【摘要】：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指作為醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)、獸醫(yī)學(xué)等的科研、教學(xué)、醫(yī)療、鑒定、診斷、生物制品制造等需要為目的培育的主要供實(shí)驗(yàn)用的動(dòng)物,遵循實(shí)驗(yàn)動(dòng)物原則。醫(yī)學(xué)上,常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來探索人類疾病的發(fā)病機(jī)制,以及尋找預(yù)防和治療的方法,小鼠和大鼠為首要選擇。本實(shí)驗(yàn)研究對象Wistar大鼠來自吉林大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,雄鼠在體重170g-220g,日齡4-5周(斷乳一周)左右產(chǎn)生發(fā)生腹瀉現(xiàn)象,且部分導(dǎo)致死亡,一周左右恢復(fù)健康,期間雌鼠不產(chǎn)生腹瀉現(xiàn)象。由于腹瀉的原因,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生長發(fā)育出現(xiàn)了較大問題。本實(shí)驗(yàn)是在相同條件下分籠飼養(yǎng)大鼠,待到發(fā)病時(shí)候,將腹瀉雄性大鼠、正常雄性大鼠和雌性大鼠同時(shí)解剖,對其主要器官及消化器官做成石蠟切片,進(jìn)行HE染色并觀察組織學(xué)變化,結(jié)果表明腹瀉雄性大鼠肝臟組織有出血點(diǎn),推測是由腹瀉疾病造成;將實(shí)驗(yàn)大鼠的十二指腸內(nèi)容物與空腸內(nèi)容物樣本提取DNA,利用通用引物進(jìn)行PCR,并將產(chǎn)物進(jìn)行16SrDNA宏基因組測序。通過16SrDNA的測序結(jié)果進(jìn)行聚類分析、菌種分析、Alpha多樣性分析樣本之間的差異。聚類結(jié)果表明發(fā)現(xiàn)雌性大鼠有感染,但是無腹瀉癥狀,表明該腹瀉類型為雄性大鼠特異性疾病。通過菌群差異分析和功能基因分析結(jié)果表明:乳酸桿菌、嗜血桿菌等有益菌大量減少,瘤胃球菌、考拉桿菌、顫桿菌、糞芽孢桿菌、脫硫弧菌、幽門螺旋桿菌、普氏桿菌、擬桿菌、Dorea梭菌屬和梭狀芽孢桿菌XVIII等有害菌數(shù)量增多,導(dǎo)致菌群比例失調(diào)。本研究采用16SrDNA組學(xué)技術(shù),對吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心所飼養(yǎng)的Wistar大鼠的性別特異性腹瀉致病病因進(jìn)行了研究,其結(jié)果為預(yù)防和治療大鼠腹瀉疾病提供了病因?qū)W依據(jù),同時(shí)為實(shí)驗(yàn)用的大鼠的供應(yīng)和健康保障奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

(5)染色的注意事項(xiàng)：不同染色不同的配置方法處理后結(jié)果不同；室內(nèi)溫度、染液的新鮮程度及實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況都會(huì)影響染色效果，靈活操作；水溶性伊紅脫水前進(jìn)行染色，醇溶性伊紅使用與溶解伊紅等濃度的酒精開始脫水；在二甲苯脫蠟之前先在 60℃烤箱內(nèi) 0.5~1 小時(shí)，有利于脫蠟且切片牢固不脫落；二甲苯脫蠟、透明的作用。它好壞取決于切片在二甲苯內(nèi)放置的時(shí)間和脫蠟時(shí)的溫度以及其使用次數(shù)。好切片非常透明，有利于在顯微鏡觀察；用梯度酒精脫水時(shí)，低濃度酒精中時(shí)間短，，在高濃度時(shí)逐步延長；在酸性分化液內(nèi)停留的時(shí)間適中，細(xì)胞核內(nèi)結(jié)構(gòu)不易脫色。不做分化處理的注意染色時(shí)間，放置染色過度或過輕。1.3 結(jié)果1.3.1 實(shí)驗(yàn)大鼠肝臟切片觀察(1)正常雄性大鼠肝臟 HE 染色切片(1-1、1-2、1-3 正常雄性大鼠)結(jié)果圖 1.1.11-1-100 倍 1-2-100 倍1-3-100 倍

瀉雄性大鼠肝臟切片(2-2、2-3 為腹瀉雄性大鼠)結(jié)果如圖 1.1.22-2-100 倍2-2-200 倍2-3-1-100 倍2-3-1-200 倍為腹瀉雄性大鼠肝臟組織石蠟 HE100 倍和 200 倍的切片圖 1.1.2 腹瀉雄性大鼠肝臟切片F(xiàn)ig 1.1.2 Diarrhea male rat liver slice觀察經(jīng) HE 染色的肝臟組織切片，發(fā)現(xiàn) 2-3 偶見壞死及出血。雌性大鼠肝臟切片(3-1、3-4 為雌性大鼠)結(jié)果如圖 1.1.33-1-100 倍 3-1-200 倍
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S858.91

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本文編號：2703789