【摘要】：牛病毒性腹瀉-黏膜病(Bovine viral diarrhea-mucosaldisease,BVD/MD)是一種由RNA病毒—牛病毒性腹瀉病病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)所引起的以腹瀉、發(fā)熱、白細(xì)胞減少、口腔黏膜潰爛、懷孕母畜流產(chǎn)等一系列臨床癥狀為特征的牛病毒性、接觸性的傳染病,當(dāng)前農(nóng)業(yè)部公告已經(jīng)將BVDV定為三類疫病,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)也將其設(shè)為B類傳染病。目的:由于國(guó)際合作交流貿(mào)易的日益頻繁以及RNA病毒的高頻突變型,使得BVDV出現(xiàn)了許多新的基因型和基因亞型,給BVDV的防控造成一定的難度。本研究通過對(duì)新疆某牛場(chǎng)發(fā)生的疑似牛病毒性腹瀉病診斷分析、對(duì)新疆不同地區(qū)不同養(yǎng)殖類型牛進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)的調(diào)查、血清學(xué)檢測(cè)以及分子流行病學(xué)檢測(cè),了解新疆不同地區(qū)BVDV的血清學(xué)和分子流行病學(xué)的感染情況,鑒定流行株的基因型和基因亞型。方法:1.使用詢問、臨床觀察、以及查閱免疫記錄的方法對(duì)新疆12個(gè)不同地區(qū)的16個(gè)牛場(chǎng)關(guān)于在BVD/MD發(fā)病、牛群的健康水平以及疫苗的免疫和流行情況進(jìn)行調(diào)查;2.應(yīng)用現(xiàn)場(chǎng)解剖、采樣送檢等方法對(duì)新疆某牛場(chǎng)發(fā)生的牛群腹瀉進(jìn)行診斷分析;3.應(yīng)用間接ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)從新疆不同地區(qū)采集的5833份血清樣品進(jìn)行BVDV抗體、抗原的檢測(cè);4.對(duì)臨床檢測(cè)疑似BVDV感染的牛和血清抗原檢測(cè)陽性率高的北疆地區(qū)牛采集樣品,分別進(jìn)行病毒的分離培養(yǎng)以及鑒定,同時(shí)把培養(yǎng)的病毒接種MDBK細(xì)胞,觀察細(xì)胞病變,然后把培養(yǎng)的病毒和屠宰場(chǎng)采集的脾臟組織分別進(jìn)行RNA的提取、RT-PCR的擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳分析、陽性樣本回收測(cè)序,分析測(cè)序結(jié)果的正確序列,構(gòu)建進(jìn)化樹等方法進(jìn)行分析新疆地區(qū)BVDV主要的流行基因型和基因亞型。結(jié)果:1.新疆不同地區(qū)由于飼養(yǎng)管理、養(yǎng)殖環(huán)境以及疫苗免疫存在差別而使BVDV的感染也不同,以北部地區(qū)最高,西部地區(qū)和南疆地區(qū)次之,東部地區(qū)最低;2.發(fā)生腹瀉的牛場(chǎng)經(jīng)臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷,確診為BVDV的感染;3.血清學(xué)檢測(cè)抗體陽性率為52.03%(3035/5833),抗原陽性率為3.35%(13/388),并且是犢牛以及青年牛陽性率高于成年牛;4.從采集的病料樣品中成功分離出了新疆地區(qū)主要流行的毒株命名為JD001株,病毒接種MDBK細(xì)胞未見細(xì)胞病變;20份臨床疑似組織樣品的RT-PCR結(jié)果14份是陽性。結(jié)論:1.BVDV的感染因地域和飼養(yǎng)管理不同存在差別,疫苗接種地區(qū)明顯的抗體陽性率高;2.抗體、抗原陽性率水平不因養(yǎng)殖模式不同而存在差別,則說明養(yǎng)殖方式并不影響該病的流行,犢牛以及懷孕母牛的抗原陽性率最高,說明犢牛以及懷孕母牛容易感染BVDV;3.成功分離得到了新疆地區(qū)主要流行的毒株JD001株且為不致細(xì)胞病變型毒株,進(jìn)化分析得到新疆地區(qū)流行株的基因型是BVDV-1型,基因亞型是1q。BVDV在新疆的感染率高、危害大,并且造成巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),應(yīng)加強(qiáng)對(duì)BVDV的防控。
【圖文】：

現(xiàn)場(chǎng)流調(diào)和血清學(xué)樣品來源分布圖

病死牛剖解圖片
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S858.23

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2700263