【摘要】：紫花地丁(Viola yedoensis)系堇菜科(Violaceae)堇菜屬(Viola L.)多年生草本植物,是中國傳統(tǒng)中藥之一,入藥部分為干燥全草,發(fā)揮抗菌消炎、清熱解毒、涼血消腫之功效�，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)紫花地丁具有較好的抗病毒、抗炎、抑菌及抗腫瘤等活性。因目前紫花地丁提取物的抗炎活性研究較少,因此本試驗(yàn)從紫花地丁的成分分離檢識、體內(nèi)抗炎活性研究及其對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的宿主細(xì)胞體外抗炎活性的影響三部分展開實(shí)驗(yàn)研究紫花地丁化學(xué)成分及其抗炎活性。目的:研究紫花地丁不同溶劑提取物的化學(xué)成分組成;篩選出紫花地丁的最佳有抗炎作用的溶劑提取物;探究紫花地丁最佳體內(nèi)抗炎溶劑提取物的體外抗炎作用。方法:1.采用不同極性溶劑分別以浸提法和乙醇回旋冷凝法對紫花地丁全草的化學(xué)成分進(jìn)行提取,試管法和圓形濾紙法檢識不同溶劑提取物中的化學(xué)成分,減壓濃縮制得各溶劑提取物的浸膏并稱重、計(jì)算得膏率;2.給小鼠灌服回旋冷凝法提取的紫花地丁的不同提取物后,用二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳廓腫脹、1%冰乙酸改變小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性、角叉菜膠誘導(dǎo)大鼠足跖腫脹進(jìn)行急性炎癥造模、ELISA法檢測炎性組織中PGE_2含量、硝酸還原酶法檢測炎性組織中NO含量等試驗(yàn),研究不同溶劑提取物的抗炎效果;3.以乙醇回旋冷凝法提取的乙酸乙酯提取物溶液干預(yù)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞體外炎癥模型,ELISA法檢測其對RAW264.7細(xì)胞釋放NO、腫瘤壞死因子(TNF-α)、IL-1β、IL-6的影響,熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測其對炎性巨噬細(xì)胞中TNF-α、iNOS和C0X-2相對表達(dá)水平的影響,研究分析紫花地丁乙酸乙酯提取物的體外抗炎活性。結(jié)果:1.通過檢識得知紫花地丁中含有酚類和鞣質(zhì)、生物堿、有機(jī)酸、油脂類、香豆素和內(nèi)酯類、黃酮類、皂苷類等成分;檢識出回旋冷凝法制得的乙酸乙酯提取物主要含有黃酮類、有機(jī)酸等化合物成分;回旋冷凝提取法得各溶劑提取物的得膏率高于浸提法;2.給小鼠灌服適當(dāng)濃度的回旋冷凝法提取的乙酸乙酯提取物溶液抑制二甲苯致耳廓炎效果與生理鹽水組有顯著性差異(P0.05);在整個監(jiān)測小鼠足跖腫脹抑制率過程中乙酸乙酯提取物組與生理鹽水組比較均差異極顯著(P0.01),石油醚提取物組及水相提取物組也有抑制小鼠足跖腫脹的趨勢,但差異不明顯,乙酸乙酯提取物能減少炎癥組織中PGE_2含量,與生理鹽水組比較差異顯著(P0.05);紫花地丁各溶劑提取物干預(yù)小鼠腹腔注射1%冰乙酸引起毛細(xì)血管通透性增加試驗(yàn)中,乙酸乙酯提取物組的光密度值(OD值)與生理鹽水組比較差異顯著(P0.05);紫花地丁的乙酸乙酯提取物組與生理鹽水組比較顯著減少了釋放到炎性組織中的NO(P0.05);3.回旋冷凝法制得的紫花地丁的乙酸乙酯提取物能顯著抑制炎性細(xì)胞NO(P0.05)的釋放和顯著降低了炎性細(xì)胞IL-1β、IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子含量及iNOS、TNF-α、COX-2 mRNA的表達(dá)量。結(jié)論:摸清了紫花地丁的化學(xué)成分由酚類和鞣質(zhì)、生物堿、有機(jī)酸、油脂類、香豆素和內(nèi)酯類、黃酮類、皂苷類等組成,回旋冷凝法的得膏率優(yōu)于浸提法;篩選出乙酸乙酯提取物是紫花地丁具有抗炎活性的提取物;回旋冷凝法提取的乙酸乙酯提取物能下調(diào)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞IL-1β、IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子的釋放量和下調(diào)TNF-α、COX-2、iNOS mRNA的表達(dá)量。
【圖文】：

紫花地丁各溶劑提取物對二甲苯致耳廓腫脹影響

紫花地丁不同提取物對炎性足跖腫脹度的影響
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S853.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2709846