2A肺臟樣品RT-PCR檢測結(jié)果逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2713325

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